第三代microbfame全自动酶免分析系统的应用

第三代microbfame全自动酶免分析系统的应用

近年来，许多组织先后引入了全流程酶免费分析系统（elisa），以进行酶联免疫吸附试验（elisa）。全流程酶免疫检测设备的处理速度、精度和重复性均优于人工操作。我站于2003年引进瑞士哈美顿公司生产的第三代MicrolabFAME全自动酶免分析系统(以下简称“FAME系统”),FAME系统克服了手工操作的局限性,避免了人为因素带来的偶然误差,使试验的精密度、重复性、灵敏度、特异性有所提高。几年来,从使用情况看,仪器的各种性能指标均符合实验要求。在使用中发现,除了检测试剂本身的稳定性、灵敏度和特异性等因素影响检测结果外,还有很多使用和操作方面的问题。仪器使用过程中出现的故障主要是由于对仪器的性能掌握不熟练及操作不严谨造成的。现将FAME系统常见故障及排除方法简介如下。1fame的应用酶免试验全过程全自化的意义,并非仅仅限于降低劳动强度、减少人为的误差。根据已发表的FAME系统评价研究报告,人们发现:全自动酶标分析系统可以普遍地、显著地提高酶免试验的灵敏度、特异性和精密度。国内学者用FAME系统对献血者进行血液筛查试验,意在通过标准化、自动化的操作手段及操作过程,提高血液检测的质量。以卫生部I临床检验中心质控血清及质控血清盘为试验对象,应用FAME系统的试验结果与常规酶免设备试验结果相比,HBsAg、抗-HCV试验的灵敏性分别提高了1.3%和5.0%,特异性分别提高了4.O%和83%,精密度分别提高了2.0%和2.24%。第三代全自动酶免分析系统的基本特征是采用多任务、多通道,完全实现平行过程处理。FAME系统在硬件上采用了综合模块化设计,广泛采用液体水平检测(LLD)技术、体积与重量传感、光学位置传感等实现了真正全过程控制(TPC),特别是专利的洗板液体传感器,确保了最佳洗板效果,是保障试验特异性的关键。在软件与功能上,目前仍唯一的全自动GMP/GLP规范符合系统,如全面的系统跟踪记录(Traceability)与系统追溯(Trackability),标本/试剂加样校验(Sampleverification)及“自由任务管理”实现随时增加检测板。1997年费米获得美国FDA许可,用于酶免筛查实验室。2fame系统的常见故障和排除方法2.1酶标板的排除主要原因是酶标板不规则,特别是国产酶免试剂盒的酶标板。排除方法是:进板前要仔细检查酶标板的外形是否规则,位置摆放是否正确。一旦卡板不仅实验失败,而且损害仪器设备。2.2酶标板扫描的排除主要原因是:酶标板条不完整或透视镜表面不干净。排除方法是:(1)酶标板扫描前必须完整。(2)每次维护设备时要观察透视镜表面是否干净,若有灰尘或纤维,必须擦拭干净。2.3机组件操作成功,确定吸液接头类型,把好运行环环板主要原因是:(1)样品抗凝效果不佳,有纤维蛋白存在,使洗板机吸液针头堵塞。当自动冲洗不成功后,设备自动锁定洗板机组件,酶标板退出。(2)实验编程存在缺陷,相邻洗板间隔时间太短,时间表拥挤。排除方法是:(1)检查加样中有无血凝块,发现后用针头挑出。如洗板机吸液针头堵塞发生在第一次洗板,应快速将酶标板取出,手工洗板后再放入孵育槽中。用细通丝疏通吸液针头。(2)实验编程时要充分考虑实验中所需洗板的次数及相邻洗板间隔时间不要太短,时间表安排要合理。2.4洗液的使用和排除主要原因是:花板(指酶标实验显色后颜色差别较大)除本底高外,与洗液配置浓度及洗液的专项使用有关,特别HBsAg检验用板,灵敏度高,易花板。另一原因与退板相同,就是洗板机针头堵塞,吸不干净,导致洗板不好而致花板。排除方法是:准确配置洗液浓度,使用专项厂家的试验用洗液,不要混用。洗板机针头堵孔问题处理同上。3日常操作中的注意事项为保证分析结果的准确性和仪器的正常运行,延长仪器的使用寿命,也为保证日常工作的顺利完成,必须注意在日常操中的一些细节问题。3.1选择冲洗液制备主要是指在开关机时做的管道冲洗,须用多量蒸馏水和指定冲洗液进行冲洗,此步骤虽然简单,但不能省略,因其可保证每条工作通道的顺畅,对于试验的顺利进行及延长仪器的寿命都尤其重要。3.2留置吸干由于工作繁忙,一般在开机做冷启动(即初始化)时的过程观察往往被忽略。不过,仍然建议能尽量留意包括:进板架和主传输带移动的声音有无异样(提示有无松动或有无异物卡位),预洗板时有无吸干和放满水(提示针孔有无堵塞)等情况,可及早发现问题及早解决。3.3项目编程的基本时间如何做到充分利用仪器,争取时间,尽量缩短板与板之间等待的时间(包括减少灰带的出现),如何进行项目编程则显得至关重要。在编程时,应注意统筹安排,充分调动仪器的时间和空间,减少出现仪器闲置的情况,从而缩短等待时间,提高工作效率。3.4加剩余液体注意洗液桶的清洁问题,当天用完必须倒干桶中剩余的液体,避免长菌,如出现漏水或不出水现象,则停止使用。洗站应尽量保持干燥,特别在关机后,必须用抹布抹干上面的水渍。3.5fame系统的维护试剂是进行试验的基本条件,它的质量直接影响到最后的试验结果。所以,应注意以下三点:(1)定期更换试剂槽,一般一周一次;(2)每天使用前应观察槽中的试剂有无长菌、发霉的现象,如有,应马上更换;(3)使用后应及时将试剂盘放人冰箱保存。FAME系统准备工作较繁琐,处理过程相对较长,设备程序紧凑、连贯性强,每一过程的失败,均影响下一步操作,所以发生故障的机率较大,往往来不及处理而造成实验终止,