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文档简介
量子点的大小和PEI包被层
对人类间充质干细胞基因转染效率的影响LOGO哈传博2015.04.04目录录目的及背景1方法及步骤2结果与分析3结论与展望4目的及背景目的:提高细胞对量子点的吸收能力和基因转染效率。背景:纳米材料(NPs)应用于基因治疗和生物成像。NPs可经内吞作用进入细胞,也可通过细胞分泌释放到细胞外,因此需要对NPs进行必要的表面修饰。量子点(QDNPs)因为其优越的检测能力和稳定性已经成为潜在的单分子细胞成像标记物。如何改变量子点表面特性是解决问题的关键。方法及步骤实验材料:Linearpolyethylenimine(PEI,25kDa),琼脂糖,甘氨酸,氯化钾,氯化钠,TEMED(N,N,N′,N′-Tetramethylethylenediamine),2-mercaptoethanol,过硫酸铵,单克隆抗体,anti-β-actin溴化乙锭(EtBr),4′,6′-diamidine-2′-phenylindole盐酸盐(DAPI)、二甲亚砜(DMSO)和氯仿羧基化量子点525,605,655.氨基化量子点655.绿色荧光蛋白(GFP)抗体和红色荧光蛋白(RFP)抗体方法及步骤合成QDNPs:PEI(5mg)溶解在HEPES-buffered生理盐水1h60°C。PEI溶液通过一个0.2μm注射过滤器得到PEI过滤液。量子点(0-2nmol/mL)和PEI(5μg/mL)与去离子水(200μl)混合产生QDNPs溶液。最后,将溶液加入到溶解于不同QDs浓度的质粒DNA溶液中缓慢搅拌。结果及分析在这项研究中,使用了几种类型的量子点,包括QD525(5nm),QD565(10nm),QD605(15nm),andQD655(20nm),他们分别表现出独特的颜色如绿色、黄色、红色和粉红色。根据粒径分布,它们还表现出特定的光谱。这些独特的颜色会让基因转染的检测更加灵敏。方法及步骤图1结果及分析随着粒径增大,羧基更多的暴露在外,便于与质粒DNA结合。适当的纳米材料粒径(100–200nm)便于进入细胞。通过凝胶电泳确定QD与PEI最佳的比例。结果及分析体外稳定性测试。结论为在pH=7的条件下,QDNPs可长期稳定存在。在pH=4和pH=9的条件下的不稳
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