有机溶剂生物毒性试验

有机溶剂生物毒性试验

总结有机溶剂不仅具有自身的毒性，还具有与纳测剂相互作用、相互作用和抗相互作用等毒性作用。1实验部分1.1气浴升温振荡及净化设备DXY-2型生物毒性测试仪(中国科学院南京土壤研究所);85-2型恒温磁力搅拌器(上海司乐仪器厂);THZ-82气浴恒温振荡器(江苏金坛仪器厂);DHP-9082电热恒温培养箱(上海一恒科技有限公司);LDZX-40CI型立式自动电热压力蒸汽灭菌锅(上海申安医疗器械厂);不同量程的精密移液器(Thermo公司);SJH型洁净工作台(沈阳市净化仪器厂二分厂);常规玻璃仪器.1.2溶液的配制丙酮、乙醚、四氢呋喃、二甲亚砜、乙醇、硝基苯、氯苯等均为分析纯,用3%NaCl溶液配制相应的系列浓度梯度,待用.1.3接种后培养考察发光菌冻干粉剂的复苏:明亮发光杆菌(斜面菌种的培养:发光菌复苏后,在无菌操作条件下,立即用接种环转接至试管斜面,在20℃下恒温培养24h,然后再转接第二代,20℃下恒温培养24h后于4℃保存,以后每月转接一次.摇瓶菌液的培养:将上面制得的发光菌斜面菌种转接到含有50ml培养液的150ml锥形瓶中,接种量不超过一接种环,于20℃振荡培养至对数生长期备用.工作菌液的制备:吸取一定量培养好的摇瓶菌液于3%NaCl溶液中,充分搅拌,稀释程度以控制空白(由2ml的3%NaCl溶液和0.2ml的工作菌液组成)发光强度在300～900mV为宜.1.4助溶剂对检测化合物毒性的影响溶剂毒性的测定:在预实验的基础上,将待测有机溶剂配成适当的6个浓度梯度,各取不同梯度的溶液2ml加入具塞磨口比色管(ϕ1.5cm×6cm)中,取0.2ml工作菌液于各比色管中,加塞上下振荡均匀,去塞,暴露15min,以2ml3%NaCl溶液作空白对照,测定发光强度.每个浓度梯度设3组平行.验证化合物毒性的测定:以硝基苯和氯苯为验证化合物,研究体系中助溶剂加入与否两种情况下的毒性比较,助溶剂加入量不超过其对毒性实验影响研究中获得的界限浓度.设置受试化合物的6个浓度梯度(包括助溶剂存在和不存在两种情况),各取不同梯度的溶液2ml加入具塞磨口比色管(ϕ1.5cm×6cm)中,取0.2ml工作菌液于各比色管中,加塞上下振荡均匀,去塞,暴露15min,以2ml3%NaCl溶液作空白对照,测定发光强度.每个浓度梯度设3组平行.1.5回归方程的建立及结果毒性效应结果用相对抑光率(%)表示相对抑光率将化合物的浓度和相对抑光率用Origin6.1软件进行回归分析,根据回归方程求出不同相对抑光率对应的化合物浓度值(-lgEC2结果与讨论2.15药物之间的有机溶剂丙酮、乙醚、四氢呋喃(THF)、二甲亚砜(DMSO)、乙醇是5种常用的有机溶剂,其主要毒理数据和理化参数2.25dmso对单一溶剂实验数据的影响进一步研究和比较了这5种常用有机溶剂对发光菌发光强度的不同抑制影响所对应的浓度范围,其结果见表2.从表2可知,各溶剂对发光细菌发光强度抑制率低于15%时,一定的抑制率对应的浓度水平不同.如果相同的抑制率下对应的浓度值越大,则表明该溶剂对发光菌毒性效应的影响越小.表2中DMSO对发光菌的毒性在不同的抑制率下所对应的浓度水平,大都远远高于其他4种溶剂.结合表1和表2数据信息,鉴于DMSO自身的相对较稳定性和对发光菌生物毒性的较小影响,本文选择具有“万能溶媒”之称的DMSO作为助溶剂,以期扩大发光菌生物毒性测试法在对难溶有机化合物毒性鉴别评价中的应用.本实验采用DMSO对发光菌生物毒性效应影响的标准误差不超过10%所对应的浓度作为实际操作中允许的DMSO加入的界限浓度.本研究表明,在DMSO浓度不超过0.20mol·L2.3dmso与光催化染料的反应DMSO的性质较稳定,能够与多种有机化学品相混溶,作为溶剂被广泛用于溶解难溶性有机化合物.本文以溶解度较低的氯苯和硝基苯为例,将其作为试验化合物,检验