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第十七章动物细胞培养制药工艺●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●C经④验诱生剂2细胞°:"细胞浓缩纯化提取纯化产品(单克隆抗体)提取产品(肿瘤抗原纯化产品(干扰素)动物细胞培养的应用●●●●0●●●●作为反应器用于制药:EP0,tPA作为宿主细胞用于制药:病毒性疫苗杂交瘤细胞:单克隆抗体,诊断、治疗组织再生与器官移植(个体克隆):本身作为产品:皮肤移植,干细胞治疗药学研究应用:分子与细胞药理、毒理、代谢生命科学研究:器官发生,细胞、分子、遗传学动物细胞培养制药工艺17.1制药动物细胞的表达系统与特征7.2基因工程动物细胞系的构建17.3动物细胞培养基的制备17.4动物细胞培养技术17.5培养过程检测与工艺控制17.1制药动物细胞的表达系统与特征171制药动物细胞的表达系统与特企Q了-、动物细胞的结构与功能二、制药动物细胞的种类了三、生产用细胞系了四、动物细胞的生产特征●●●●●了1.动物细胞的结构与功能●0●●●●形态特征细膜田质坐小细胞膜细胞质细胞商尔船体6细胞核线粒体2没有细胞壁粗楼内质网亚细胞器酯体光内质网过氧化物南体2、动物细胞培养的代谢特征●●●了葡萄糖和谷氨酰胺:能量和合成代谢的前体。了葡萄糖限制:通过增加谷氨酰胺消耗得以补偿,反之亦然。了葡萄糖代谢:糖酵解为主,生成丙酮酸和乳酸,乳酸分泌到胞外并在培养液中积累。另一条途径为TCA循环,彻底氧化产生CO2和水。一小部分为戊糖磷酸途径,生成4、5、7碳糖和NADPH。了中间产物进入脂肪酸代谢、核酸代谢和氨基酸代谢。了葡萄糖代谢旺盛,产生大量乳酸,对细胞有毒性。三羧酸循环●●●●●●0●酪氨脂肪酸苯丙氨酸丙酬酸蛋白质亮氨酸分解合成乙酰辅酶A异亮氨酸色氨酸天冬氨酸草酸乙草酰柠檬酸葡萄糖苹果酸乙酰辅酶A天冬氨酸异柠檬酸脂肪酸胆固醇苯丙氨酸延胡索酸酪氨酸酸一谷氨酸合成异亮氨酸蛋氨酸耽珀酸单秩辅酶A蛋白质低酸苏氨酸血红素奇数脂肪酸2、动物细胞培养的代谢特征●●●谷氨酰胺代谢:脱氨、转氨等,合成其他非必需氨基酸脱氨作用:生成谷氨酸,脱氦产生的氨,对细胞有毒性。转氨作用:生成嘧啶,嘌呤,氨基糖等合成代谢前体谷氨酰胺与丙酮酸发生转氨作用,生成丙氨酸,进入培养液并积累。离体动物细胞,转氨是主要代谢途径Gn是动物细胞的氮源,GI

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