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文档简介

血凝自我鉴定(共6篇)篇:禽流感血凝和血凝抑制试验

禽流感血凝-血凝抑制试验操作方法及注意事项

禽流感血凝和血凝抑制试验可用于血清中抗体水平的监测,也可用于判断未使用疫苗群体的感染状态等。该试验是目前世界卫生组织和国际动物健康组织进行全球流感监测所普遍采用的方法,而且因其具有经济、快速、可靠、操作简便、能够处理大量的样品,并能在短时间内报告禽流感抗体水平等优点,已经成为当前基层兽医实验室禽流感疫病监测和免疫抗体检测中最为常用的方法。但因该试验受人为操作影响较大,经常因操作不规范、不严谨等造成结果偏差大、重复性差等问题,现根据几年来的工作经验对该试验过程中应注意的事项做一探讨。一、血凝试验操作程序

1、取96孔90°V形酶标板,用微量移液器在第一至第五排的1~12孔每孔加25μLPBS液。2、吸取25μL标准禽流感抗原加入到第一排第1孔中充分混匀。3、从第1孔吸取25μL混匀后的抗原液加到第2孔中,混匀后吸取25μL加入到第3孔中,依次进行倍比稀释至第二排最后一孔即第24孔,最后弃去25μL。第三排孔至第四排孔同上操作。4、依次向第一至第五排孔的每孔中加入25μL1%的鸡红细胞悬液。5、将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒,室温(20-25℃)静置30min观察结果(如果环境温度太高,可置4℃环境下)。6、结果判定:将板作45°倾斜,观察红细胞是否呈泪滴状流淌。以完全凝集(不流淌)的抗原或病毒最高稀释倍数为1个血凝单位(HAU)

二、血凝抑制试验操作程序

1、根据血凝试验结果配制4HAU抗原。(即1HAU抗原除以4)

2、取96孔V形酶标板,用移液器在第1~12孔各加入25μLPBS。3、在第1孔加入25μL被检血清,充分混匀后移出25μL加至第2孔,依次类推,倍比稀释至第12孔,弃去25μL。4、按以上步骤加入阳性血清和阴性血清(各做两份),作对照孔。5、在第1~12孔各加入25μL4单位抗原,置于微量振荡器上轻轻混匀,室温20-25℃下静置30min。6、每孔加入25μL1%的鸡红细胞悬液。置于微量振荡器上轻轻混匀,室温(20-25℃)静置40min后观察结果,若环境温度过高,可于4℃条件下进行,红细胞将呈明显的纽扣状沉到孔底。7、结果判定:只有阴性对照孔血清滴度不大于2log2,阳性对照孔误差不超过1个滴度,试验结果才有效。将酶标板作45°倾斜,以完全抑制红细胞凝集的最大稀释倍数判为该血清的血凝抑制滴度。当被检血清效价大于等于4log2,判为禽流感抗体阳性。试验过程中的注意事项1样品的保存及试验前处理

1.1采集的血液样品应及时分离血清,最好分装至离心管中,标记清楚,离心后吸出血清,对应编号冷藏送检,并禁止运输过程中剧烈震动。1.3在检测前血清样品应充分混匀,混匀时采用上下缓慢颠倒几次的方法即可,切忌剧烈振荡而引起产生气泡及血清中蛋白变性。1.4对出现胶冻状的血清样品,可采用反复搅动几下再离心的方法有助于缓解该状态。胶状物是含纤维蛋白和纤维蛋白原的血清,可能是由于放置时间不够造成的血清未完全析出状态。不建议直接吸取其中少量的清亮血清。1.5水禽等样品为排除非特异性反应,还应相应进行灭能反应。具体操作方法:56℃水浴锅30min或加等量10%鸡红细胞,轻摇后静置30分钟,离心,收集上清液即可。2器材的选择

2.1酶标板的选择:

建议使用96孔90°V型板进行试验,通过反复试验证明:90°V型板相对于110°板及130°板来讲,具有红细胞沉降速度快,产生的凝集图像清晰、结果容易判定等优点。2.2移液枪的选择及使用:

①单道、多道可调微量移液枪应选择合适的量程,以便精确度的提高。②使用时应采用一档吸液二档排液的方法。吸取液体时,枪头要深入液下缓慢平稳吸液。加缓冲液时应加在板孔底部。倍比稀释血清时,应每孔至少反复吹吸6次,以便混合均匀,还应注意尽量避免产生泡沫引起混合不均。加抗原及红细胞时应在板内液面上方加样,以免交叉污染,影响试验结果。③加样、倍比稀释时应高度集中注意力,以免漏加、重复加样等。3试剂的保存及配置3.1禽流感血凝抑制试验所用的抗原、阳性血清应严格按照说明书的要求进行保存和配置,试验前应提前将其恢复至室内温。抗原的保存温度为-20℃,反复冻融会降低抗原的滴度,应避免反复冻融。3.2PH7.2、0.01mol/L的PBS液的制备①应尽量现用现配②每次使用前应测PH值,以免时间过长而导致PH值发生改变。③由于PH试纸跨度范围偏大,PH值不易准确介定,因此最好采用酸度计准确测量PH值,以提高试验的精确度。④全部试验均采用同一种稀释液。3.31%红细胞的制备

①为避免有些鸡只的红细胞有自凝现象,因此配制1%红细胞悬液时应最好选择采取2-3只SPF鸡或未进行过任何免疫过的成年公鸡血液。当然采血的前提条件是要按十分之一采血量比例在一次性注射器中加入抗凝剂,如肝素、枸椽酸钠、柠檬酸钠等。②采血完毕后最好分装至2ml容量的圆底离心管中,因为通过2ml与1.5ml两种容量离心管相比较,放入1.5ml尖底离心管中的话,离心后,离心管底部红细胞不易与加入的PBS液混匀,易沉积在管底部,达不到洗脱干净的目的。③经2000~3000r/min,5~10min,弃去上液和红细胞上层的白细胞薄膜,再加入十倍以上血量的PBS液,上下缓慢颠倒(切忌用力过大使红细胞破裂),使其充分混匀,再离心弃去上清液,反复几次直至上清液清亮透明为止。④在加红细胞过程中还须不断轻摇以确保红细胞均匀,使其每孔加入相同数量的红细胞。⑤制备好的红细胞液如果放置后上清液变红,说明有溶血,不可再使用。3.4抗原液的配制①先做血凝试验测定效价,以抗原与红细胞完全凝集的孔为1HUA抗原,配制4HUA抗原应往前推算两孔,即除以4后的值。②每次做试验前,必须重新检测禽流感抗原的血凝效价,以免效价发生改变而导致抗原稀释倍数不准确,从而导致试验结果不准确。③为保证配制的抗原准确,还要进行抗原回滴试验。具体方法:做二排抗原回滴,在两排的第1~8孔各加25微升PBS,取4HAU抗原25微升加在两排的第1、第2孔,混匀,从第2孔倍比稀释至第4孔,弃去25微升,另一排同样。从第2至第8孔补25微升PBS,以保持75微升总量不变,另一排同样。两排的第1至第8孔各加25微升1%红细胞,震荡10秒钟。静置30分钟观察结果。这样在第1孔为4HAU抗原,第2孔为2HAU抗原,第3孔为1HAU抗原,第4孔为1/2HAU抗原,均为75微升总量,第5至第8孔为空白对照。如果抗原回滴试验不成立,应相应调整抗原浓度直至回滴试验成立。因为如果抗原浓度过高,则所测定的抗体效价水平偏低,如果抗原浓度过低,则所测定的效价偏高。所以不调整抗原浓度至实验成立的话会对结果有很大影响。4结果的判定每次试验必须设阳性及阴性(空白)对照血清,判别试验是否成立。判读结果时,将酶标板倾斜45°,以孔底沉淀的红细胞流动性好,呈泪珠样流淌,边缘无凝集颗粒为凝集完全抑制。5试验器具的清洗

每次试验完毕后,应将酶标板中液体甩净,然后用自来水反复冲净每个孔,再放入3%NaOH中4小时,清水反复冲净,再放入3%Hcl中4小时,清水反复冲净,再用蒸馏水反复冲洗几次,甩干水份,入干燥箱中干燥备用。实验用烧杯、加样槽、量筒等也应充分洗净、干燥。以免器具内有杂物、污物以及残留物从而影响试验结果。四、小结

在进行禽流感血凝抑制试验时,应充分考虑到各方面的影响因素,提供的检测结果才会真实可靠,准确掌握禽类的免疫抗体水平,进而为科学防控禽流感提供理论依据。第2篇:血凝红叶

阅读短文,按要求回答问题。(20分)

血凝红叶

1峡谷中,座落着一座低矮(简单、简朴、简陋)的小草房。门上刻着淡淡的字迹:“赵一曼被俘地址”,“抗日民族英雄赵一曼永垂不朽!”时令才深秋,却下了一场大雪,山野白皑皑,好一个银色世界。这里没有高耸的赵一曼纪念碑,没有鲜花,没有坟墓,她和白山黑水卧在一起,她和蓝天沃野永驻在一起。朔风在峡谷里呼啸,白雪在天空中飞舞,四野默默无声,那山、那水、那风、那雪似乎在为烈士致哀。小草房前的一丛柞树披着厚厚的雪,像盛开的梨花,它的叶子并未凋零,一片火红,像燃烧的火苗,耀眼。2一位正在着手写赵一曼传记作品的作家,随手采了一片鲜红的柞叶,沉重地讲起一段(悲哀、悲伤、悲壮)的历史来:

3赵一曼同志在战斗中左腿被打断,跌倒在地,不幸被俘。在哈尔滨,她惨遭百般折磨,受尽酷刑,但她始终坚贞不屈,最后敌人把她押送到亮珠河杀害。在赴刑场途中,赵一曼昂首挺胸,正气凛然,唱着歌向人们诀别:“民众的旗,血红的旗,收殓着战士的尸体,尸体还没有僵硬,鲜血已染透了旗帜„„”她高喊着:“打倒日帝国主义!中国万岁„”在口号声中,她倒在了血泊里,她才三十一岁„„

4我们都沉默着,谁也不说话,静听着这位作家的讲述。我仿佛感到赵一曼就站在我们面前,她英姿飒爽,目光炯炯,身披大衣,腰系皮带,手执匣枪,威严如铁„„她没有死,没有离去,她就屹立在这高高的崖顶上,像一尊不朽的雕像。5我们每一个人都肃然起敬。心里燃烧着对日本侵略者的愤怒火焰,情不自禁地想从洒着赵一曼的鲜血的地方捡点什么,从而带走我对英雄的思念。我采撷了一片柞叶,珍惜地夹在我带着的笔记本里„„

6这一片红叶呀,不是可作我最珍贵的书签吗?书签,凝结着赵一曼烈士的斑斑血迹,我把它珍藏在身边„„

1.在第一、二自然段的括号里,选择合适的词语。(用“√”标出)(2分)

2.确定下列词语的正确读音。(用“√”标出)(2分)

血泊(xi7p^xu8p#xu5p$)

屹立(ch9l@ch@l@y@l@)

3.结合上下文,用自己的话解释下列词语:(4分)

目光炯炯___________________________________________

情不自禁____________________________________________

4.写出第四自然段的段意。(4分)

____________________________________________

5.用“~~~~”线,划出一句表示作者联想的话。(2分)

6.作者为什么在洒着赵一曼鲜血的地方,采撷一片柞叶珍藏起来?(6分)

____________________________________________

七、1.简陋(√)悲壮(√)

2.xu8p#(√)y@l@(√)

3.赵一曼眼光明亮,有神采。“我”被英雄坚贞不屈英勇献身的革命精神感动,控制不住自己的感情。4.赵一曼的光辉形象永远活在我们心中。5.我仿佛感到赵一曼就站在我们面前,她英姿飒爽,目光炯炯,身披大衣,腰系皮带,手执匣枪,威严如铁„„她没有死,没有离去,她就屹立在这高高的崖顶上,像一尊不朽的雕像。6.红叶生长在赵一曼就义的地方,它是英雄坚贞不屈、英勇就义的历史见证,英雄的血浇灌了它,它的红色象征着英雄为民众抛洒的热血。所以“我”采撷了这珍贵的红叶,把自己对英雄崇敬、思念的无限深情寄托于红叶之中,把它永久地珍藏。第3篇:血凝素

植物血凝素(phytohaemagglutinin,PHA),是一种有丝分裂原,主要用于激活免疫细胞――淋巴细胞,是利用国际先进的超低温冷冻技术从红芸豆中提取的一种物质。由于其较难提纯,且成本极高,因此一直以来仅在实验室中作为刺激淋巴细胞增殖的试剂。一、主要成分植物血凝素的主要成分为植物多肽,是一种低聚糖(由D-甘露糖、氨基酸葡萄糖酸衍生物构成)与蛋白质的复合物。二、药理作用

1.植物血凝素为广谱抗病毒药,可刺激T淋巴细胞增殖分化产生大量效应T细胞和细胞毒T细胞,效应T细胞分泌产生大量细胞因子(如干扰素等)杀伤病毒,细胞毒T细胞可直接杀伤病毒。2.植物血凝素可同时刺激B细胞转化为浆母细胞后增殖分化为浆细胞,浆细胞产生大量非特异性抗体来中和病毒。3.可增强机体免疫功能,提高骨髓造血机能,促进机体白细胞及多核白细胞数量明显增加;提高机体细胞诱生干扰素,增强机体免疫力,促进抗体形成,增强机体对病原微生物的吞噬作用。4.植物血凝素与黄芪多糖、左旋咪唑、阿糖腺苷配伍,有明显的增效作用;与部分抗生素等配伍具有相加作用。5.植物血凝素肌肉注射后约5~15分钟血药浓度达高峰,口服约1小时后血药浓度达高峰,代谢产物主要从尿液排出。三、特点

1.使用方便、广泛,可以与许多药物同时使用,具有协同作用或相加作用。在粉、散剂中添加植物血凝素,具有明显提高原有产品疗效的作用,同时不干扰原产品的检测,且无种属特异性,可广泛应用于家禽、猪、牛等动物。2.使用安全,首先使用植物血凝素后不影响机体抗体水平,可用于预防肉仔鸡后期常发的病毒性疾病,避免了由于加强免疫引起的抗体水平过高、疫苗应激反应、药残严重,影响家禽产品出口。其次植物血凝素抗病毒谱广、毒性小、安全范围大。3.可以与疫苗同时使用,能起到弥补免疫空白期、减缓疫苗应激反应、增强免疫效果的作用。4.植物血凝素经特殊加工可口服给药,不受消化酶和胃酸的破坏,可常温保存两年(液体保存时一般6个月左右就开始出现浑浊现象,降低疗效)。避免了一般干扰素质量不稳定、应用时口服吸收差、易被破坏,必须低温保存的缺陷。四、作用

1.主要用于激活免疫细胞――淋巴细胞,是一种干扰素诱导剂,不仅可以刺激机体产生白细胞介素-2和干扰素,还可以刺激机体产生非特异性抗体。2.广谱抗病毒药,可用于防制家禽、家畜病毒性疾病,如鸡的传染性支气管炎、传染性喉气管炎、新城疫、传染性法氏囊病、鸡痘;鸭瘟、鸭病毒性肝炎;猪圆环病毒病、猪繁殖与呼吸综合征、猪传染性胃肠炎、猪病毒性腹泻、猪繁殖与呼吸综合征、非典型猪瘟;犬、水貂的犬瘟热、犬细小病毒等病毒性疾病。3.植物血凝素可作为动物免疫增强剂进行治疗、辅助用药或用于免疫功能受损引起的疾病,用来增强动物机体免疫力、提高药物的疗效。五、临床应用

1、用于预防肉鸡常见病毒病,30日龄左右使用1~2次,可预防或减轻肉鸡后期病毒性疾病的发生;

2、用于预防仔猪断奶前后病毒性疾病,与强力霉素、头孢类抗生素等合用,可避免仔猪在断奶后因母乳抗体丧失而导致的免疫力下降或造成大面积发病和死亡;

3、植物血凝素+抗病毒药物+广谱抗生素可用于防制鸡病毒性疾病(如非典型新城疫、温和型禽流感、传染性法氏囊病初期、各型传染性支气管炎、鸡痘、传染性喉气管炎),急性病毒病慎用;

4、配合头孢类抗生素,每月对健康蛋鸡进行一次预防,可有效防止蛋鸡发生病毒性疾病;植物血凝素配合法氏囊抗体、庆大霉素或丁胺卡那可用于防制急慢性传染性法氏囊病;5、配合呼吸道药物应用可用于防制家禽传染性支气管炎、传染性喉气管炎等由病毒引起的呼吸道系统疾病;

6、与鸭病毒性肝炎血清或黄芪多糖配合应用可用于防制鸭病毒性肝炎;

7、与黄芪多糖和丁胺卡那配合应用,可用于防制鸭瘟。六、植物血凝素在动物疾病防止上的应用,主要进行以下实验:

1.利用鸡的白细胞脾细胞鸡胚成纤维细胞以有机锗(Ce—123)新城疫弱毒株(NDV-F)植物血凝素(PHA)聚肌胞(POLYI:C)为诱生剂,对外源性干扰素(IFN)诱生条件如诱生剂量诱生时间及培养条件进行了比较分析和探讨,结果发现以Ce—123诱生IFN的能力为最强,其他依次为:PHANDV-FPOLYI:C;且鸡脾细胞和鸡白细胞产生的IFN效价高于鸡胚成纤维细胞;并且最佳诱生剂量依次为:Ce—123为70微克/毫升;鸡NDV-F为128HAU/毫升;POLYI:C为60微克/毫升;PHA为20毫克/毫升。该研究表明,植物血凝素在机体内刺激机体产生干扰素的能力是聚肌胞的30倍,所以服用1mg植物血凝素相当于服用30mg的聚肌胞和直接服用300mg干扰素。2.PHA对家禽的新城疫、传染性法氏囊病、传染性支气管炎、传染性喉气管炎、脑脊髓炎、流感等疾病的预防及治疗效果。结果表明PHA对下列病毒感染的保护率分别为新城疫77.5%、传染性法氏囊病92.5%、传染性支气管炎85%、传染性喉气管炎77.5%、脑脊髓炎90%、流感80%。七、PHA的作用机理1.PHA刺激T细胞增殖分化产生大量效应T细胞和细胞毒T细胞;效应T细胞分泌产生大量细胞因子(如干扰素等)杀伤病毒;细胞毒T细胞可直接杀伤病毒。2..PHA同时可刺激B细胞转化为浆母细胞然后增殖分化为浆细胞,浆细胞产生大量的非特异性抗体来中和病毒。第4篇:凝血流程(材料)

凝血试验的质量控制流程

凝血试验在临床起着非常关键的作用,特别是血栓与止血检测的特性,因此规范凝血项目检测过程,为临床提供及时,可靠,准确的检验结果是至关重要的。具体的质量控制流程如下:试剂

凝血活酶含钙试剂(ThromborelS)、激活剂、氯化钙溶液、凝血酶试剂D-DimerPlus试剂盒、缓冲液、乏因子血浆、SysmexCleanI清洁控血浆(Control)、蒸馏水、其他消耗品二、方法

仪器法:全自动血凝仪,严格按作业指导书进行操作。三、标本的采集、制备、保存等注意事项

1.采血时,首先应该确认病人姓名,并且将姓名和编号写在真空采血管的标签处。2.尽可能保证每次采血都在同样的条件下进行,即病人处于休息状态,并且在早前采血。3.凝血实验标本最好不与其它实验一起采集,否则由于标本的分配、分装等而液停留在针管的时间延长。4.取血时,病人应松弛,环境温暖,防止静脉痉挛,止血带的压力应尽可能小血速度平稳顺利,防止产生气泡。5.用定量为2毫升的一次性枸橼酸钠(109mmol/L)真空采血管采血至指定刻度,取血完毕立即轻轻颠倒混匀,不要剧烈震荡,并避免产生气泡。6.及时离心,3000转/分离心标本10分钟,以除去血小板。7.务必于采血后2小时内测定完毕,如不能完成试验,冷冻贮存少量血浆(0.5—1ml)(最好在-70℃,或者当贮存时间较短时,可以置于-20℃条件下),在实验前将血浆于37℃下快速融化。血浆用塑料试管存放并用塑料吸管移取标本。四、质量控制

(一)室内质控

1制品平行进行测定室内质控靶值及标准差设定

1.1靶值设定:当要更换新批号的控制品时,应在“旧”批号控制品结束前,将新批号控制品与旧批号控,20d内检测完20或更多独立批获得20次控制测定结果,剔除超过3SD的数据进行统计,计算出平均数作为值。1.2标准差设定:根据20或更多独立批获得的至少20次质控测定结果出标准差,并作为暂定标准差。以此暂定标准差作为下1个月室内质控图的标准差进行室内质控;1个月结束后,将该月的在控结果与前20次质控测定结果汇集在一起,计算累积标准差(第1个月)

以此累积的标准差作为下一个月质控图的标准差。当换算出的变异系数超出1/3CLIA'88范围,以1/3CLIA'88数值为变异系数计算标准差。重复上述操作过程,连续3~5个月。1.3更换新批号试剂时,PT、INR、APTT、FIB应重新计数靶值和标准差。2室内质控操作2.1质控操作频次:每天早上8点及下午4点各执行1次。2.2质控规则:

2.1将下列Westgard多规则应用于质控数据,判断每一分析批是否在控。2.1.112s:一个质控结果超过平均数±2S,仅用作“警告”规则,并启动由其他规则来检验质控数据。2.1.222s:同一个水平的质控品连续两个质控结果同时超过平均+2S或平均数一2S,或在一批检测中,2个水平的控制值同方向超出平均数+2S或平均数一2S,判断为失控,该规则对系统误差敏感。2.1.313s:一个质控结果超过平均数±3S,就判断失控,该规则主要对随机误差敏感。3失控原因分析

3.1立即重新测定同一质控品。此步主要是用以查明人为误差,每一步都要认真仔细地操作,以查明失控的原因;另外,这一步还可以查出偶然误差,如是偶然误差,则重测的结果应在允许范围内(在控)。如果重测结果仍不在允许范围,则可以进行下一步操作。3.2新开一瓶质控品,重测失控项目。如果新开的质控品结果正常,那么原来的质控品可能过期或在室温放置时间过长而变质,或者被污染。如果结果仍不在允许范围,则进行下一步。3.3更换试剂,重测失控项目。如果结果仍不在允许范围,则进行下一步。3.4进行仪器维护,重测失控项目。如果结果仍不在允许范围,则进行下一步。3.5重新校准,重测失控项目。用新的校准液校准仪器,排除校准液的原因。3.6请专家帮助。如果前五步都未能得到在控结果,那可能是仪器或试剂的原因,应向仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。4找到原因,并采用了纠正措施后,重测结果在控,继续进行检本检测,最后填写失控报告。(二)室间质评:

实验室必需积极参加由临床检验中心组织的室间质评活动,了解本单位PT等测定的准确性,回报时附仪器型号和试剂厂牌及批号等内容以供比较。五、干扰和交叉污染

1许多的实验误差都来源于技术的错误。在实验技术、试剂、温度及PH值上很小的变化都会导致试验结果明显的变化。孵育时间与温度是凝血酶原时间测定时应严格控制的参数。血浆绝不能在37°C下放置10min。2实验前应检查血浆是否有溶血、黄疸、脂血或出现凝块,溶血、黄疸、脂血会干扰凝固终点的确定。六、计算及超过线性范围处理1PTR的计算

PTR=PT(病人)/PT(正常参比血浆)2INR的计算INR=PTRISI

3黄疸病人无结果:手工复查。4脂血病人无结果:手工复查。5超出线性范围时:手工复查。第5篇:血凝抑制试验

影响禽流感血凝抑制试验因素的分析

及解决方法

摘要:在试验过程中,存在很多的因素会直接影响禽流感血凝抑制试验,从而导致试验结果不正确等现象出现,禽流感病毒能够与鸡红细胞发生凝集现象,这种红细胞凝集现象可被特异性免疫血清所抑制,即红细胞凝集抑制实验(HI)。基层工作中常用于新城疫、禽流感等免疫抗体的检测,辅助诊断病毒性疾病等,此方法操作简便、快速、准确、实用,但在实践中也常常由于某些因素的影响,从而使试验结果不精确,有时甚至无法判定结果。1血凝试验原理和方法

血凝(直接血凝)反应(HA):利用病毒或病毒的血凝素,能选择性凝集动物红细胞及病毒浓度与红细胞凝集程度呈正相关的特性,采集敏感的动物红细胞配制成1%红细胞悬液与待测定的病毒液在微量血凝板上进行红细胞凝集实验,根据红细胞的凝集程度间接测定病毒中的病毒浓度。方法是用鸡红细胞与标准抗原作用,检测出标准抗原血凝单位,为血凝抑制试验作准备。2影响血凝试验的主要因素

2.1被检血清腐败变性

被检血清腐败变性严重影响免疫抗体检测。因此,血样采集后要及时分离血清,分离后及时测定或放臵在4℃冰箱内保存,要力求新鲜,如暂时不测定可冷冻保存。血清使用前要充分摇匀。2.2不同来源、不同浓度的红细胞

不同来源、不同浓度的红细胞会使结果差异很大,所以红细胞来源一定要相同。一般需要3只或3只以上公鸡来提供红细胞,将3只以上公鸡红细胞混合在一起。也可由1只公鸡来提供红细胞,但必须经多次试验证明是可行的。有抗体鸡提供的红细胞需要更多次数洗涤。但要注意有时不同的公鸡提供的红细胞对禽流感H5亚型抗体测定,效价差异很大。不同浓度的红细胞对抗体测定也有影响。2.3病毒悬液和红细胞悬液在使用前没有摇匀

病毒悬液和红细胞悬液如没有摇匀,加入时浓度高低不一,会人为造成误差。因此抗原和红细胞使用前一定要摇匀,保证每一孔中加入的浓度准确一致。2.44个血凝单位(HAU)抗原配制不准确

4个HAU抗原要现用现配,混悬液要混匀,配好的抗原室温下放臵不得超过4个小时,不可反复冻融。为防止4个HAU抗原配制不准确.在作HI试验前必须做4单位抗原校正。用微量移液器向反应板的第二孔至第五孔加生理盐水各25微升,第一孔不加。用微量移液器吸取4单位抗原25微升分别加入第一孔、第二孔中,从第二孔开始挤压4-6次混合,然后吸出25微升至第3孔,依次倍比稀释到第4孔,弃去25微升,第五空为对照空。用微量移液器再吸取1%红细胞悬液依次加入1-5孔,每孔25微升。于微量振荡器上振荡1分钟。室温静臵20-30分钟后观察结果。若第一、二、三孔为完全凝集,第四孔红细胞为50%沉淀,第五孔为对照完全沉淀,如果出现以上结果,表明所配4单位抗原准确,校正成立。否则,需重新测定抗原效价,重新配制4个HAU抗原,并作4单位抗原校正,直至结果准确。2.5适量配制4单位抗原和1﹪红细胞

配制好的4单位抗原在2-8℃保存条件下,3天内效价基本无变化,1﹪红细胞在2-8℃保存条件下,3天内不会发生溶血。超过3天,4单位抗原和1﹪红细胞会因自身效价降低和溶血而影响实验结果。因此,每次实验前要根据待测样品数量计算一下本次实验需要多少的4单位抗原和1﹪红细胞,适当配臵,避免因多配而引起浪费。2.6温度

温度对实验结果也有影响,一般要求在室温25-37℃进行实验,当温度过高,超过37℃以上时,会使反应结果解脱加快,易发生病毒解离,这样,反而阻止反应;当实验温度低于4℃时红细胞有时会发生自凝现象。2.7微量血凝板的清洁

微量血凝板的清洁度对试验结果有很大的影响。微量血凝板清洁的正确程序为首先用自来水反复冲洗,然后于1%-2%的稀盐酸中浸泡24h以上,再用自来水反复冲洗2-3次,最后经蒸馏水浸泡24h后37℃烘干备用。3常见结果现象分析

3.1对照孔凝集现象

3.1.1盐类凝集:所谓盐类凝集即稀释液中氯化钠达至一定高浓度时,即使没有血清抗体也能发生凝集反应。3.1.2当生理盐水被细菌污染时也可出现对照孔凝集。3.1.3血清变质或受细菌污染时也可以出现对照孔凝集。3.2.全部凝集

3.2.1当红细胞受细菌污染或保存时间过长可出现此现象。3.2.2抗原滴加时出现失误,工作抗原效价过高。3.2.3生理盐水受细菌污染或其它因素。3.3红细胞全部下滑

3.3.1当配制抗原时,配制工作抗原效价过低,不足以凝集鸡红细胞。3.3.2加样时所有孔全部加成生理盐水亦出现全部下滑现象。4HA-HI试验操作中应注意的问题

4.1可根据待检样品的多少和操作者的熟练程度来选定移液器。血凝抑制试验中最常见的是跳孔现象(如第3孔和第5孔均出现血凝抑制,而第4孔却出现凝集),使结果无法判定。微量法的特点是节省抗原,测样多,如用多头移液器可同时检测几个血样,但要求操作者认真熟练,否则会有一定误差。4.2在微量法中移液工具的准确度直接影响试验结果。若移液枪使用不当对试验结果有较大影响,应用这种器具前每次都应校准吸液量并将刻度固定好,注意把每个吸头安装牢固密封,操作时手压下的力度均匀,否则移液量偏差,造成结果不准确。4.2.1移液枪下压时有二个阻力位臵,压下时第一个即为标准刻度的量值,再加力压的第二个阻力位臵为放液时用的位臵。因此,不要在吸取时将移液枪重力压入第二个阻力位臵,特别是在V型孔中稀释时,有时重压有时轻压,使试验用液吸入不准造成试验结果不准确。现在都使用多头微量移液器代替单道移液器进行实验操作,以提高工作效率,但应用这种器具前每次都应校准吸液量并将刻度固定好。注意把每个吸头安装牢固密封,操作时手压下的力度均匀,否则移液量偏差,造成结果不准确

4.2.2移液枪在96孔V型板的试验使用中,不要紧靠V孔底部,可能会影响液体正常吸入,造成试验液量偏少。第6篇:血透室的自我鉴定

整体护理在血液透析病人护理中的应用

吴素琴

鄂州市中心医院血液透析室

[摘要]目的:探讨整体护理在血液透析中的应用,使血液透析病人安全、系统、舒适地接受治疗。方法:对20例40~70岁长期血液透析病人在血液透析过程中应用整体护理模式,并评价其效果。结果:20例病人均有生理和心理两方面的改善,病人接受有规律的血液透析治疗,提高了生活质量和社会适应能力。结论:整体护理模式提高了护理质量,体现了以人为本的护理内涵。[关键词]整体护理;血液透析护理

整体护理是指护理工作从单纯的对病人生活和疾病的护理,扩展为全面照顾和满足护理对象的生理、心理和社会方面的需要。根据这一模式,我科在血液透析过程中提供全方位整体护理使病人顺利透析,提高生活质量。1临床资料1.1一般资料

本次观察均系我科长期血液透析病人,男15例,女5例,年龄40~70岁,平均年龄55岁,均为尿毒症终末期病人。1.2方法

20例病人在血液透析护理中应用整体护理模式。然后采用问卷调查法,向病人发放满意度调查表,了解护理效果。2护理

2.1血液透析前的护理

2.1.1内瘘术后护理向病人讲解内瘘护理的重要性,它是血液透析质量的基本保障,是病人的生命线。内瘘术后早期,尽量穿袖口宽松内衣,抬高术侧肢体,促进静脉回流,以减轻肿胀程度,包扎伤口不宜过大,每日检查吻合口震颤及杂音。术后1~2周每天用术侧手捏握橡皮球3~4次,每次10min,内瘘穿刺至少应在术后4周。2.1.2环境的安排室内保证空气清新,环境清洁,病人正前方安置电视。每日定时开窗通风及紫外线空气消毒。2.1.3心理护理尿毒症病人由于长期透析,经济上的负担重,随着时间延长,并发症多,易产生忧虑、恐惧、紧张的心理。透析治疗是一种非生理性状态,血液透析前做好病人的心理疏导,讲解相关血液透析知识,有效利用病人的家庭支持系统尤为重要。应鼓励病人战胜这种心理的不安和痛楚,并向病人本人和家属充分解释血液透析治疗的原因及效果,必要时请接受透析治疗疗程较长、效果较好的病人帮助解释以取得病人密切配合。2.2血液透析中的护理

2.2.1掌握熟练的穿刺技术熟练的动静脉穿刺技术是使病人减少痛苦的重要保障。而且内瘘早期感染与手术有关,而后期感染常与穿刺点污染有关[1]。护士每次穿刺应更换部位,严格无菌操作,透析结束时压迫止血要用无菌敷料。对疼痛敏感的病人穿刺前多与其交流,分散注意力或作深呼吸,消除紧张、恐惧的心理。2.2.2并发症的观察与处理在透析过程中密切观察病人的感受及需要,对透析时应急情况应及时处理,如穿刺部位肿胀、针眼渗血、低血压、抽筋、恶心、呕吐、寒战等应配合医生及时采取紧急措施,效果不理想及时回血,保证病人生理、心理上的安全感。2.3血液外渗的护理尽量按压穿破血管的针眼,

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