内外合治对甲状腺激素和甲状腺病理变化的影响

内外合治对甲状腺激素和甲状腺病理变化的影响

甲状腺功能障碍（（eg）是一种常见的自身免疫性疾病，属于中医学的“iii级病”范畴。中医治疗“瘿病”,历史悠久。目前中医对本病的治疗方法不断创新,疗效不断提高。内外结合等综合疗法治疗甲亢具有较大的优势,将是未来临床甲亢治疗的趋势。在前期,笔者已根据文献回顾性报道及临床实践前瞻性调查确立了甲亢的主要证型,并拟定了内外合治的方药运用于临床,取得较好疗效。在此基础上,为进一步探讨其药效学机理,笔者以大鼠血清T3、T4、FT3、FT4、TSH及甲状腺病理变化作为检测指标,观察了内外合治对甲亢大鼠的治疗作用。1材料和方法1.1材料表面1.1.1动物健康SD大鼠,清洁级,雌雄各半,体重(200±20)g,由长沙市开福区东创实验动物中心提供。1.1.2生药/ml的制备甲亢方:黄芪30g,炒枣仁10g,生地15g,锻牡蛎20g,白芍10g,玄参10g,夏枯草10g,柴胡10g,麦冬10g,浙贝6g,丹参10g,莪术10g。上述药物购自湖南中医药大学杏林药号,共煎两次,合并两次滤出的药液,过滤浓缩成1.35g生药/mL,4℃储存备用。甲亢平膏:雷公藤、夏枯草、浙贝、莪术、蒲公英、玄参、黄药子等,由湘潭飞鸽药业有限公司提供技术支持并制成贴膏备用。丙基硫氧嘧啶:RIEMSERArzneimittelAG(Germany),批号608690,进口药品注册证号H20060262。优甲乐:徳国默克公司,批号3985701,进口药品注册证号H20060091。1.1.3免疫放射试剂盒游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)放免试剂盒、游离甲状腺素(FT4)试剂盒、三碘甲状腺原氨酸(T3)放免试剂盒、甲状腺素(T4)放免试剂盒促甲状腺激素(TSH)免疫放射试剂盒,均购自北京福瑞生物工程公司,编号:200705。GC1200放射免疫γ计数器,中国科技大学中佳光电公司生产;低速离心机,LD4-2型,北京医用离心机厂生产。1.2方法1.2.1动脉内固定术-检测腺激素参照文献方法,将60只大鼠称重标记,随机分为正常组、模型组、甲亢平膏组、甲亢方组、西药对照组、内外合治组(每组10只)。大鼠每日按75μg/100g体重灌服优甲乐(左甲状腺素钠)进行造模,计21天。第8天起,甲亢平膏组和内外合治组大鼠以10%的Na2S颈前脱毛,颈前贴以甲亢平膏(每日更换1次),同时甲亢方组和内外合治组大鼠每日按13.5g生药/㎏体重灌服甲亢方;西药对照组大鼠每日按20.25mg/100g体重灌服丙基硫氧嘧啶。正常组灌服等容量生理盐水。各组大鼠每周称体重1次,根据体重调整药物剂量。21天后,各组大鼠空腹称体重,颈动脉放血处死。2mL血注入干净试管,离心,分离血清,检测甲状腺激素;摘取甲状腺并称重,甲状腺以10%福尔马林固定、常规切片、HE染色,进行病理学观察。1.2.2单位单位定义用分析天平称取甲状腺重量后,按甲状腺重量/体重计算甲状腺指数,单位为×10-2mg/g;甲状腺病理学改变用光学显微镜观察。用放射免疫法测定血清T3、T4、FT3、FT4含量,用免疫放射法测定血清TSH含量,具体操作按药盒说明书进行。1.2.3规划发展差2x2应用SPSS13.0统计软件,所有数据均用平均值+标准差(ˉx+s)(x¯+s)表示。两组间均数比较用t检验,多组间均数比较用方差分析。2结果2.1样品总嘴唇上的情况甲亢模型组实验第5天开始,出现烦躁不安、活动频繁、饮水量多;鼠笼内潮湿,排泄物增多。至实验结束时,多数有震颤现象,全部明显消瘦、毛无光泽。其他各治疗组大鼠行动无力、烦躁、易激惹等现象均有不同程度的减轻,体重降低程度较模型组大鼠略有减少,笼内较干燥,排泄物较少。2.2对大鼠血清ct、t4、ft4的影响见表1。从表1可以看出,与正常对照组比较,甲亢模型组血清T3、T4、FT3、FT4值显著升高(P<0.01);血清TSH值显著降低(P<0.01),说明大鼠实验性甲亢模型的建立是成功的。与甲亢模型组比较,各治疗组的血清T3、T4、FT3、FT4均显著降低(P<0.01);血清TSH均显著升高(P<0.05),其中内外合治组具有极为显著差异(P<0.001)。甲亢方内服组与甲亢平外治组组间比较,差异无统计学意义,而内外合治组与该两组分别对比则均有显著差异(P<0.01),但与西药组及正常组分别对比则差异无显著性,提示内外合治能够协同增效,具有良好的改善甲亢模型大鼠甲状腺功能的作用。2.3甲烷大鼠脏器正常运行指标与正常组比较,模型组大鼠甲状腺指数明显增高(P<0.01)。与甲亢模型组比较,甲亢平膏组、西药对照组和甲亢方组大鼠甲状腺指数有所降低(P<0.01)。与西药对照组比较,内外合治组大鼠甲状腺指数明显降低(P<0.01)。内外合治能明显减少甲亢大鼠甲状腺指数,有效抑制甲亢大鼠甲状腺肿大。见表2。2.4合治组与治疗组合组织病理结构的比较表1正常组甲状腺滤泡大小基本一致,呈圆形或椭圆形,内充深红色染胶质,滤泡胶质染色均匀,滤泡间质无水肿,上皮细胞无增生。内外合治组甲状腺组织病理结构基本同正常组。甲亢模型组甲状腺滤泡有明显肿大,滤泡大小不一,增生变化明显,少数滤泡胶质稀薄甚至缺失,滤泡壁上皮细胞明显受压,可见上皮细胞增生及组织被膜和血管侵及,有的滤泡呈多层分布;甲肿模型组滤泡破坏,组织有血管侵犯。甲亢平膏组、甲亢方组和西药组可见少数甲状腺滤泡增生,部分滤泡间质水肿,其它甲状腺组织结构基本同正常组。见图1～6。3甲烷平膏—讨论甲状腺功能亢进症(甲亢),目前现代医学对其发病机制尚未完全阐明。一般认为本病以遗传易感为背景,在感染、精神创伤等因素作用下,诱发体液免疫和细胞免疫功能紊乱。FT3、FT4是循环血中甲状腺激素的活性部分,二者不受血液中TBG和含碘杂质的影响而保持相对恒定,反映甲状腺功能状态的敏感性和特异性均明显超过T3和T4。目前临床上FT3、FT4诊断甲亢优于T4、T3;TSH是诊断原发性甲亢符合率较高的初筛性指标。笔者参照文献方法制作的甲亢大鼠模型,其症状、体征与甲亢的临床表现基本吻合;模型组FT3、FT4显著升高,FSH显著降低,符合甲亢的临床诊断标准。中医认为该病的发生主要与情志、体质、饮食等因素有关。《诸病源候论》云:“瘿者,忧患气结所生”。正气不足或外邪入侵,以致气滞、血瘀、痰凝相互搏结而成瘿病。邪实正虚是其病因病机及疾病演变特点。本虚者以气、阴虚为主,标实者多为肝郁火炽痰凝血瘀。中医对于瘿病的治疗,主要是理气解郁、活血祛瘀、化痰软坚、清热化痰等治法。针对甲亢以气阴两虚为主,气滞痰凝血瘀壅结颈前而肿大,内服益气滋阴、化痰散结、理气化瘀方以缓解全身症状,外敷膏药以消痈肿,为恰当之法。甲亢方由黄芪、生地、锻牡蛎、柴胡等药组成,具有滋阴益气、化痰散结、疏肝理气之功效。方中重用黄芪伍白芍以益气滋阴,共为君药。夏枯草清肝火散郁结,牡蛎软坚散结,浙贝清热化痰,合酸枣仁、麦冬宁心安神,并可助君药补益气阴,共为臣药。辅以元参、丹参凉血解毒散结,柴胡助夏枯草直泻肝火,配莪术则行气散瘀,俱为佐使。全方标本兼顾,扶正祛邪,共奏益气养阴、理气散结之功。现代药理学研究已证明,上述主要药物具有调节内分泌,增强免疫及改善微循环等作用。甲亢平膏方药由雷公藤、夏枯草、浙贝、莪术、蒲公英、玄参、黄药子等组成,具有滋阴清热、活血散结、化痰祛瘀的作用。贴敷于大鼠甲状腺颈前的甲亢平膏,其有效成分可直接透过皮肤到达甲状腺组织发挥改善甲状腺功能的作用,又可进入血液循环而调节机体全身免疫功能及甲状腺功能。本实验结果表明,从各指标来进行比较,内外合治都能显著协同增效,其疗效优于两法单用,这与临床经验相符。实验同时选用丙基硫氧嘧啶进行平行对照研究,两组之间差异无统计学意义,提示内外合治对甲亢大鼠有与丙基硫氧嘧啶相似的治疗作用。推测其作用机制,可能与多途径改善机体免疫监护和调节功能,促进免疫监护的正常化有关。目前单纯西药治疗尚存在效果不巩固