实验九海水中氨

实验九海水中氨-氮的测定、实验目的了解次溴酸钠氧化法测定海水中氨-氮的方法原理，掌握其实验条件。、实验原理在强碱性条件下，海水中的氨-氮被次溴酸钠氧化为亚硝酸-氮，然后在酸性条件下，用重氮-偶氮法测定亚硝酸-氮的总含量，扣除海水中原有的亚硝酸-氮的含量，即为海水中氨-氮的含量。BrQ+5Br+6Hf3B「2+3HOB「2+NaOH>NaBrO+NaBr+HOBrO--+NH++2OH-fNO-+3HO+3Br-三、 实验仪器与实验试剂21、 仪器：UNICO200C分光光度计；5cm比色皿，4只；100mL容量瓶，1只；50mL比色管，9支；5mL移液管，1支；1mL移液管，2支；洗瓶，2个；洗耳球，1个。2、 试剂及其配制：注意：试剂配制使用高纯水或者无氨去离子水配制。（1） 氢氧化钠溶液（40%:称取400g氢氧化钠（G.R），溶于1000mL无氨去离子水中，贮存于试剂瓶中。（2）次溴酸钠氧化剂：①次溴酸钠贮备液：称取 2.5g（A.R）溴酸钾及20g溴化钾溶于1000mL无氨去离子水中，贮存于试剂瓶中，此试剂常年稳定。②次溴酸钠标准使用溶液：取1mL贮备溶液于试剂瓶中，加无氨去离子水50mL加3mL1:1盐酸溶液，混匀，放暗处，5min后，加50mL40氢氧化钠溶液，混匀。注意该溶液不稳定，临用前配制。（3）磺胺溶液（1%：称取109磺胺（A.R）溶于1000mL1:1盐酸溶液中，贮存于棕色瓶中。（4）a-盐酸萘乙二胺溶液（0.1%）：称取1.0ga-盐酸萘乙二胺（A.R）溶于1000mL去离子水中，贮存于棕色试剂瓶中，有效期1个月。（5）盐酸溶液（1:1）:1体积浓盐酸与1体积水混合。（6）氯化铵标准贮备溶液：准确称取在110C115C干燥过的氯化铵2.6745g，溶于无氨去离子水中，转移于500mL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，其浓度为25.00Pmol/mL。四、 实验步骤1、 配制氯化铵使用标准溶液I：移取贮备标准溶液1mL于100mL容量瓶中，用无氨去离子水定容至100mL混匀，浓度为1.000Pmol/mLo2、配制氯化铵使用标准溶液U:移取使用标准溶液 10.60mL于100mL容量瓶中，用无氨去离子水定容至100mL混匀，浓度为6Pmol/mLo3、 标准系列：分别移取使用标准U0.00mL,0.50mL,1.00mL,2.00mL,3.00mL,4.00mL，于50mL比色管中，加无氨去离子水至50ml，依次加入5mL次溴酸钠氧化剂，混合。氧化30min,加5mL磺胺溶液，混匀。5min后，力P1mLa-盐酸萘乙二胺溶液，混匀。15min后以去离子水为参比（L=3cn），测定各个溶液的543nm下的吸光度A,其中容白吸光度值为A已扣除空白吸光度值A后的吸光值A为横坐标，氨氮浓度为纵坐标绘制标准工作曲线，并用线性回归去除标准曲线的截

距a和斜率b。4、 水样的测定（双样）：取50mL经0.45Pm滤膜过滤的水样于50mL比色管中加入5mL次溴酸钠氧化剂，混匀。氧化30min,加5mL磺胺溶液，混匀。5min后,加1mLa-盐酸萘乙二胺溶液，混匀。15min后以去离子水为参比测定溶液在543nm处的吸光度（A）。根据标准曲线换算出实际样品中氨氮浓度。5、实际海水样品的测定（双样）：根据实际海水污染情况，取1025mL实际海水水样于50mL比色管中，加无氨去离子水至50mL然后加入5mL次溴酸钠氧化剂，混匀。氧化30min，加5mL磺胺溶液，混匀。5min后，力P1mLa-盐酸萘乙二胺溶液，混匀。15min后以去离子水为参比测定溶液的吸光度（Aw）。根据标准曲线换算出实际样品中的按氮浓度。6、 水样空白的测定：取上述相同体积的水样于50mL比色管中，加无氨去离子水至50mL加5mL磺胺溶液，混匀。加入5mL次溴酸钠氧化剂，混匀。5min后，加1mLa-盐酸萘乙二胺溶液，混匀。15min后以蒸馏水为参比测定溶液的吸光度（A）。五、实验结果标准曲线拟合。应用Excel绘制亚硝酸盐氮（NM-N）浓度与吸光度之间关系的标准曲线（一）上午组第1组②加氧化剂A」②加氧化剂A」104 0132-0.1182b=0.059sw-A=0.079该组C-A标准曲线方程为:111=111 0.1102A=0.051bA=A'-Ab=0.059A=0.051bA=A'-Ab=0.059该组C-A标准曲线方程为：C=2.56A-0.0054…C=2.56X0.059-0.0054=0.146Pmol/LA=AC=1.75A+0.036…C=1.75X0.079+0.036=0.174 Pmol/LC=2(C2-C1)=2X(0.114-0.146)③故样那么实际75氮XH为mg/L第2组不加氧化剂②加氧化剂0119+0J20A'』竺02 “120Ab1=0.038Ab2=0.068--A=Aw~Ab2=0.083该组--A=Aw~Ab2=0.083该组C-A标准曲线为C=2.81A+0.003=2.81X0.083+0.00302Pmol/LC-A标准曲线为C=1.75A+0.030.C=0.082X1.75+0.030C=0.174Pmol/L =0.236③故样品中实际氨氮含量为C=2(C2-C1)=2X(0.236-0.174)=0.124Pmol/L即C=8.71X10-4mg/L第3组

①不加氧化剂A』0」01 0.①不加氧化剂A』0」01 0.104=0.102A2A1=0.025--A"'-'"077该组C-A标准曲线为C=2.70A-0.019…C=2.70X0.077-0.019=0.189Pmol/L截距开始为正数了③故样品中实际氨氮含量为C=2(G-C"=2X(0.459-0.189)=0.540那么C=7.56X10-3mg/L第4组(本组)①不加氧化剂②加氧化剂0.2030.201n9n9=0.2022b2=0.025Ae=Asv-A：=0.177该组C-A标准曲线为C=2.66A-0.012' …C2=2.66X0.1770.012=0.459Pmol/LSW②加氧化剂A，0.151+0.251A=0.099b1-A=A-Ab1=0.052该组C-A标准曲线为C=2.68A+0.004…C=2.68X0.052+0.004=0.059b2-A=AwrAb2=0.109该组c-A标准曲线为C=2.68A-0.012…C2=2.68X0.1090.012=0.280Pmol/L故样品审实际氨氮含量为C=2(C2-C1)=2X(0.280-0.143)=0.274 Pmol/L那C=3.83X10-3mg/L（二）（二）下午组C=2.90A-0.022第1组①不加氧化剂A'=bA=0.048b加氧化剂0.0660.080 _0.073AeWF 2Ab2=0.048--A=(AsWAb)-(Ab'-Ab2)=0.033.../C=0.033X2.90-0.022=0.074Pmol/L那么海水中氨氮含量为(稀释5倍)

0.0670.051Ab'= 2c=dC=0.370Pmol/L=5.18x10.0670.051Ab'= 2°」190.046-0.165A= 2SWAb=Ab2=0.048--A=(Asw-Ab1)-(Ab'-Ab2)=0.106/C=0.106x2.98-0.822=0.285Pmol/L那海水中氨氮含量为C=5dC=5X0.285=1.427Pmol/L=2.00x10m2g/L第3组八0.258Aw=0.2412=0.250=0.0590.0470.055A=——2=0.051Ab1=Ab2=0.048A=(AwAb2)-(Ab'-Ab1)=0.199/C=0.199X2.90-0.22=0.797Pmol/L那海水中氨氮含量(同上组判断相同，稀释倍数应为 5倍)C=5dC=5X0.797=3.986Pmol/L=5.58x10-2mg/L(三)经上下午各组测定海水中氨氮浓度分别为(mg/L)上午组1组2组3组4 =^-7= 均值 =^-7= S7.91X10-48.71X10-4:7.56X10-33.83X10-33.26X10-327.667下午组1组2组3均值5.18X10-32.00X10-2= [5.58X10-2 2.70X10-421.249上午组Q检验（置信度95%Q计算=(8.71-7.91)X10-4/[(38.3-7.91) X10-4]=0.026-Q表=0.85故应保留下午组Q检验(置信度95%Q计算=(20X10-3-5.18X10-3)/(55.8X10-3-5.18X10-3))=0.29<Q表=0.98故保留本组数据检验相对于偏差d=[(3.83X10-3-3.26X10-3)/(3.26X10-3)]x100%=17.5%六、 注意事项1、 在测定中注意避免在空气中氨的影响，玻璃仪器用浓硫酸洗剂2、 工作曲线与水样温差不应超过20C3、 所用水均为高纯水。七、 思考与讨论1、 温度对实验有何影响？温度对吸光度的测定有影响，若温度变化较大，会导致配合反应的平衡移动，只有当配离子浓度与配合物浓度相等时，吸光度率最大，这样会使数据小于正常吸光度率，吸光率与浓度成正比，结果便不准了。2、 过量的次氯酸钠对实验有什么影响？如何消除？重氮反应必须在酸性条件下才能