典型药物分析-抗生素药物的质量分析（药物分析课件）

典型药物分析--抗生素类目录

|Contents12概述β-内酰胺类34氨基糖苷类四环素类等

概述抗生素

在低微浓度下即可对某些生物（病原微生物）的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称分类β–内酰胺类(青霉素类、头孢菌素类)氨基糖苷类(链霉素、庆大霉素、依替米星)四环素类(四环素、金霉素、土霉素)大环内酯类(红霉素、螺旋霉素、麦迪霉素)概述来源生物合成（发酵）化学合成或半合成4.特点化学纯度较低（同系物，异构体等）活性组分易发生变异稳定性差概述抗生素质量分析——生物学检定法、物理化学法

鉴别：理化方法、微生物法

检查：水分、pH值、异常毒性、热原、细菌内毒素、降压物质等

含量/效价测定：

微生物检定法：

与临床疗效吻合,灵敏度高，结果直观，适用范围广；但操作复杂费时，误差大

理化方法：准确度与专属性较高,且操作简便；但与临床疗效有偏差目前各国药典中主要使用HPLC法抗生素含量测定方法生物学法物理化学法测定方法管碟法、浊度法高效液相色谱法特点灵敏度高，结果直观，与临床疗效吻合，适用范围广；但操作复杂费时，误差较大。生物学法测得的药物含量以效价单位表示，即指每毫升或每毫克中含有某种抗生素的有效成分的多少准确度与专属性较高，且操作简便，但结果只能表示药物的含量，与临床疗效有偏差。物理化学法测得的药物含量用百分率表示β–内酰胺类

青霉素(苄青霉素)(penicillins)氨苄西林阿莫西林头孢氨苄头孢拉定头孢羟氨苄β–内酰胺类β–内酰胺类,简称6-APA青霉素类简称7-ACA头孢菌素类β–内酰胺类一、结构与性质1.酸性（羧基）

pKa2.5-2.8，酸性较强。碱金属盐水溶性好，有机碱盐难溶于水。普鲁卡因青霉素β–内酰胺类2.手性C（旋光性）﹡﹡﹡﹡﹡3.UV青霉素类：苯环取代基头孢菌素类：母核有共轭结构260nm4.β–内酰胺环(四元环张力+酰胺键)β–内酰胺类不稳定性：干燥条件较稳定，溶液不稳定某些氧化剂、金属离子、温度β–内酰胺类二、鉴别(一)色谱法HPLC(tR)TLC(Rf)(二)光谱法IRUVNMRβ–内酰胺类β–内酰胺类β–内酰胺类(四)焰色反应——K+、Na+，青霉素钠三、杂质检查(高分子聚合物、有关物质、异构体等)1.高分子聚合物青霉素中聚合物测定--分子排阻色谱法青霉素类药物容易过敏的原因？β–内酰胺类四、含量测定HPLC法（头孢克洛、头孢克肟、青霉素钠，氨苄西林）固定相：C18为填充剂。检测器：紫外检测器测定方法：外标法---峰面积计算β–内酰胺类举例：阿莫西林克拉维酸钾片色谱条件与系统适用性试验

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钠7.8g，加水900ml溶解，用磷酸或10mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至4.4±0.1，加水稀释至1000ml)-甲醇(95:5)为流动相；流速为0.7ml/min；检测波长为220nm。阿莫西林峰与克拉维酸峰的分离度应大于3.5

测定法取本品10片，置1000ml量瓶中，加水适量，振摇使溶解，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液10

l注入液相色谱仪，记录色谱图；另取阿莫西林对照品与克拉维酸对照品各适量，加水溶解，制成每1ml中含阿莫西林0.5mg和克拉维酸0.25mg的混合溶液，同法测定。按外标法以峰面积分别计算供试品中C16H19N3O5S和C8H9NO5的含量。β–内酰胺类β–内酰胺类回顾与复习进行头孢克洛片的含量测定实验时：采取的色谱条件是哪些？固定相：C18；流动性：磷酸二氢钾溶液：乙腈（92:8）检测器：紫外检测波长：254nm流速：1ml/min氨基糖苷类氨基环醇+氨基糖→苷链霉素氨基糖苷类庆大霉素(gentamycin)绛红糖胺(紫素胺)2-脱氧链霉胺加洛糖胺(N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺)氨基糖苷类一、结构与性质1）碱性（氨基）：临床应用其硫酸盐2）溶解度（氨基、羟基）：水溶性3）旋光性（糖）：多个手性碳4）稳定性（苷）：强酸、碱条件均可水解失效二、鉴别氨基糖苷类坂口反应麦芽酚反应N-甲基葡萄糖胺反应氨基糖苷类1.茚三酮反应——羟基胺类,α-氨基酸△2.糖类反应Molisch试验——五碳糖或六碳糖结构红紫色羟甲基糠醛(含六碳糖结构氨基糖苷类酸性水解产物)氨基糖苷类蓝紫色3.N-甲基葡萄糖胺反应（Elson-Morgan反应）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物对二甲氨基苯甲醛H+樱桃红色缩合物氨基糖苷类4.麦芽酚反应——链霉糖特有反应H+5.坂口反应——链霉胍特有反应链霉素OH-水解8-羟基喹啉NaOBr或α-萘酚

链霉胍橙红色7.色谱法8.光谱法氨基糖苷类三、