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临床PCR试剂盒的选用和质检PCR或RT-PCR试剂盒的组成核酸提取试剂核酸扩增或逆转录-核酸扩增试剂产物检测试剂（有些使用全自动分析仪的PCR方法因其核酸扩增和检测同时完成，故无专门的产物检测试剂）影响PCR试剂盒质量的因素内在因素:原材料、核酸提取方法、方法学设计影响PCR试剂盒质量的因素：扩增所需的原材料寡核苷酸引物和探针缓冲液和dNTP聚合酶、逆转录酶等PCR反应混合物寡核苷酸引物和探针其对试剂盒质量的影响首先是纯度。纯度的判断可根据260/280吸光度比值来判断，如＜2.0,则需重新纯化。另一种方法是将其在聚丙烯酰胺凝胶上电泳，如出现一条以上的带或迁移位置错误，则需重新纯化。是否有污染。结合特异性（浓度）dNTP和缓冲液dNTP（包括dATP、dCTP、dGTP和dTTP或dUTP）的浓度缓冲液：在储存和扩增循环中稳定、作为聚合酶活性所必须的Mg++（或用于rTth的Mn++）的浓度以及pH等逆转录酶、DNA聚合酶酶的浓度酶的活性核酸扩增方法PCRRT－PCR转录依赖的扩增（TMA）连接酶链反应（LCR）链替代扩增（SDA）等影响PCR试剂盒质量的因素：核酸提取核酸提取的有效性核酸提取的简便性影响PCR试剂盒质量的因素：产物检测杂交固相特异探针及其标记物影响PCR试剂盒质量的因素内在因素:原材料、核酸提取方法、方法学设计外在因素：试剂盒的运输和贮存外在因素：试剂盒的运输和贮存试剂盒的运输和贮存PCR试剂盒的有效期一般为6个月，这是指在适当的贮存温度下。核酸扩增部分的试剂一般要贮存于-20℃下；产物检测部分试剂则贮存于2〜8℃。试剂盒从厂家到用户手中，均要经历运输及运输中的贮存，任一环节的不当，均会影响试剂盒的临床使用质量。PCR试剂盒的分类定性测定：PCR-ELISA、PCR-膜上杂交（杂交梳）、荧光PCR（分子信标和TaqMan等）定量测定：PCR-ELISA、TaqMan和Amplisensor荧光定量、AmplicorPCR-ELISA定量等。PCR试剂盒的选用原则参考试剂生产厂家的信息广告参考同行对有关试剂盒的使用效果参考有关机构的综合评价根据使用目的根据所在实验室的技术特点根据所在医院患者的承受能力PCR试剂盒的质检外包装：厂家名称、检测目的、批准文号、批号和有效期等。内包装：试剂瓶是否漏液、真空包装是否破损以、试剂是否齐全以及是否有使用说明书等。PCR试剂盒的质检采用血清（样本）盘（Panel）质检：PCR试剂血清（样本）盘由一定数量的原血清阴、阳性样本、2〜3份纯化核酸（DNA或RNA或cDNA）样本以及3〜5份系列稀释阳性样本所组成。样本总数可定在20份左右。原血清样本用于判断试剂盒对特定病原体核酸检出的特异性、灵敏度和符合率；纯化核酸样本用于判断DNA扩增或逆转录及DNA扩增的有效性；系列稀释阳性样本用于判断试剂的测定下限。试剂特异性、灵敏度和符合率计算公式试剂特异性、灵敏度和符合率计算公式灵敏度(

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