真菌教学讲解课件

真菌学1

真菌学1具有典型细胞结构（细胞核、细胞器、细胞壁）细胞壁含几丁质和（或）纤维素无根、茎、叶，不含叶绿素以腐生或寄生方式摄取养料能进行有性生殖和（或）无性繁殖真菌概述真菌(fungus)2具有典型细胞结构（细胞核、细胞器、细胞壁）真菌概述真菌(fu病毒界原核生物界原生生物界真菌界植物界动物界自然生物分类(6界)接合菌门担子菌门子囊菌门半知菌亚门分类:界、门、纲、目、科、属、种3病毒界自然生物分类(6界)接合菌门分类:界、门、纲、目、科、第一节概述真菌分单细胞和多细胞两类：单细胞真菌呈圆形或椭圆形，称为酵母菌（yeast）或类酵母菌（如隐球菌、念珠菌）。多细胞真菌由菌丝和孢子组成，菌丝分枝交织成团形成菌丝体,称丝状菌（filarmentousfungus），并长有各种孢子，这类真菌即一般称为霉菌（Mold)。4第一节概述真菌分单细胞和多细胞两类：4二相性真菌（dimorphic）有些真菌在不同寄生环境和培养条件下出现两种形态，称二相性真菌。即在机体内或含动物蛋白的培养中37℃孵育，呈现酵母型菌落，而在沙保氏培养基上室温或25℃孵育，则形成丝状菌落。

（如球孢子菌、荚膜组织胞浆菌、皮炎芽生菌等。）5二相性真菌（dimorphic）有些真菌在不同寄生环境和培养一、真菌的形态与结构真菌比细菌大几倍至几十倍。细胞结构比细菌复杂，细胞壁缺乏肽聚糖，其坚韧性主要依赖于多聚N-乙酰基葡萄糖构成的甲壳质(Chitin)（75%）和蛋白质（25%）。由于不含肽聚糖，真菌不受青霉素或头孢菌素的作用。真菌的细胞膜与细菌的细胞膜区别在于前者有固醇(sterol)而后者无。细胞内有较为典型的核结构和细胞器。6一、真菌的形态与结构真菌比细菌大几倍至几十倍。6A.单细胞真菌单细胞真菌呈圆形或卵圆形，常见于酵母和类酵母菌，对人类有致病的主要有：新生隐球菌的白假丝酵母菌。这类真菌以出芽方式繁殖，芽生孢子脱落后形成新的独立个体。7A.单细胞真菌单细胞真菌呈圆形或卵圆形，常见于酵母和类酵母菌多细胞真菌能长出菌丝，菌丝延伸分枝，并可以长出孢子。菌丝和孢子的形态不同，常作为鉴别多细胞真菌的重要标志。B.多细胞真菌8多细胞真菌能长出菌丝，菌丝延伸分枝，并可以长出孢子。B.多细(一)、菌丝（hypha）真菌的孢子以出芽方式繁殖，在适宜的环境下由孢子长出芽管，芽管延长呈丝状，称菌丝。菌丝又可长出许多分枝，交织成团称为菌丝体。按功能分营养菌丝气生菌丝生殖菌丝9(一)、菌丝（hypha）真菌的孢子以出芽方式繁殖，在适宜的(一)、菌丝按物理性状分有隔菌丝无隔菌丝按形态分螺旋状球拍状结节状鹿角状梳状10(一)、菌丝按物理性状分101111孢子系真菌的繁殖结构，按形成方式分为有性孢子和无性孢子两种有性孢子无性孢子真菌孢子与细菌芽胞的区别(二)、孢子（spore）12孢子系真菌的繁殖结构，按形成方式分为有性孢子和无性孢子两种(由生殖菌丝末端的细胞分裂或收缩形成，也可在菌丝侧面出芽形成。按形态分：大分生孢子小分生孢子无性孢子(1)分生孢子图示：石膏样小孢子菌的梭状大分生孢子13由生殖菌丝末端的细胞分裂或收缩形成，也可在菌丝侧面出芽形成。由菌丝内细胞直接形成芽生孢子:菌丝体细胞出芽生成（假菌丝）厚膜孢子：菌丝体内胞浆浓缩，胞壁增厚，环境不利形成。环境转好，厚膜孢子又可以出芽生殖。关节孢子：陈旧的培养物中，菌丝细胞变厚，形成长方形的节段，呈链状排列。无性孢子(2)叶状孢子14由菌丝内细胞直接形成无性孢子(2)叶状孢子14芽生孢子、厚膜孢子、关节孢子15芽生孢子、厚膜孢子、关节孢子15菌丝的末端膨大成孢子囊，内含许多小孢子，孢子成熟则破囊而出。多见于毛霉、根霉等。无性孢子(3)孢子囊孢子16菌丝的末端膨大成孢子囊，内含许多小孢子，孢子成熟则破囊而出。真菌孢子形态17真菌孢子形态17181819192020真菌孢子和细菌芽胞的区别真菌孢子细菌芽胞抵抗力不强，60-70短时间杀死强，煮沸短时间不死数目一条菌丝可产生多个孢子一个细菌体只形成一个芽孢作用为繁殖方式之一不是繁殖方式形成位置可在细胞内外形成只在细菌细胞内形成形状形态、色泽多样圆形或椭圆形21真菌孢子和细菌芽胞的区别真菌孢子细菌芽胞抵抗力不强，60-7二、培养特性沙保弱培养基：皮肤癣菌生长较慢，1-4周，腐生性真菌生长较快，<24小时。成分：1%蛋白胨4%葡萄糖2%琼脂pH5.5抑菌剂：放线菌酮和氯霉素前者抑制污染真菌，后者抑制普通细菌22二、培养特性沙保弱培养基：221、酵母型菌落酵母型菌落，为单细胞真菌的菌落形态，菌落光滑湿润，柔软而致密。与一般细菌菌落相似，如新生隐球菌。酵母样菌落（类酵母菌落），部分单细胞真菌在出芽繁殖后，芽管延长不与母细胞脱落，形成假菌丝。假菌丝由菌落向下生长，伸入培养基中，这样的菌落称酵母样菌落，如白假丝酵母菌。231、酵母型菌落酵母型菌落，为单细胞真菌的菌落形态，菌落光滑湿酵母型菌落、酵母样菌落24酵母型菌落、酵母样菌落24是多细胞真菌的菌落形式，由许多疏松的菌丝体构成。菌落呈棉絮状、绒毛状或粉末状，菌落正背两面呈不同颜色。其形态、结构、颜色常作为鉴定真菌的参考。丝状真菌有形成圆形菌落的倾向，所以临床癣类疾病常表现为环形或多环形。2、丝状菌落25是多细胞真菌的菌落形式，由许多疏松的菌丝体构成。菌落呈棉絮状棉絮状菌落、环癣26棉絮状菌落、环癣26大多数真菌营养要求不高，常用沙保氏培养基（SDA）培养。浅部病原性真菌的最适温度为22～28℃，生长缓慢，大多于1～4周出现典型菌落。深部病原性真菌培养在37℃中生长最好，生长较快，经3-4天即长出菌落。27大多数真菌营养要求不高，常用沙保氏培养基（SDA）培养。2真菌菌落类型类型定义特征颜色举例酵母型菌落为单细胞真菌的菌落，形态与一般细菌菌落相似，以出芽形式繁殖光滑、湿润，一般为乳白色新型隐珠菌类酵母型菌落外观似酵母菌落，但可见伸入培养基中的假菌丝，由伸长的芽生孢子形成光滑、湿润，一般为乳白色白色念珠菌丝状菌落为多细胞真菌的菌落，由许多管状、分枝菌丝体组成绒毛状、絮状、粉末状、颗粒状、石膏状。可产生各种色素。毛癣菌28真菌菌落类型类型定义特征颜色举例酵母型菌落为单细胞真菌的菌落1、变异性真菌易发生变异，在人工培养基中多次传代或孵育过久，可出现形态结构、菌落性状、色素及毒力等改变。三、变异性与抵抗力291、变异性三、变异性与抵抗力292、抵抗力真菌对干燥、阳光、紫外线及一般化学消毒剂有一定的耐受力，但充分暴露于阳光，紫外线及干燥情况下大多数真菌可被杀死，且对2.5%碘酒，10%福尔马林都敏感，一般可用福尔马林薰蒸被真菌感染的房间。对热敏感，一般60℃1小时可杀死真菌菌丝和孢子。302、抵抗力真菌对干燥、阳光、紫外线及一般化学消毒剂有一定的耐第二节真菌的致病性与免疫性致病条件1、毒力：具有内毒素样活性的胞壁糖蛋白，烟曲霉、黄曲霉致组织出血坏死。2、粘附力：白假细酵母菌，芽管形成，粘附力增强3、抗吞噬作用：新生隐球菌荚膜可有效抵抗吞噬细胞的吞噬作用。4、改变宿主细胞功能：烟曲霉和白假细酵母菌的热休克蛋白HSP90可与宿主细胞和血清蛋白结合使之功能改变。31第二节真菌的致病性与免疫性致病条件31致病形式1、致病性真菌感染：多见于外源性真菌感染。浅部真菌病如皮癣。2、条件致病性真菌感染：多见于内源性真菌感染。深部真菌病如肺假丝酵母菌病。多见于机体抵抗力下降患者。3、真菌超敏反应性疾病：食入或吸入某此真菌的孢子或菌丝体时引发的各种超敏反应。如荨麻疹、变应性皮炎、哮喘等。32致病形式1、致病性真菌感染：多见于外源性真菌感染。浅部真菌病皮癣、肺真菌病、荨麻疹33皮癣、肺真菌病、荨麻疹334、真菌性中毒症：摄入真菌或其产生的毒素后引起急、慢性中毒。可引起肝肾功能损伤，或造血系统抑制，或神经系统功能紊乱。5、真菌毒素与肿瘤的关系：黄曲霉双呋喃氧杂萘邻酮的衍化物，毒性强，与致癌有密切关系致病形式344、真菌性中毒症：摄入真菌或其产生的毒素后引起急、慢性中毒。1、固有免疫：主要指机体粘膜的天然屏障作用，如果屏障机制不完善或被破坏，则易引发真菌感染。如插管、破损、创伤免疫力低下菌群失调儿童皮脂腺分泌不饱和和不饱和脂肪酸的水平较低，易患头癣；成人手足汗较多，且掌跖部缺乏皮指腺，故易患手癣。免疫性351、固有免疫：主要指机体粘膜的天然屏障作用，如果屏障机制不完头癣和手癣36头癣和手癣362、获得性免疫：因真菌细胞壁厚，所以感染后形成的抗体滴度较低，且很难发挥中和抗体的杀菌作用。但特异性抗体可阻止真菌转为菌丝体从而提高吞噬率，并抑制真菌粘附于体表。主要是靠细胞免疫：抗原刺激→特异性淋巴细胞增殖→释放IFN-γ、IL-2→激活巨噬细胞、NK细胞、CTL细胞→杀伤真菌播散性真菌病多见于T细胞功能抑制。免疫性372、获得性免疫：因真菌细胞壁厚，所以感染后形成的抗体滴度较低真菌的常规检验各种真菌的形态和结构有一定的特殊性,一般可用

直接镜检分离培养两种方法进行鉴定38真菌的常规检验各种真菌的形态和结构有一定的特殊性,一般可一、标本采集及处理浅部真菌：75%乙醇棉球擦拭局部后取皮屑、毛发、指（趾）甲屑等深部真菌：根据病情取痰、血液、脑脊液等39一、标本采集及处理浅部真菌：75%乙醇棉球擦拭局部后取皮屑、方法：二、直接镜检和意义10%KOH皮肤癣菌：湿片，不染色；假丝酵母菌：革兰染色；隐球菌：墨汁染色40方法：二、直接镜检和意义10%KOH皮肤癣菌：湿片，不染色；三、分离培养皮肤、毛发、甲屑等标本经70%乙醇或2%石炭酸浸泡2-3min杀死杂菌，再用无菌生理盐水洗净后接种于沙保弱培养基中。阴道、口腔粘膜标本接种于血平板上。血液标本先增菌，脑脊液取沉淀物接种于血平板上。疑为假丝酵母菌，需先做芽管生成试验。41三、分离培养皮肤、毛发、甲屑等标本经70%乙醇或2%石炭酸浸三、分离培养培养基：培养基用途沙保弱氏培养基放线菌酮-氯霉素琼脂玉米粉聚山梨酯-80琼脂马铃薯葡萄糖琼脂尿素琼脂心脑浸液葡萄糖血琼脂真菌的常规培养同上观察白假丝酵母菌的厚膜孢子观察真菌菌落色素，用于鉴别用生化反应鉴别真菌（红色与石膏样癣菌）深部真菌培养（二相性真菌）42三、分离培养培养基：培养基用途沙保弱氏培养基真菌的常规培养4三、分离培养培养方法

1、直接培养法

2、试管培养

3、大培养

4、小培养：（1）玻片培养（2）郭可大钢圈小培养法43三、分离培养培养方法43真菌的鉴定主要有生化反应、芽管形成、厚膜孢子生成、免疫学及分子生物学试验等。1、糖醇类发酵试验：五糖2、同化碳源试验：3、同化氮源试验：4、明胶液化试验：5、尿素分解试验：6、测定淀粉样化合物：7、牛乳分解试验：44真菌的鉴定主要有生化反应、芽管形成、厚膜孢子生成、免疫学及分大部分真菌基本都是通过孢子传播，因此阻断孢子的传播途径，破坏孢子的萌发环境犹为重要。表皮破损、潮湿温暖环境、直接或间接接触。（黄曲霉的毒素作用）真菌感染的预防45大部分真菌基本都是通过孢子传播，因此阻断孢子的传播途径，破坏真菌感染的治疗局部用药（表浅局部感染）全身用药（深部或全身感染）皮肤科用药：5%硫磺软膏、咪康唑软膏、克霉唑软膏、0.5%碘伏口服抗真菌药：二性霉素、制霉菌素、咪康唑、酮康唑、氟康唑、伊曲康唑等46真菌感染的治疗局部用药（表浅局部感染）46第二节常见病原性真菌依据侵犯部位和临床表现分为

浅部感染真菌深部感染真菌

47第二节依据侵犯部位和临床表现分为

浅

一、浅部感染真菌

部位:寄生或腐生于角蛋白组织

（表皮角质层、毛发、甲板）分类：皮肤癣菌角层癣菌感染源：接触患者或患畜接触染菌物体

48一、浅部感染真菌部位:寄生或腐生于角蛋白组织（一）皮肤癣菌

疾病：皮肤癣（tinea），手足癣最多见三个属：表皮癣菌属（pidermophyton）

毛癣菌属（Trichophyton）

小孢子癣菌属（Microsporum）

49（一）皮肤癣菌疾病：皮肤癣（tinea），手足癣最多见表皮癣菌属（Epidermophyton）致病菌种：絮状表皮癣菌（E.floccosum）侵犯部位：侵犯表皮、指甲，不侵犯毛发疾病：体癣、足癣、手癣、股癣和甲癣形态学特征：大分生孢子：侧生或顶生，棍棒状，壁薄小分生孢子：无50表皮癣菌属（Epidermophyton）致病菌种：絮状表皮絮状表皮癣菌引起的感染51絮状表皮癣菌引起的感染51毛癣菌属（Trichophyton）致病菌种：红色毛癣菌（T.rubrum）石膏样毛癣菌（T.gypseum）侵犯部位：侵犯表皮、指甲、毛发疾

病：体癣、足癣、手癣、股癣、甲癣、发癣形态学特征：大分生孢子：细长、薄壁、棒状、两端钝圆小分生孢子：侧生、散在，呈葡萄状52毛癣菌属（Trichophyton）致病菌种：红色毛癣菌（T小孢子菌（Microsporum）致病菌种：铁锈色小孢子菌（M.ferrugineum）犬小孢子菌(M.

canis)

石膏样小孢子菌(M.

gypseum)侵犯部位：毛发，皮肤疾病：头癣、体癣形态学特征：大分生孢子：厚壁，梭形 小分生孢子：卵圆形，侧枝末端53小孢子菌（Microsporum）致病菌种：铁锈色小孢子菌（犬小孢子菌菌落犬小孢子菌大分生孢子（400×）54犬小孢子菌菌落犬小孢子菌大分生孢子（400×）54石膏样小孢子菌分生孢子（400×）

55石膏样小孢子菌分生孢子（400×）55

皮肤癣菌的种类、侵犯部位及传染来源真菌种类种数感染部位传染源皮肤毛发甲板人动物表皮癣菌属1+-+絮状表皮癣菌无小孢子菌属1++-奥杜安小孢子菌犬小孢子菌石膏样小孢子菌毛癣菌属20+++石膏样毛癣菌红色毛癣菌石膏样毛癣菌56皮肤癣菌的种类、侵犯部位及传染来源种数感染部位传染源皮肤毛（二）皮下感染真菌种类：着色真菌孢子丝菌侵入途径：外伤感染部位：局部，也可扩散至周围组织扩散：着色真菌：血行或淋巴管孢子丝菌：淋巴管疾病：着色真菌病深部组织——慢性感染中枢神经系统——脑内感染

57（二）皮下感染真菌种类：着色真菌57腐生性、双相型培养： 沙保弱培养基（25℃）：灰褐色皱膜状菌落形态特征：分隔菌丝，成群梨形小分生孢子感染途径：创伤皮肤接触染菌土壤或植物经口或呼吸道侵入疾病：孢子丝菌性下疳（sporotrichotic

chancre）申克孢子丝菌58腐生性、双相型申克孢子丝菌58深部真菌：侵犯表皮及其附属器以外的组织和器官病原性真菌或条件致病性真菌发病率增加：抗生素皮质类固醇激素免疫抑制剂抗肿瘤药物器官移植介入性治疗二、深部感染真菌59深部真菌：二、深部感染真菌59白假丝酵母菌（白色念珠菌）

假丝酵母菌属中10个种有致病性。白假丝酵母菌是本属最常见的致病菌，皮肤、黏膜及内脏的白假丝酵母菌病（candidiasis)。60白假丝酵母菌（白色念珠菌）

假丝酵母菌属中10个生物学性状特征

1.形态：菌体圆形或卵圆形

2.方式繁殖：芽生

3.组织内：芽生孢子及假菌丝培养时：厚膜孢子（本菌特征之一）

4.菌落：类酵母型菌落

5.营养要求：不高61生物学性状特征61白假丝酵母菌菌落62白假丝酵母菌菌落62致病性条件致病菌，正常存在于口腔、上呼吸道、肠道与阴道黏膜，菌群失调或抵抗力降低时可患白假丝酵母菌病。所致疾病：

1.皮肤、黏膜感染

2.内脏感染

3.中枢神经系统感染63致病性63分布：鸽粪；人类体表、口腔、粪便形态特征：圆形的酵母样细胞外周有一层肥厚的胶质样荚膜繁殖方式：芽生，无假菌丝菌落：酵母型菌落荚膜多糖：A、B、C、D四个血清型临床分离株：A、D型新生隐球菌（Cryptococcusneoformans）64分布：鸽粪；人类体表、口腔、粪便新生隐球菌64致病性

隐球菌病（cryptococcosis）

感染