高级生化答案

细胞凋亡称为细胞凋亡。核酶：核酶是具有催化活性的RNA分子，通过催化靶位点核酸链中磷酸二酯键的断裂特异性地剪切底物分子，从而阻断基因的表达。DNA半保存复制：每个子代分子的一条链来自亲代DNA,另一条则是合成的，这种复制方式称为DNA的半保存复制〔semiconservative replication)。化性质的转变和生物学活性的丧失，这种现象称为蛋白质的变性作用。性等方面都存在差异。蛋白质的等电点：pH值时，蛋白质解离成正、负离子的趋势和程度相等，即为兼性离子或两性离子，净电荷为零，此时溶液的pH值称为该蛋白质的等电点。高通量测序技术HTS：是对传统Sanger测序革命性的转变，以此对几十万到几百万条核酸成为可能，所以又被称为深度测序。异性分析的方法。Denovo测序：也称为从头测序，不需要任何现有的序列资料就可以对某个物种进展测序，利用生物信息学分析手段对序列进展拼接、组装，从而获得该物种的基因组图谱。酶活性转变，这种调整方式称为酶促化学修饰调整。原始的调整方式。氨基酸的等电点：pHpH,称为该氨基酸的等电点。别构效应：性转变的现象.它是细胞内最简洁的调整方式。蛋白质的复性：指在肯定条件下，变性的蛋白质分子恢复其原有的自然构象并恢复生物活性的现象。它是细胞中一类能够识别并结合到不完全折叠或装配的蛋白质上以帮助这些多肽正确折叠、转运或防止它们聚拢的蛋白质，其本身不参与终产物的形成。SangerDNA聚合酶来延长结合在待定序列模板上于双脱氧核苷三磷酸缺乏所需要的3-OH集团，使延长的寡聚核苷酸选择性的在G、A、TC处终止。同源蛋白：是指在不同有机体中实现同一功能的蛋白质〔修饰方式〕，构造与功能，以及各个蛋白质之间相互作用。性.究生命现象，通过对生物大分子信息的猎取、加工、分类、检索、分析与比较，最终获得其生物学意义的一门科学和争论方法。子氧生成水，这一电子传递体系成为呼吸链。氧化磷酸化：NADHFADH2将电子传递给O2的过程与ADPATP的生成。糖异生：由非糖物质〔如丙酮酸、乳酸、甘油等〕作为前体合成葡萄糖或糖原的过程。简答题举例说明蛋白质的构造及其功能的关系。争论蛋白质一级构造与功能的关系主要是：争论多肽链中不同部位的残基与生物功能的关系。例1镰刀型贫血病患者血红细胞合成了一种不正常的血红蛋白〔Hb-S〕，它与正常的血红蛋白〔Hb-A〕的差异：仅仅在于βN6〔Hb-A〕6Hb-输氧力量下降，易发生溶血这说明白蛋白质分子构造与功能关系的高度统一性。例2一级构造的局部断裂与蛋白质的激活 体内的某些蛋白质分子初合成时常带有抑制肽，呈无活性状态称为蛋白质原。蛋白质原的局部肽链以特定的方式断裂后，才变为活性分子。例：胰岛素，在刚合成时，是一个比成熟的胰岛素分子大一倍多的单链多肽，称为前胰岛素原。前胰岛素原的N-末端有一段肽链，称为信号肽.信号肽被切去，剩下的是胰岛素原。胰岛素原比胰岛素分子多一段C肽，只有当C肽被切除后才成为有51个残基，分A、B两条链的胰岛素分子单体.例3同源蛋白同源蛋白：是指在不同有机体中实现同一功能的蛋白质。同源蛋白中的一酸称可变残基。不同种属的可变残基有很大变化。可用于推断生物体间亲缘关系的远近。亲缘关系相近者，氨基酸差异少，反之则多〔进化树〕。如细胞色素C.蛋白质的构象与功能的关系别构效应：又称变构效应，是指寡聚蛋白与配基结合，转变蛋白质构象，导致蛋白质生物活性转变的现象.它是细胞内最简洁的调整方式.例：血红蛋白的别构效应象转变与氧的结合力量增加。简述测定蛋白质的一级构造的测定根本操作步骤。①多肽链的拆分：由多条多肽链组成的蛋白质分子，必需先进展拆分。可用8mol/L尿素或6mol/L②测定蛋白质分子中多肽链的数目：通过测定末端氨基酸残基的摩尔数与蛋白质摩尔数之间的关系，即可确定多肽链的数目。③二硫键的断裂：几条多肽链通过二硫键交联在一起。用过量的-巯基乙醇处理，使二硫法或巯基复原法拆分多肽链间的二硫键。④测定每条多肽链的氨基酸组成，并计算出氨基酸成分的分子比；N-末端和C-末端★末端氨基酸的测定：多肽链末端氨基酸分为两类，N-端氨基酸和C-端氨基酸。在肽链氨基酸挨次分析中，最重要的是N-端氨基酸分析法。⑥多肽链断裂成多个肽段肽段或肽碎片，并将其分别开来。⑦测定每个肽段的氨基酸挨次。⑧确定肽段在多肽链中的次序：利用两套或多套肽段的氨基酸挨次彼此间的穿插重叠，拼凑出整条多肽链的氨基酸挨次。⑨确定原多肽链重二硫键的位置：一般承受胃蛋白酶处理没有断开二硫键的多肽链，再利同其它方法分析的肽段进展比较，确定二硫键的位置。3RAAGly苷酸：无侧链；双面角可自由转动，无空间位阻；任意扭曲，柔性大；常消灭在需要扭曲或转折的肽链片段中。Ala：小，侧链只有一个甲基；无化学活性，在蛋白质分子中可处于内部或外表。Leu，Ile，Val带有分支的支链ＡＡ，产生的位阻也更大；易于在蛋白质分子中固定于肯定的位置，并有利于链的折叠。Ｐro一种亚氨酸，具有固定的构型；α氨基与侧链Ｃ原子成环，很强的立体化学效应，使端或弯曲部位；常暴露于蛋白质分子外表。AAPhe疏水作用很强；而Try，Trp带极性侧链，疏水性较差；Ｔry酚基易解离，易形成较强的氢键，故常消灭在分子内；AAAASer，Thr侧链带有羟基，可形成氢键，也可通过水分子间形成氢键，化学性质活泼，具有重要的功能；Cys有巯基〔－ＳＨ〕，易氧化形成带的二硫键的胱氨酸；与金属离子如Fe，Zn，Cu等配内部，形成特定的模体(motif)构造。Met疏水性大，柔性大，常埋藏在蛋白质分子内部。AAAsp，Glu两个-coo-带负电荷，在蛋白质内部形成盐键；常位于蛋白质分子外表与钙结合；相互作用的位点。Asn,Gln侧链虽有极性，但不易解离，不带电荷，易形成氢键。AALys,Arg：一般带正电荷，存在于蛋白质分子外表；可与酸性氨基酸残基，肽链Ｃ端，核酸中的磷酸基团形成盐键；与蛋白质活性有关；Lys长侧链可自由伸展在外，与蛋白质结合功能有关；Arg可沿着侧链卷曲埋藏在蛋白质分子内，也可与蛋白质分子内的氧形成氢键，从而稳定蛋白质；与酶的催化功能有关；His含咪唑基，参与酶促反响中的质子传递反响，为多种酶的活性中心；易于金属离子形成配位化合物，参与组成各种金属蛋白。AA4、测定蛋白质的一级构造，其样品应到达什么样的要求？A.样品必需纯〔>97%以上〕；知道蛋白质的分子量；知道蛋白质由几个亚基组成；测定蛋白质的氨基酸组成；并依据分子量计算每种氨基酸的个数。E.测定水解液中的氨量，计算酰胺的含量。生物体的构造层次生物分子是生物体特有的有机化合物生物分子，其中近半数是小分子，分子量一般在500以下。其余都是生物小分子的聚合物，分子量很大，一般在一万以上，有的高达1012，因而称为生物大分子。生物分子具有简单有序的构造生物分子都有自己特有的构造。生物大分子的分子量大，构件种类多，数量大，排列挨次千变万化，因而其构造格外简单。估量仅蛋白就有1010-1012。生物分子又是有序的，〔组织性存在于生命体系中。生物构造具有特别的层次生物用少数几种生物元素〔C、H、O、N、S、P)构成小分子构件，如氨基酸、核苷酸、成细胞器、细胞、组织、器官、系统和生物体。蛋白质的自我剪接并用正常肽键将两侧蛋白质多肽链连接起来。3个明显的特点:蛋白质剪切完全由蛋白质内含子的氨基酸介导。蛋白质剪切是一个分子内过程。蛋白质剪切不需要辅酶或代谢能，其过程主要涉及键的重排。4步:在剪切体的上游，intein的第一个残基半胱氨酸或丝氨酸(Ser1)的侧链发生N-S或N-O通过剪切位点C末端的半胱氨酸或丝氨酸攻击线性酯键中间体形成分枝酯键中间体；InteinC末端剪切处的天冬酰胺环化形成琥珀酰亚胺环，同时分枝酯键中间体断裂，C末端琥珀酰亚胺环的inteinextein。倒数其次个氨基酸组氨酸对于邻近天冬酰胺的环化有关心作用；琥珀酰亚胺环水解，extein之间的酯键发生O-N或S-N酰基重排，产生稳定自然的肽键。7、写出两种以上测定蛋白分子量的方法及原理。〔1〕依据化学成分测定最小相对分子质量①此法首先利用化学分析方法测定蛋白质分子中某一特别成分的百分含量。②然后，假定蛋白质分子中该成分只有一个，据其百分含量可计算出最低相对分子质量。③最小相对分子质量＝〔成分的相对分子、原子质量〕/成分的百分含量。④假设蛋白质分子中所含成分不是一个单位量的倍数。〔3〕超离心法60000～80000r/minSSSvedberg〕方程计算蛋白质分子的相对分子质量。〔3〕凝胶过滤洗脱体积大。测得几种标准蛋白质的洗脱体积〔Ve〕；以相对分子质量对数〔logM〕对Ve作图，得标准曲线；logM=K1-K2Ve，再测出未知样品洗脱体积〔Ve〕；从标准曲线上可查出样品蛋白质的相对分子质量。〔3〕SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法SDS和巯基乙醇〔翻开二硫键〕处理，蛋白质变性〔肽链伸展〕SDS结合，形成SDS-蛋白质复合物，不同蛋白质分子的均带负电〔SDS〕；且荷质比一样〔蛋白质分子大，结合SDS多；分子小，结合SDS〕。②不同蛋白质分子具有相像的构象。③用几种标准蛋白质相对分子质量的对数值对它们的迁移率作图；④测出待测样品的迁移率；⑤从标准曲线上查出样品的相对分子质量。简述目前觉察的热休克蛋白的功能有哪些？热休克蛋白是热休克反响中转录合成的一组特别糖蛋白。其中HSP70是最保守和最重要的一种蛋白质，HSP70具有多种生物学功能，包括分子伴侣功能，参与肿瘤免疫，抗细胞凋HSP70HSP70HSP70在肿瘤免疫方面的作用；HSP70HSP70①参与蛋白质的折叠；ATP③维持细胞蛋白自稳；④提高细胞对应激原的耐受性。HSP70在肿瘤免疫方面的作用①HSP②HSP70-肿瘤抗原肽复合物，一方面可以激活非特异性肿瘤免疫，这类抗肿瘤免疫与T细胞的活化有关；另一方面可以激活特异性肿瘤免疫，在抗肿瘤中发挥主要作用，③HSP70可以加工并提呈肿瘤抗原，激发抗肿瘤细胞的特异性反响。④还可以作为抗原提呈分子直接将肿瘤抗原提呈给T细胞，而激发T细胞介导的特异性抗肿瘤细胞免疫。HSP70细胞凋亡(apoptosis)，又称程序性细胞死亡(Progmmedcelldeath,PCD)，是指细胞在空、核裂开和DNA简述朊病毒与疯牛病的关系传染性海绵状脑病或称朊病毒病(priondiseases)是一种致命的脑病，该病严峻威逼着流行国家家畜的安康。PrionProtein,PrP)。朊病毒假说认为，当正常朊蛋白PrPC(对蛋白酶敏感)构象特别变化时可形成致病朊病毒PrPScFraser等于1992年首次证明疯牛病具有传染性,并证明其病原体也是朊病毒。目前，关于朊病毒的致病机理，普遍认为正常朊蛋白PrPC通过构象转变转变为PrPSc是致病的主要缘由,由于缺乏PrPC性，而假设将PrPScPrPSc导致了病原学一个全理论概念的产生：并非全部病原体都必需具有核酸(DNA或RNA)成分才能对宿主产生致病作用和生殖后代。简述生物体内蛋白质降解的主要途径。路、以及胱天蛋白酶水解途径等。〔1〕溶酶体是真核细胞内重要的细胞器，内含60多种酸性水解酶，分解蛋白质、核酸、多糖和脂类。溶酶体降解蛋白质是一条非特异性蛋白降解系统，真核细胞内90%以上的长寿蛋白和一局部短寿蛋白都是在溶酶体中降解的应的酶降解，然后通过溶酶体膜的载体蛋白运送到胞液，补充胞液的代谢库。泛素—