六堡茶的化学成分及生物活性研究进展

六堡茶的化学成分及生物活性研究进展

马婉君，马士成，刘春梅，龙志荣，唐保军，林智，吕海鹏六堡茶的化学成分及生物活性研究进展马婉君1,2，马士成3,4，刘春梅4，龙志荣3，唐保军4，林智1*，吕海鹏1*1.中国农业科学院茶叶研究所，农业部茶树生物学与资源利用重点实验室，浙江杭州310008；2.中国农业科学院研究生院，北京100081；3.梧州市茶产业发展服务中心，广西梧州543000；4.广西梧州六堡茶股份有限公司，广西梧州543000六堡茶是我国广西壮族自治区的一类特色黑茶产品，产销历史悠久，具有独特的风味品质特征和保健功效，近年来引起了人们的广泛关注。主要综述了近20年以来六堡茶的化学成分及其生物活性等方面的研究进展，并初步探讨分析了六堡茶未来可能的主要研究方向等。六堡茶；化学成分；生物活性；研究进展六堡茶属于黑茶类，源自于广西壮族自治区梧州市苍梧县六堡镇，是选用苍梧县群体种、广西大中叶种及其分离、选育的品种、品系茶树[(L.)O.Kuntze]的鲜叶为原料，经杀青、初揉、堆闷、复揉、干燥工艺制成毛茶，再经过筛选、拼配、汽蒸（或不汽蒸）、渥堆、汽蒸、压制成型（或不压制成型）、陈化、成品包装等工艺加工制成的具有独特品质特征的黑茶产品[1]，是我国传统历史名茶之一，生产和饮用历史悠久。六堡茶有数百年对外销售的历史，主要通过水运出口马来西亚、新加坡、日本等地。经过近10年来的快速发展，六堡茶产业规模不断壮大。据报道，2018年梧州市六堡茶产量1.52万t，产业直接产值达19亿元，综合产值55亿元[2]；六堡茶区域公用品牌价值达20.17亿元，居中国茶叶区域公用品牌价值第29位[3]。六堡茶一般通过传统工艺初制加工为毛茶后再经过精制陈化形成六堡茶成品茶。六堡茶成品茶的品质特征主要包括：干茶色泽黑褐光润，汤色红浓似琥珀，滋味醇和甘爽，香气陈醇具有槟榔香[4-5]（图1）。特定的茶树品种、加工工艺和微生物菌群等共同奠定了六堡茶重要的化学物质基础，赋予六堡茶独特的风味品质和保健功效。本文重点综述了近20年以来六堡茶的化学成分及生物活性等方面的研究进展，旨在为今后六堡茶的品质化学研究等提供参考。图1六堡茶成品茶图示1六堡茶的化学成分研究进展1.1六堡茶的挥发性成分后发酵过程中因微生物的参与，黑茶香气成分的种类与化学组成等与绿茶和红茶有很大的差异[6]。六堡茶的香气品质特征除“醇陈”之外，还有一些产品具有松烟和槟榔气味[7]，其中“松烟香”是采用传统松柴明火干燥的六堡茶所含有的特殊香气，而“槟榔香”被认为是六堡茶香气品质优异的香气特征。目前，在六堡茶的香气成分研究方面已经有较多的研究报道[8-20]，例如科研工作者采用HS-SPME/GC-MS和SDE/GC-MS等分析技术手段，从六堡茶中鉴定出了大量的挥发性成分，其中主要有醇类、醛类、酯类、甲氧基苯类化合物等；研究表明六堡茶中含量丰富的香气成分有芳樟醇、-雪松醇、-萜品醇、-紫罗兰酮、1,2,3-三甲氧基苯、1,2,3-三甲氧基-5-甲基苯、4-乙基-1,2-二甲氧基苯、己醛、苯甲醛、苯乙醛、(,)-2,4-庚二烯醛、二氢猕猴桃内酯、水杨酸甲酯以及柠檬烯等（表1）。黄林杰等[8]、刘泽森等[9]分别研究了六堡茶中槟榔香的特征物质成分，认为槟榔香物质的来源主要有醇类、碳氢类、杂氧化合物等成分；此外，吴平等[10]对槟榔香六堡茶及槟榔中的香气进行感官嗅觉辨析，认为六堡茶的槟榔香只是类似于槟榔干燥成熟种子或其切片的香气和滋味，并非槟榔香气的复制或再现，与槟榔中香气的化学成分也无必然联系。一些六堡茶产品中还具有特殊的“菌花香”，这主要来源于六堡茶陈化过程中金黄色孢子群落的微生物在生长茂盛时所散发的特殊“菌香”[11]。不同的香气萃取富集方式对六堡茶香气成分的分析结果有重要影响。例如，采用同时蒸馏萃取（SDE），张宁[16]、穆兵等[17]与Lv等[18]都检测到了棕榈酸，该成分是一种具有泥土香味的有机酸[19]，在黑茶后发酵过程中含量会逐步增加，也是普洱茶、茯砖茶中含量较高的挥发性物质[20]；而在采用顶空固相微萃取（HS-SPME）方式富集香气成分时该成分却鲜有报道。此外，不同检测方法鉴定出的六堡茶中主要香气成分也存在较大差异，如采用全二维气相色谱飞行时间质谱（GC×GC-TOFMS）技术能检测到六堡茶中更多的香气化合物种类和数量[17,21-22]。众所周知，一般是那些具有高香气强度值、高香气活度值的香气化合物（称为关键香气化合物）才对呈香起到重要作用。在六堡茶的挥发性成分中，并非所有挥发性物质都对六堡茶的“陈香”“槟榔香”“药香”或“菌花香”等香气品质具有贡献作用。然而，目前的科学研究还尚未揭示决定六堡茶“陈香”等香气品质的关键香气化合物，这在很大程度上阻碍了人们对六堡茶香气品质的深入认知。因此，在后续六堡茶香气成分的研究方面，有必要采用多种分析方法，如气相色谱在线嗅闻法（Gaschromatography-olfactometry，GC-O）、香气活度值法（Odoractivityvalue，OAV）、香气化合物重组与消减实验（Aromarecombination，omissiontest）等[23-25]来揭示六堡茶中的关键呈香成分，这将有助于丰富六堡茶风味品质化学基础知识。1.2六堡茶的非挥发性成分目前，关于六堡茶的非挥发性成分的研究报道主要集中在多酚类成分及其氧化产物、呈色和呈味成分等方面，此外还涉及茶多糖、矿质元素以及他汀类等其他成分。1.2.1多酚类成分及其氧化产物类儿茶素类物质是茶叶中重要的非挥发性成分[26]。目前关于六堡茶中儿茶素单体成分及其含量的研究结果汇总如表2所示[16,18,27]，总体上以EGCG、EGC、ECG和GC等为主。此外，儿茶素的氧化产物，如茶黄素（TF）、茶红素（TR）、茶褐素（TB）等，是黑茶中的重要品质化学成分[28]。茶褐素是从各种多酚类物质中衍生出来的水溶性高分子酚类化合物，是普洱茶中含量最高的水溶性色素[29]，在六堡茶中的含量约为10%[30]。研究表明，六堡茶茶褐素组分富含羧基、甲基、羟基、氨基，总体呈弱酸性，其酸性贡献主要来源于酚羟基，在茶褐素中占比约75.6%，与普洱茶茶褐素中酚羟基占比88%相比略有差异；此外，六堡茶茶褐素中蛋白质含量为15.45%，茶多糖含量为25.16%，占比较高，是六堡茶中重要的生物活性成分之一[31]。表1近年来六堡茶香气研究报道结果概况表2六堡茶中主要儿茶素单体成分及其含量水平注：ND表示未检出Note:NDindicatesnotdetected近年来，科研工作者采用先进的分析检测技术对六堡茶中的多酚类成分进行了深入研究，已经取得了一些重要的研究进展。例如，刘仲华[32]采用UPLC-Q/TOF-MS分析检测技术，从六堡茶中鉴定出了54种非挥发性成分；林小珊等[33]采用HPLC-Q/Exactive分析检测技术，从六堡茶中鉴定出了26种以多酚类物质为主的化学成分。将上述研究报道中分析鉴定出的这些化学成分进行比较（表3），可以发现被共同检测到的化学成分有20种，主要包括儿茶素及其氧化产物类、没食子酸与奎尼酸类衍生物、槲皮素、杨梅素、山柰酚的糖苷类化合物等，而有6种化学物质（Protocatechuicacid、ProcyanidindimerB3、Esculetin、4-vinylphenol、Benzoicacid、6-gingerol）是首次在六堡茶中被检出的。此外，在六堡茶中还鉴定出了1种新的多酚类物质[34]，命名为Teasperol(1)，推测其为EGCG在微生物代谢下生成的次级代谢产物。在酚酸类成分研究方面，陈磊等[35]采用HPLC分析技术，发现苍梧六堡茶中的酚酸含量比云南普洱茶高，且苍梧竹篓装六堡茶有两个明显而独特的峰值，说明竹篓装六堡茶中这两种特征性酚酸含量比其他茶类要高。近年来六堡茶中新发现的非挥发性物质成分汇总如图2所示。1.2.2呈色和呈味成分茶叶的色泽由脂溶性色素和水溶性色素共同构成。在六堡茶呈色成分研究方面，宋鲁彬等[36]采用高效薄层色谱分析了不同类型黑茶产品中的脂溶性色素，发现不同样品间脂溶性色素含量差异很大，其中六堡茶脂溶性色素总含量最高，约为茯砖茶的2倍，且六堡茶中脱镁叶绿素b的含量也最高（占15.11%）。此外，在六堡茶水溶性色素中，一般认为茶黄素（TF）、茶红素（TR）、茶褐素（TB）是茶汤色泽的主体物质（表4）。目前，茶叶色泽的评价仍以感官审评为主，但近年来越来越多的研究开始借助计算机视觉[37-38]、色差计[39-40]等仪器来辅助量化色泽分析，这些研究将为后续六堡茶的色泽表征分析提供更加客观的评价参考。茶叶中的呈味物质大致可以分为由多酚类、黄酮类为主体的涩味，由咖啡碱、花青素、儿茶素为主体的苦味，由游离氨基酸及部分络合物为主体的鲜爽味等[41]。六堡茶中主要水溶性成分及其含量的研究结果汇总如表4所示，推测这些成分对六堡茶的滋味会产生重要影响。此外，王晓[42]通过GC-MS结合NMR在六堡茶提取物中分离鉴定出了棕榈酸、-菠甾醇、没食子酸、没食子酸甲酯等有机酸及甾醇类成分，部分成分可能对六堡茶滋味品质也有一定的贡献作用。近年来，人们主要采用代谢组学分析技术[43-44]及近红外分析技术[45]等对茶叶中主要滋味成分进行分析鉴定，通过Dot值（浓度与阈值的比值）分析茶汤中主要浸出物质对滋味的贡献度[46]。然而，目前这些新的分析技术在六堡茶滋味品质分析中的应用鲜见报道。表3六堡茶中鉴定出的非挥发性化学物质续表3图2六堡茶中新发现的非挥发性物质成分1.2.3其他非挥发性成分在黑茶中发现的他汀类化合物主要有洛伐他汀（Lovastatin）和辛伐他汀（Simvastatin）两种[47]，而六堡茶中的他汀类物质据报道主要是辛伐他汀，含量约为41.63 mg·kg-1[48]。辛伐他汀是一种降胆固醇剂，具有抗炎和抗过敏作用[49]，且在调节一些药物导致的血脂代谢异常方面有显著作用[50]。茶多糖是一类结构复杂的糖蛋白复合物。六堡茶多糖主要由中性糖（50.71%）、醛酸（21.97%）、蛋白质（11.84%）、多酚（8.46%）等成分组成，能够调节高脂血症大鼠的血脂水平[51]。茶多糖在其他黑茶中还具有调节代谢综合征[52]、调节肠道微生物[53]等作用。咖啡碱能够抑制食欲、减少脂肪累积。据报道，咖啡碱在六堡茶成品茶中的含量水平一般为28.30~29.30 mg·kg-1[27]，这可能是六堡茶具有辅助降血脂的活性因子来源[54]。矿质元素与人体健康关系密切[55]。张雪红等[56]研究发现六堡茶中的Ca、Mg、Fe、Mn、Zn、Cu的含量分别为0.330、0.387、0.527、0.975、0.035、0.033 mg·g-1；此外，对六堡茶样品进行辐照和充氧处理，在60Co-γ射线辐照剂量为8 kGy，充氧量为40%条件下，有利于六堡茶中矿质元素维持在较高含量水平[57]。茶叶中含有丰富的维生素C、维生素B1、维生素B2等成分[58-59]，然而，目前鲜有关于六堡茶中的维生素类物质的报道。1.3不同加工方式对六堡茶化学成分的影响加工方式的不同会导致成品六堡茶化学成分含量的差异，进而影响到感官品质。例如，不同的发酵方式[60]、干燥方式[14]和陈化时间[15]等都会对六堡茶的化学成分含量和感官品质产生重要影响（表5）。在发酵方式上，采用双蒸双压处理的六堡茶中水浸出物、茶多酚等成分的含量与冷水发酵处理有较大差异，说明其化学物质转化程度不同于冷水发酵处理；张芬等[61]和刘小玲等[62]研究了六堡茶渥堆发酵前后的化学成分及感官品质变化情况，发现六堡茶经过渥堆后，挥发性成分中醛类、烯类相对含量减少，而酯类、杂氧化合物相对含量增加；此外，非挥发性成分中茶红素减少，茶褐素大量增加，总酚、总黄酮含量降低，可溶性糖含量上升；这些成分的改变可能是六堡茶产品香气陈醇、汤色红浓的主要原因。在干燥方式上，传统的松柴明火干燥相比于热风干燥，游离氨基酸、咖啡碱、茶褐素的含量相对较高，产品汤色明亮且带有槟榔香[14]。在陈化时间方面，六堡茶随着陈化时间的延长，水浸出物、茶多酚、游离氨基酸、茶红素的含量一般呈下降趋势，而咖啡碱和茶褐素的含量呈上升趋势；此外，香气成分中-法尼烯、水杨酸甲酯和乙酸苯甲酯含量上升，而-萜品醇、1,2,3-三甲氧基苯和茴香脑等含量下降；表现在感官品质上，汤色由黄红变为深红，香气由纯正变为陈香浓郁，滋味由浓厚变为陈醇，叶底由黄褐变为黑褐[63-65]。目前，傅里叶变换红外光谱[66]、电子鼻[67]等分析技术已经初步应用于六堡茶陈化年份的判别分析等研究方面。1.4六堡茶品质成分形成及相关微生物后发酵过程中，微生物分泌胞外酶等，以茶叶为底物，通过代谢途径改变茶叶生化成分，形成黑茶特有品质。微生物对黑茶风味品质成分和生物活性成分的形成具有极其重要的作用。对六堡茶渥堆前后的多酚氧化酶（PPO）进行提取分析，发现渥堆前毛茶PPO分子量在59 kDa左右，而渥堆结束后分别检测到了59 kDa和70 kDa的条带[68]，表明六堡茶渥堆过程中，在微生物作用下产生了新的PPO及其同工酶；此外，六堡茶渥堆过程中微生物种群数量发生了明显变化[69]，渥堆中期细菌、酵母和霉菌的数量达到最高，分别为4.2×108、2.2×108cfu·g-1和1.5×107cfu·g-1，之后随着渥堆的结束微生物数量也随之下降，数量约为105cfu·g-1。有研究对渥堆过程中的优势酵母菌进行分离，得到1株对六堡茶成分转化及风味形成起重要作用的优势酵母菌，经鉴定为[70]。对半成品六堡茶进行人工接菌发酵试验，研究表明采用青霉＋冠突曲霉＋黑曲霉＋毛霉＋酵母的优势菌组合能够缩短发酵时间，且能提高品质成分及感官审评得分[71]。表4六堡茶中主要水溶性成分含量表5不同加工方式对六堡茶化学成分及感官品质的影响六堡茶中真菌、细菌在属水平上的分布组成研究结果汇总如图3所示。LBF1—LBF4为4个六堡茶样品中的真菌分布[72]，曲霉属（）和散囊菌属（）在真菌中占绝对优势；LBB1—LBB2是2个六堡茶样品中的细菌分布[73]，刺糖多孢菌属（）在细菌中占据绝对优势。此外，采用Miseq测序分析在4个六堡茶样品中检测到其他黑茶中未检出的真菌群落分别为、和[74]。黑茶中的“金花菌”最早在安化茯砖黑茶中被分离鉴定出，由于冠突散囊菌大量繁殖后其闭囊壳呈金黄色，因此也被称作“金花菌”[75]。六堡茶中也存在产生“金花”的微生物，能够分泌淀粉酶和氧化酶，对六堡茶的香气、滋味等物质转化起到一定作用[76]。毛彦等[77]、陈然等[78]和欧惠算等[79]分别对六堡茶中的金花菌进行了分离鉴定，所报道的研究方法与结果汇总如表6所示。目前不同研究从六堡茶中鉴定出的“金花菌”并不一致，这可能是由于试验茶样品来自不同茶厂且加工时渥堆时间、温度以及鉴定方法等不同，导致成品六堡茶中的“金花菌”菌种不同。总体上，目前关于六堡茶中微生物的研究大多仍处于微生物种类、数量鉴定阶段，对于微生物次级代谢产物以及微生物与茶叶品质之间相互作用的影响尚待进一步研究。2六堡茶的生物活性研究进展近年来，六堡茶的生物活性引起了人们的关注。目前，六堡茶生物活性的相关研究主要集中在抗氧化、调节糖脂代谢、保护肝脏等方面。2.1抗氧化活性在抗氧化活性研究方面，Wu等[80]比较了绿茶、红茶、六堡生茶和熟茶的抗氧化活性，发现经体外模拟胃肠消化后，红茶和六堡熟茶总酚含量有所增加，对ABTS自由基的清除能力增强，且六堡熟茶的清除能力显著增强，表现出更强的抗氧化能力；Lv等[18]分别采用DPPH、ABTS和FRAP法分析了普洱茶、茯砖茶和六堡茶3种黑茶的化学抗氧化活性，发现不同种类黑茶具有不同的抗氧化活性，但在FRAP铁离子还原试验中，六堡茶的抗氧化活性最强；在细胞水平上采用HepG2细胞进行细胞抗氧化试验研究发现，六堡茶的抗氧化活性较强。图3六堡茶中真菌、细菌属水平上的分布组成表6六堡茶中金花菌的分离鉴定研究报道六堡茶发挥抗氧化活性的功能成分主要是多酚类成分（黄酮类成分）等。例如，宋家乐等[81]通过小鼠试验，发现六堡茶总黄酮提取物能显著提高小鼠血清和脏器组织内源抗氧化系统的酶活性，提高血清的总抗氧化能力（T-AOC）；此外，Qian等[82]通过HCl/乙醇诱导的小鼠胃损伤试验来测定六堡茶生茶中多酚类的抗氧化活性，发现六堡茶生茶中的多酚类提取物能够通过调节体内炎症相关的细胞因子，减轻胃损伤，调节机体平衡，在体内发挥良好的抗氧化作用。2.2调节糖脂代谢活性在六堡茶调节糖代谢方面，滕翠琴等[83]通过六堡茶水提物对胰岛素抵抗3T3-L1细胞模型干预24 h后，发现六堡茶能够促进模型细胞的葡萄糖分解代谢，减少细胞内游离脂肪酸的含量，对于缓解胰岛素抵抗有显著作用；此外。龚受基[84]发现六堡茶水提物可以促进胰岛素抵抗状态HepG2细胞的葡萄糖摄取，减少糖尿病大鼠糖耐量，降低空腹血糖和胰岛素水平；进一步研究发现六堡茶中改善胰岛素抵抗的化学成分可能与茶褐素的增加有关。在六堡茶降脂研究方面，黄丽等[85]采用六堡茶提取物干预治疗高脂模型小鼠，发现六堡茶提取物降血脂功能与阳性对照组血脂康的效果相当；六堡茶可通过调节肠道菌群来间接影响糖脂代谢，赵园园等[86]研究发现六堡茶提取物能够促进高脂小鼠肠道菌群中厌氧菌的生长，并抑制需氧菌的繁殖，调节高脂饮食引起的小鼠肠道菌群紊乱；此外，叶颖等[87]研究发现六堡茶可以通过调节肠道菌群来显著增加高脂大鼠肠道丙酸和丁酸含量，具有良好的修复肠道作用。普洱茶中的茶褐素作为关键活性成分可以通过影响肠道与肝脏之间相互作用机制，调节肠道菌群结构，促进胆汁酸合成来改善高脂血症，发挥降脂减肥作用[88]。而六堡茶中也富含茶褐素成分，因此有理由推断该成分在六堡茶降脂活性中也可能发挥了重要作用。2.3保护肝脏活性在保护肝脏研究方面，吴文亮等[89]建立高脂血症小鼠模型，发现陈年六堡茶水提物能够有效控制小鼠体重、肝重、肝系数的增加，降低肝功能相关指标酶活性，显著改善肝脏中脂肪堆积；刘家奇等[90]通过检测经普洱茶及六堡茶干预治疗后的非酒精性脂肪肝大鼠体内胰岛素样生长因子IGF-I基因的表达，发现该基因表达量有明显升高，能够缓解肝脏受损程度，且六堡茶干预组作用效果更好。六堡茶总黄酮成分和茶多糖在保护肝脏方面可能发挥了重要作用。钱波等[91]通过CCl4诱导的化学性肝损伤小鼠模型来观察六堡茶总黄酮对肝脏的保护作用，发现六堡茶总黄酮可能主要通过增强小鼠肝脏中内源抗氧化系统的酶活力和调控相关离子通道ATP酶的活性来缓解氧化应激性肝损伤；此外，Mao等[51]发现六堡茶多糖能够干预高脂模型小鼠肝脏中胆固醇过载的现象，并且减少胆汁酸的吸收，从而起到调脂护肝作用。2.4其他生物活性除了上述报道的生物活性外，六堡茶在促消化、增强免疫功能、抗凝血、保护人脐静脉血管内皮细胞等方面的作用也有相关的文献报道。例如，吴香兰[92]建立肠道紊乱小鼠模型后，分别用六堡茶、青砖茶、千两茶和茯砖茶进行灌胃治疗，发现4种黑茶均能通过促进胃排空、小肠蠕动及抑制有害细菌来促进小鼠消化；刘冠萍等[93]和邓聿胤等[94]研究发现高剂量（15 g·kg-1）六堡茶能显著提高小鼠非特异性免疫功能的相关指标，具有增强免疫的潜在作用；黄丽等[85]研究了六堡茶对小鼠血液流变学的作用发现，六堡茶提取物对小鼠体内各项抗凝血指标均有延长作用，且各项作用均达到显著水平（<0.05），说明六堡茶具有抗凝血、预防血栓的作用；此外，应乐等[95]建立人脐静脉血管内皮细胞损伤模型（HUVEC），通过30%、50%、70%系列浓度乙醇提取的六堡茶多糖LTPS-30、LTPS-50、LTPS-70组分对HUVEC均有保护作用，其中LTPS-70的保护作用最显著，但相关作用机理仍待进一步研究。3讨论目前，与普洱茶和茯砖茶等其他主要黑茶产品相比，六堡茶在品质化学成分和生物活性成分等方面的研究进展总体上严重滞后，亟待加强。针对六堡茶品质化学成分和生物活性研究，未来的主要研究方向至少应该包括以下几个方面。3.1六堡茶后发酵过程中关键品质化学成分的形成变化规律研究采用宏基因组学、代谢组学、蛋白组学等方法，系统分析六堡茶后发酵过程中的优势菌种微生物及后发酵过程中微生物分泌的重要胞外酶；研究六堡茶后发酵过程中茶多酚、儿茶素、茶色素、黄酮类、氨基酸、可溶性糖等重要化学成分的变化规律，重点分析微生物次生代谢产物、多酚类成分的分子修饰产物及特异多酚类成分的形成演变，分析六堡茶后发酵过程中新生成的一些重要品质化学成分和功能成分等。3.2六堡茶的品质化学成分研究采用UPLC-Q-TOF-MS、GC×GC-TOF-MS等先进分析技术，结合感官组学方法，揭示那些决定六堡茶色、香、味品质的关键化学成分，确定六堡茶化学特征指标，建立风味品质成分的化学指纹图谱；查明这些重要品质化学成分在后发酵过程中的变化规律，以及它们在不同品种、不同等级和不同贮存年份产品中的含量水平差异等，建立化学指标的质量标准等。3.3六堡茶的生物活性和保健功效研究采用现代植物化学研究分析方法，系统分离鉴定六堡茶的关键生物活性成分，研究不同陈化时间或存贮年份六堡茶的体外抗氧化活性差异及细胞内生物活性差异；开展六堡茶中营养健康功能因子的高通量筛选、分离鉴定和生物活性评价研究等。[1]全国茶叶标准化技术委员会.黑茶第4部分:六堡茶:GB/T32719.4—2016[S].北京:中国标准出版社,2016.NationalTechnicalCommittee339onTeaofStandardizationAdministrationofChina.DarkteaPart4:LiuPaoTea:GB/T32719.4—2016[S].Beijing:ChinaStandardPress,2016.[2]武卫国,杨鼎俊,龙志荣,等.“一带一路”倡议下六堡茶产业发展现状与对策[J].中国茶叶,2019,41(5):59-61.WuWG,YangDJ,LongZR,etal.ThepresentsituationandcountermeasuresofthedevelopmentofLiupaoteaindustryunder"theBeltandRoad"initiative[J].ChinaTea,2019,41(5):59-61.[3]胡晓云,魏春丽,袁馨遥.2018中国茶叶区域公用品牌价值评估研究报告[J].中国茶叶,2018,40(5):31-50.HuXY,WeiCL,YuanXY.ThevalueassessmentstudyonregionalpublicbrandsofChineseteain2018[J].ChinaTea,2018,40(5):31-50.[4]马士成,杨麦.广西地理标志产品-六堡茶[M].北京:中国工商出版社,2019:17-19.MaSC,YangM.TheproductofGuangxigeographicalindication:Liupaotea[M].Beijing:ChinaIndustrialandCommercialPress,2019:17-19.[5]焦杨,王登良.六堡茶加工工艺及发展状况[J].广东茶业,2010(3):12-15.JiaoY,WangDL.ProcessingtechnologyanddevelopmentofLiupaotea[J].GuangdongTeaIndustry,2010(3):12-15.[6]FengZH,LiYF,LiM,etal.Teaaromaformationfromsixmodelmanufacturingprocesses[J].FoodChemistry,2019,285,347-354.[7]何华锋,朱宏凯,董春旺,等.黑茶香气化学研究进展[J].茶叶科学,2015,35(2):121-129.HeHF,ZhuHK,DongCW,etal.ResearchprogressinflavorchemistryofChinesedarktea[J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