细菌培养基课件

=细菌培养基2011562赵健乔2011563苟强1a=细菌培养基2011562赵健乔1a一基本理论二培养基的分类三培养基的主要成分及其作用四培养基配制原则五培养基使用注意事项六常用培养基及制备方法2a一基本理论2a一基本理论培养基的定义：培养基是按照微生物生长繁殖或积累代谢产物所需要的各种营养物质，由人工配制而成的营养基质，它专供微生物培养、分离、鉴别、研究和保存用。培养基的用途：主要用于繁殖及分离纯化细菌、传代和保存菌种、鉴别细菌种属、研究细菌生理及生化特性、制造菌苗、疫苗和其他微生物制剂等。3a一基本理论培养基的定义：3a二培养基的分类按用途分类按物理性状分类按成分分类4a二培养基的分类按用途分类按物理性状分类按成分分类4a1.按用途分类基础培养基营养培养基增菌培养基选择性培养基鉴别培养基显色培养基5a1.按用途分类基础培养基营养培养基增菌培养基选择性培养基鉴别选择性培养基加入青霉素等抗生素的培养基：分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基：分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基：分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基：分离自养型微生物加入氨基嘌呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基：分离杂交瘤细胞6a选择性培养基加入青霉素等抗生素的培养基：分离酵母菌、霉菌等真2.按物理性状分类液体培养基流体培养基半固体培养基固体培养基7a2.按物理性状分类液体培养基流体培养基半固体培养基固体培养基液体培养基：不含凝固剂，利于菌体的快速繁殖、代谢和积累产物

流体培养基：含0.05-0.07%琼脂粉，可降低空气中氧进入培养基的速度，利于一般厌氧菌的生长繁殖

半固体培养基：含0.2-0.8%琼脂粉，多用于细菌的动力观察、菌种传代保存及贮运细菌标本材料

固体培养基：含1.5-2%琼脂，用于细菌的分离、鉴定、菌种保存及细菌疫苗制备等多方面8a液体培养基：不含凝固剂，利于菌体的快速繁殖、代谢和积累产物3.按成分分类合成培养基天然培养基半合成培养基9a3.按成分分类合成培养基天然培养基半合成培养基9a三培养基的主要成分及其作用营养物质水分凝固物质抑制剂指示剂主要成分：10a三培养基的主要成分及其作用营养水分凝固抑制剂主主要营养物质蛋白胨牛肉浸液糖醇类血液鸡蛋和动物血清生长因子无机盐类11a主要营养物质蛋白胨11a四培养基配制原则2.营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。3.pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同。1.目的要明确：根据微生物的种类、培养目的等确定配制培养基的种类，因为不同的微生物对培养物质的需求不同。12a四培养基配制原则2.营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比五培养基使用注意事项配制培养基所用的化学药品，均应化学纯净。配制培养基时各种成分应准确称量。培养基的酸碱度，必须准确测定，特别对含有指示剂的培养基；测定酸碱度须于冷却后测定为准。制备的培养基必须保持澄清，以便细菌生长后，容易观察。液体培养基沉淀法和滤纸法；固体培养基可用脱脂棉花滤清。13a五培养基使用注意事项配制培养基所用的化学药品，均应化学纯净培养基必须达到完全无菌的目的。要注意有些培养基高压灭菌的磅数不可过高，时间不可过长，否则能使培养基变质。如乳糖高压灭菌磅数过高，可能分解为葡萄糖。制备的培养基不宜保存过久，以少量勤做为宜。平板及少量分装的试管培养基均宜保存于4℃冰箱内。培养基所用的一切玻璃器皿，必须是中性硬料，否则能影响培养基酸碱度。14a培养基必须达到完全无菌的目的。要注意有些培养基高压灭菌的磅数配制培养基的容器，不宜用铜或铁。含铜大于0.3mol/L时，细菌不易生长；含铁大于0.14mol/L妨碍细菌产生毒素。培养基分装时不宜超过容器的2/3，以免灭菌时溢出。15a配制培养基的容器，不宜用铜或铁。含铜大于0.3mol/L时，六常用培养基及制备方法牛肉膏0.3克蛋白胨1.0克NaCl0.5克水100毫升pH7.0～7.2在烧杯中加水，称取牛肉膏、蛋白胨和NaCl，加热溶化后，调节pH值至7.0～7.2。分装，加棉塞，高压蒸汽灭菌即成。常用于培养细菌。

ThemeGalleryisaDesignDigitalContent&ContentsmalldevelopedbyGuildDesignInc.1.营养肉汤培养基

16a六常用培养基及制备方法牛肉膏0.3克在烧杯中加水，称取牛六常用培养基及制备方法牛肉膏0.3克蛋白胨1.0克NaCl0.5克水100毫升pH7.0～7.2在营养肉汤培养基中增加20克琼脂即成。常用于培养细菌。ThemeGalleryisaDesignDigitalContent&ContentsmalldevelopedbyGuildDesignInc.2.营养琼脂培养基

17a六常用培养基及制备方法牛肉膏0.3克在营养肉汤培养基中增六常用培养基及制备方法蛋白胨20g琼脂25-30gNaCl5g乳糖(CP)10g胆盐(3号胆盐或牛胆酸钠)5g1%中性红水溶液5ml蒸馏水1000ml除去中性红水溶液外，其余各成分混合于锅内加热溶解。调pH值到7.0－7.2，煮沸，以脱脂棉过滤。加入1％中性红水溶液，摇匀，灭菌15分钟，待冷却至50℃时，倾倒平皿。待平皿内培养基凝固后，置温箱内烤干表面水分即可用。保存于冰箱内（4℃）。现有厂家专门配制、出售麦糠凯琼脂干粉剂，用时，加水溶解，灭菌后即成。3.麦糠凯（Macconkey）琼脂培养基

18a六常用培养基及制备方法蛋白胨20g除去中性红水溶液外，其余六常用培养基及制备方法可溶性淀粉2克

K2HPO40.05克

MgSO4·7H2O0.05克

KNO30.1克

NaCl0.05克

FeSO40.001克琼脂2克水100毫升

pH7.2～7.4在烧杯中加水95毫升，加热至沸腾，取可溶性溶粉2克，用5毫升水调成糊状，倒入沸水中和匀。再称取其它药品，陆续加入烧杯内（待一种药品溶解后，再加入第二种药品）。待全部药品溶解后，停止加热，补足失水，调pH值至7.2～7.4。分装后，高压蒸汽灭菌。本培养基常用于培养放线菌。

4.高氏一号培养基（淀粉琼脂培养基）

19a六常用培养基及制备方法可溶性淀粉2克在烧杯中加水95毫升常用于培养酵母菌。六常用培养基及制备方法马铃薯200克蔗糖10克琼脂20克水1000毫升自然pH称取200克马铃薯片，加水1000毫升，煮沸半小时，用纱布过滤，补足失水。在上述滤汁中加入10克蔗糖、20克琼脂，加热使琼脂熔化。分装后，高压蒸汽灭菌。5.马铃薯蔗糖培养基

20a常用于培养酵母菌。六常用培养基及制