薯类种子生产基本知识-薯类种子脱毒的方法与基本原理

《薯类种子种苗生产技术》植物脱毒方法与原理目录CONTENTS一二茎尖培养脱毒热处理脱毒三热处理结合茎尖培养脱毒一、茎尖培养脱毒（一）原理病毒在感染植株上的分布是不均匀的，即老叶片及成熟的组织和器官中病毒含量较高，而幼嫩的及未成熟的组织和器官中病毒含量较低，生长点（约0.1～1.0mm区域）则几乎不含或含病毒很少。一、茎尖培养脱毒（二）茎尖培养的方法1.材料的选取选择具有原品种典型特征、病毒危害较轻的健壮植株采集外植体。一、茎尖培养脱毒（二）茎尖培养的方法2.外植体的表面消毒。3.培养基配制大多数植物的茎尖培养以MS＋NAA0.1～1.0mg/L＋CM（椰乳）5%～10%。也可加0.1~1mg/L的KT和活性炭，进行固体培养或液体滤纸桥培养。一、茎尖培养脱毒（二）茎尖培养的方法4.茎尖剥离与接种在超净台下，先用肉眼剥离外面的幼叶，至0.5cm大小时，再移至双筒解剖镜下，用镊子夹住茎部，用解剖针轻轻剥掉幼叶和叶原基，当剥到看见一个闪亮半圆球的顶端分生组织点，只剩两枚叶原基时，可用解剖刀将微茎尖切下来，然后接到培养基中,注意随切随接，防止变干变褐。一、茎尖培养脱毒（二）茎尖培养的方法5.茎尖培养培养条件为25℃，光照16h，光照强度为2000Lx。微茎尖培养须经历较长的时间，一般要持续2个月以上才能见到茎尖的分化，一般由茎尖直接分化出芽丛。6.病毒鉴定7.脱毒苗的保存8.脱毒苗的繁殖二、热处理脱毒（一）原理利用病毒耐热性差的特点，将植物组织置于高于正常温度的环境中，组织内部的病毒受热以后部分或全部钝化，但寄主植物的组织很少或不会受到伤害。（二）热处理的方法1.温汤浸渍处理适用于休眠器官、剪下的接穗或种植材料的脱毒处理。方法是将材料放在50～55℃的温水中浸渍数分钟至数小时。此方法简便易行，但易造成材料受伤。二、热处理脱毒（二）热处理的方法2.热空气处理适用于生长期植物材料的脱毒处理。设备可采用有照明、通风、调温、给水动能的培养箱。方法是将待处理植株先进行盆栽，成活后移入35～40℃的培养箱中处理几十分钟至几个月。3.热处理脱毒的优点与局限性（1）优点：对设备要求不高，技术简单，短时间可除去病毒。二、热处理脱毒（二）热处理的方法3.热处理脱毒的优点与局限性（2）局限性：●热处理不能脱除所有病毒，此法只对那些球形病毒和线形病毒有效，而对杆状病毒不起作用。●同时同样的处理效果也不一样（具有不确定性）。●对植株有伤害，只有部分植株成活。●有可能钝化植物组织中的阻抗因子，使寄主植物中抗病毒因子难于活化，从而增加无效植株的发生率。三、热处理结合茎尖培养脱毒1.特点：既可缩短热处理时间，提高植株成活率，又可剥离较大的茎尖，提高茎尖培养的成活率和脱毒率。2.适用：大多数植物，并可除去一般培养难以去除的纺锤块茎类病毒《薯类种子种苗生产技术》植物组织培养概述主要内容一二什么是植物组织培养常见的组织培养类型三植物组织培养的特点（一）植物组织培养含义在无菌条件下，将植物的离体生活器官、组织、细胞以及原生质体等，培养在人工配制的培养基上，给于适当的条件，使其长成完整植株的过程。又称为植物无菌培养、离体培养或试管培养。一、什么是植物组织培养（二）如何理解1.无菌条件2.离体生活器官、组织、细胞以及原生质体3.人工配制的培养基4.适当的条件：人工控制的条件5.长成完整植株一、什么是植物组织培养正常污染（三）什么是外植体1.外植体（Explant）指在组织培养中，从活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官等。2.主要包括：器官：根、茎、叶、花、果实、种子等；组织：形成层，分生组织等；细胞：体细胞、性细胞。原生质体一、什么是植物组织培养（一）按培养材料分类1.植株培养2.胚胎培养3.器官培养4.组织培养5.细胞培养6.原生质体培养二、常见的组织培养类型植株培养器官培养组织培养（二）按培养方式分类1.固体培养2.液体培养二、常见的组织培养类型（三）按培养过程分类1.初代培养：指外植体的最初培养。二、常见的组织培养类型取材材料整理材料清洗灭菌-接种-初代培养（三）按培养过程分类2.继代培养：将初代培养得到的培养体移植于新鲜培养基中这种反复多次移植的培养，称为继代培养。二、常见的