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文档简介

酶类药物的

盐析纯化主讲：莱芜职业技术学院孙静（副教授）瑞阳制药有限公司田真（高级工）在蛋白质水溶液中加入中性盐，随着盐浓度增大而使蛋白质沉淀析出的现象。盐

析2）中性盐离子破坏蛋白质表面水膜1）中性盐离子中和蛋白质表面电荷盐

析常用中性盐(NH4)2SO4,Na2SO4，MgSO4，NaH2PO4，NaCl，Na3PO4,K3PO4。①溶解度大：溶解度随温度变化小，低温下仍具有较大的溶解度，②分离效果好。硫酸铵分段盐析效果也比其他盐好，一步可除去75%的杂蛋白③不易引起蛋白质变性：0-4°C④价格便宜。(NH4)2SO4：盐

析蛋白质的浓度2.5%-3.0%的蛋白质浓度温度温度提高利于蛋白质沉淀室温（10~25℃）少数不稳定、易失活的物质：低温（0-4℃）pH溶液PH值调到目的蛋白的等电点处盐浓度硫酸铵饱和度不同，析出的成分不同

01

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0204影响盐析因素制药企业盐析精益求精匠心制药操作：C级洁净区的粗纯间设备：盐析罐对破壁提取岗位生产的稀酶液（即上清液）进行盐析操作，以达到沉淀目标蛋白的目的盐析岗位精益求精匠心制药盐析操作盐析清场一次盐析二次盐析更衣生产前检查清场准备工作盐析操作硫酸铵分级盐析一次盐析：硫酸铵浓度为55%（饱和度）二次盐析硫酸铵的浓度为90％（饱和度）。盐析操作①更衣②检查地面有无上批次遗留物②检查桌面有无上批次遗留物③检查岗位清场合格证④检查设备状态标志⑤检查地漏⑥检查温湿度是否符合要求⑦盐析岗位操作及清洁SOP：齐全⑧盐析罐操作及清洁SOP：齐全生产前准备（更衣

检查）一次盐析操作盐析操作二次盐析操作盐析操作清

场孙老师（出镜）：感谢田老师的操作及讲解。固体投盐法先将盐粒研细，在不断搅拌下分批缓慢加入到溶液中，避免局部过浓造成共沉淀和某些蛋白质变性。A盐析后的蛋白质最好尽快进行脱盐处理，以免变性，采用超滤和离子层析处理B操作注意事项实事求是，不提前，不滞后生产记录21用量及盐处理固体硫酸铵加入法（量大时）加入饱和硫酸铵溶液法（量小时）硫酸铵用化学法将重金属除去（如通入H2S后过滤），再将硫酸铵重结晶备用。操作注意事项3.严格按操作规程操作操作注意事项总

结●生产前检查●一次盐析●二次盐析●清洗盐析原理及影响因素盐析岗位盐析操作注意事项盐析操作●固体投盐法，先将盐粒研细，在不断搅拌下分批缓慢加入到溶液中●盐析后的蛋白质采用超滤和离子层析处理●指在蛋白质水溶液中加入中性盐，随着盐浓度增大而使蛋白质沉淀析出的现象。●盐浓度、蛋白质

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