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消旋酶法dl-丙氨酸遗传毒性研究
氨基丙烯酸是构成蛋白质的基本单位。这是人体的必要氨基酸。在生理过程中起着重要作用。与氨基丙烯酸一起转化为体内的葡萄糖循环。丙氨酸分为α-丙氨酸/L-丙氨酸,DL-丙氨酸是α-丙氨酸的外消旋体,由等量的左旋体和右旋体构成,无旋光性1材料和方法1.1材料表面1.1.1纯度:97.0%消旋酶法DL-丙氨酸(安徽华恒生物公司,AA0415042303),纯度≥99.0%。实验时,消旋酶法DL-丙氨酸经充分研磨成粉末后用纯水配制成10000、5000和2500mg/kg。1.1.2合成ndj-n-aldr创造的氨基z-双-4-甲基-1-,8-二羟,8-二羟基-,8-二羟,8-二氢-p0,7ci-p0大鼠肝脏微粒体酶S9(齐氏生物公司,20160406)、Dexon(敌克松)(Dr.EhrenstorferGmbH公司,40709)、叠氮钠(Sigma公司,04202DJ)、2-AF(Sigma-Aldrich公司,00405JD)、1,8-二羟蒽醌(TCI公司,FHF01-LTMJ)、2-氨基蒽(TCI公司,7GCCI-P0)。环磷酰胺(AlfaAesar公司,K06R045)、秋水仙素(国药集团化学试剂有限公司,20140423)1.1.3fp3动物SPF级昆明小鼠80只(安徽医科大学实验动物中心提供,动物合格证号:34000200000776和34000200000825,SPF级动物使用许可证编号:SYXK(皖)2013-006),体质量25~35g,周龄7~12周,温度20~25℃,湿度40%~70%。所有动物实验前适应性饲养至少3d,自由饮水、摄食(灌胃前受试动物隔夜禁食)。1.1.4生物学鉴定特性鼠伤寒沙门氏菌TA97a、TA98、TA100、TA102、TA1535(MolecularToxicology公司),正式实验前经生物学鉴定特性符合实验要求。1.2方法1.2.1性别随机数字法选取50只昆明小鼠,雌雄各半,按性别采用随机数字法随机分5组,每组10只。依据食品安全国家标准(GB15193.5-2014)1.2.2大鼠精原细胞染色体畸变实验选取30只雄性昆明小鼠,采用随机数字法随机分6组,每组5只。依据食品安全国家标准(GB15193.8-2014)1.2.3细菌回复突变实验pmes试验依据食品安全国家标准(GB15193.8-2014)1.3统计方法采用SPSS22.0进行统计分析,计数资料以率表示,率的比较采用χ2结果2.1组pce微核率比较消旋酶法DL-丙氨酸10000mg/kg、5000mg/kg和2500mg/kg组PCE微核率与阴性对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。2.2小鼠睾丸精原细胞染色体畸变试验消旋酶法DL-丙氨酸10000mg/kg、5000mg/kg和2500mg/kg组动物睾丸精原细胞染色体畸变率、畸变细胞率与阴性对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。见表2。2.3回复突变实验结果所有实验平皿菌苔生长良好,无明显可见的沉淀痕迹,对照组每皿回变数均在正常范围,阳性对照组两次测试各菌株的回复突变数均大于对照组的2倍以上。消旋酶法DL-丙氨酸各剂量组及溶剂对照组与空白对照组比较,两次测试各测试菌株的回复突变数均小于对照组2倍,各剂量组之间无剂量-反应关系,测试结果均为阴性。见表3~6。3消旋酶法dl-丙氨酸对小鼠细胞增殖和细胞毒性的影响甜味剂是能使食物具有甜味的非糖类物质,作为一大类食品添加剂广泛应用于食品工业中,具有品种多、数量大、应用广等特点,但其安全性问题也一直是社会关注的焦点本研究结果表明,各剂量消旋酶法DL-丙氨酸没有对骨髓红细胞造成明显的抑制作用,未见其对小鼠体细胞或生殖细胞具有遗传毒性或致突变作用,且无论是否存在代谢活化系统,消旋酶法DL-丙氨酸
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