促卵泡生成素测定标准操作规程

促卵泡生成素测定标准操作规程1.检验原理：ARCHITECT尿促卵泡素项目采用两步法免疫检测，运用Chemiflex技术，即化学发光微粒子免疫检测（CMIA）技术与灵活的检测模式结合，测定人血清和血浆中的尿促卵泡素。第一步，混合样本和抗－β尿促卵泡素包被顺磁性微粒。样本中的尿促卵泡素与抗－β尿促卵泡素包被微粒相结合。冲洗后进入第二步，添加吖啶酯标记的抗－α尿促卵泡素结合物。向反应混合物中添加预激发液和激发液；然后测量产生的化学发光反应，用相对发光单位（RLUs）表示。样本中的尿促卵泡素含量与ARCHITECTi光学系统检测到的RLUs值之间成正比。2.试剂主要组成成分2.1试剂盒微粒子：抗-β尿促卵泡素（小鼠，单克隆）包被的微粒子，储存于含有蛋白（牛和鼠）稳定剂的2-（N-吗啡啉）乙磺酸（MES）缓冲液中。最低浓度：0.1%固体物质。防腐剂：抗菌剂。结合物：1或4瓶（5.9mL/26.3mL）吖啶酯标记的抗－α尿促卵泡素（小鼠，单克隆）结合物，储存于含有蛋白（牛）稳定剂的2-（N-吗啡啉）乙磺酸（MES）缓冲液中。最低浓度：45ng/mL。防腐剂：抗菌剂。2.2需要但未提供的试剂预激发液：预激发液含有1.32%（W/V）过氧化氢激发液：激发液含有0.35N氢氧化钠浓缩清洗缓冲液：浓缩清洗缓冲液含有磷酸盐缓冲液。防腐剂：抗菌剂。3.样本要求：人血清（包括采集于血清分离管中的血清）或采集于肝素或EDTA钾抗凝管中的血浆。血清和血浆样本中应不含纤维蛋白、红细胞或其他颗粒物质。2-8℃可保存7天；-10℃以下可保存6个月。样本应避免反复冻融。4.检验方法：仪器法（详见雅培i1000标准操作规程）5.参考范围样本参考范围（mIU/ml）血清、血浆男性0.95-11.95女性卵泡期：3.03-8.08排卵期：2.55-16.69黄体期：1.38-5.47绝经期：26.72-133.416.检验结果的解释6.1促卵泡生成素项目通过四参数Logistic曲线拟合数据约简法（4PLC,Y加权）生成一条校准曲线6.2结果单位换算：（浓度mIU/mL）×(1)=IU/L7.检验方法的局限性7.1检测结果用于诊断时，应当与其他数据，如症状、其他检测结果、临床表现等结合使用。7.2尿促卵泡素检测结果与临床症状不符时，需要通过附加试验来验证检测结果。7.3接受小鼠单克隆抗体制剂诊断或治疗的患者，其样本中可能含有人抗小鼠抗体（HAMA）。使用含有小鼠单克隆抗体的试剂盒检测此类样本时，检测值可能会假性升高或降低。可能需要其他信息用于诊断。7.4人血清中的异嗜性抗体可与试剂中的免疫球蛋白发生反应，干扰体外免疫测定。18经常与动物或动物血清产品接触的患者，其样本可能容易受到此干扰，并使检测结果出现异常值。可能需要其他信息用于诊断。8.产品性能指标8.1分析灵敏度：经计算，ARCHITECT尿促卵泡素项目的分析灵敏度小于0.05mIU/mL(n=36)。分析灵敏度定义为ARCHITECT尿促卵泡素MasterCheck水平0（0.00mIU/mL）加上两个标准偏差的浓度，表示可与零区别的最低可测量的尿促卵泡素浓度。8.2分析特异性：ARCHITECT尿促卵泡素项目通过检测与LH、TSH和hCG的交叉反应性，以测定项目特异性。在经处理的牛血清分装样本中加入250mIU/mL的LH、100μIU/mL的TSH和200,000mIU/mL的hCG，然后测定尿促卵泡素浓度。交叉反应性计算为百分比交叉反应率，结果为LH0.002%、TSH0.043%、hCG0.001%。8.3精密度：ARCHITECT尿促卵泡素在检测低、中、高值质控品浓度范围内的样本时，精密度设定为≤10%（总CV）9临床意义：人尿促卵泡素（FSH，又称促卵泡激素）是一种分子量约为30,000道尔顿的糖蛋白类物质。同黄体生成激素（LH）、人绒毛膜促性腺激素（hCG）和促甲状腺激素（TSH）相同，尿促卵泡素也由两个亚基（α－和β-亚基）共价结合而成。尿促卵泡素的α-亚基由92个氨基酸组成，同LH、hCG和TSH的α-亚基非常相似，而尿促卵泡素的β-亚基具独特性，决定其免疫和功能的特异性。尿促卵泡素和LH调节性腺组织的生长和生殖活动。尿促卵泡素可促进卵巢中的卵泡发育和睾丸中的配子发生。垂体前叶的促性腺激素细胞在下丘脑内侧基底部的促性腺激素释放激素（LHRH或GnRH）的刺激下分泌尿促卵泡素和LH。尿促卵泡素和LH均呈脉冲式分泌，在正常范围内快速波动。尿促卵泡素的脉冲没有LH明显。垂体中尿促卵泡素和LH的分泌受到性腺的负反馈调节。在成熟女性中的尿促卵泡素还能够刺激卵泡发育。血液中的尿促卵泡素水平随着雌二醇和孕酮的周期性变化而变化。伴随月经中期LH的分泌高峰，血液中的尿促卵泡素水平会出现虽小但却明显的升高。但这种升高的生理学意义尚不明确。黄体期，血液中的尿促卵泡素水平随着黄体形成过程中雌二醇和孕酮的生成而降低。在绝经期，卵巢功能随雌二醇分泌量的减少而下降。随后，尿促卵泡素和LH水平随着雌二醇对促性腺激素释放的反馈抑制的减弱而增加。在男性中，尿促卵泡素、LH和睾酮可通过睾丸输精管中的支持细胞调节精子发生。尿促卵泡素对睾酮反馈抑制的敏感性低于LH，并受睾丸支持细胞生成的多肽类抑制素独立调节。由于负反馈机制调节促性腺激素的释放，因此，LH和尿促卵泡素浓度增加伴低浓度的生殖腺类固醇可作为性腺功能衰竭的指征。如在男性中观察到上述情况，说明可能存在原发性睾丸功能衰竭或无睾症。尿促卵泡素在Klinefelter综合征（曲细精管发育不全）中也可能升高，或支持细胞衰竭也会引起其升高。在女性中，尿促卵泡素升高而生殖腺类固醇降低的情况包括绝经、卵巢功能早衰和卵巢切除，而多囊卵巢综合征时可能伴随LH/尿促卵泡素比率增加。尿促卵泡素浓度异常也可能提示下丘脑—垂体轴功能紊乱。在性成熟的成年人当中，尿促卵泡素缺乏及低浓度的LH和性激素可提示