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文档简介
第10讲
│动物细胞工程第10讲动物细胞工程第1页考点整合
考点一动物细胞培养
1.培养基:选取
_______培养基,通常含葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和__________等。
2.取材:大都取自_________或__________________器官或组织。
第10讲
│考点整合液体
动物血清
动物胚胎
出生很快幼龄动物第2页3.过程:第10讲
│考点整合
4.应用:________________生产;移植皮肤细胞培养;检测__________;医学研究。
考点二动物细胞培养1.促融剂:除物理法和化学法外,还惯用________。
蛋白质生物制品
有毒物质
灭活病毒
第3页
第10讲
│考点整合2.过程:两种动物细胞杂种细胞。
3.主要用途:制备____________。
考点三单克隆抗体
1.制备:
单克隆抗体
第4页
2.单克隆抗体(1)特点:化学性质______,_______强,_______高。
(2)应用:单抗诊疗盒;__________。第10讲
│考点整合单一
特异性
灵敏度
生物导弹
关键点探究►探究点一动物细胞培养、植物组织培养培养、无土栽培第5页第10讲
│关键点探究项目植物组织培养动物细胞培养无土栽培培养时处理无菌、离体无菌、用胰蛋白酶处理使组织细胞相互分散开
无需灭菌,植物幼苗培养基成份普通固体培养基:矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素和水液体培养基:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清
矿质元素、水第6页第10讲
│关键点探究项目植物组织培养动物细胞培养无土栽培培养条件适宜温度、pH、氧、光等适宜温度、pH、氧等
适宜温度、pH、氧、光等过程离体细胞、组织和器官幼年胚胎或出生很快幼龄动物器官或者组织→原代培养→传代培养→细胞群→细胞株→细胞系植株生长发育续表
第7页第10讲
│关键点探究续表
项目植物组织培养动物细胞培养无土栽培能否培养成个体能不能能应用举例快速繁殖培育无病毒植株、生产药品、制造人工种子、培育转基因作物等大规模生产蛋白质类产品,如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等;皮肤移植;检测有毒性物质温室栽培无公害蔬菜第8页
[易错易混点](1)植物组织培养与动物细胞培养过程中都进行有丝分裂,都是无性繁殖,都可称克隆,都不包括减数分裂,其中要注意是:培养花粉是有性生殖。(2)植物组织培养可产生新个体,表达全能性;动物细胞培养产生大量细胞,不形成新个体,故不能表达全能性。(3)动物细胞培养在检测有毒物质毒性时检测指标是观察标本中发生染色体变异细胞占所培养细胞百分比。(4)胰蛋白酶含有分解组织细胞间质中胶原蛋白,使组织分散成单个细胞,方便与培养液充分混合作用,还含有定时使细胞从瓶壁上脱离作用,目标是防止“接触抑制”,方便传代培养。第10讲
│关键点探究第9页
(5)植物组织培养和动物细胞培养都需人工条件下无菌操作,都是合成培养基,都需适宜温度、pH等条件。例1
[·浙江卷]以下关于动物细胞培养叙述,正确是(
)A.培养保留接触抑制细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B.克隆培养法培养过程中多数细胞基因型会发生改变C.二倍体细胞传代培养次数通常是无限D.恶性细胞系细胞可进行传代培养例1
D
[解析]本题考查动物细胞培养和克隆相关知识,意在考查考生对动物细胞培养了解。因为接触抑制,培养动物细胞在培养瓶壁上只能形成单层细胞,故A错误;第10讲
│关键点探究第10页克隆形成细胞群,因为起源于一个共同细胞,故基因型相同,故B错误;二倍体细胞通常为有限细胞系,传代培养次数通常是有限,故C错误;恶性细胞系属于连续细胞系,可进行传代培养,故D正确。
[点评]处理此题关键要把正常细胞与癌细胞相关特征区分开。
第10讲
│关键点探究[·湖北八校联考]利用以下各种细胞工程技术培育生物新品种,操作过程中能形成愈伤组织是(
)①植物组织培养②植物体细胞杂交③动物细胞培养④转基因植物培养⑤克隆技术A.①②③④
B.①②④C.①③④⑤D.①②④⑤变式题第11页B
[解析]动物细胞培养不能取得愈伤组织产生新品种;克隆技术包含各种无性生殖伎俩,如扦插等过程,不能形成愈伤组织。
第10讲
│关键点探究►探究点二植物体细胞杂交与单克隆抗体制备项目植物体细胞杂交
单克隆抗体制备理论基础(原理)细胞膜流动性、杂种细胞含有双亲细胞遗传物质、细胞全能性细胞膜流动性、杂种细胞含有双亲细胞遗传物质,细胞增殖第12页第10讲
│关键点探究项目植物体细胞杂交
单克隆抗体制备融合前处理酶解法去除细胞壁(纤维素酶、果胶酶)
注射特定抗原,处理正常小鼠细胞,获取效应B细胞促融①物理法:离心、振动、电刺激等②化学法:聚乙二醇(PEG)①物化法:与植物细胞融合相同②生物法:灭活仙台病毒续表
第13页第10讲
│关键点探究续表
项目植物体细胞杂交
单克隆抗体制备过程第一步:原生质体制备第二步:原生质体融合,再生出细胞壁第三步:杂种细胞筛选与培养第四步:杂种植株诱导与判定第一步:正常小鼠免疫处理第二步:动物细胞融合(物、化、生法)第三步:杂交瘤细胞筛选与培养第14页第10讲
│关键点探究续表
项目植物体细胞杂交
单克隆抗体制备意义和用途①克服远缘杂交不亲和障碍,大大扩展杂交亲本组合范围②克服有性杂交母系遗传,取得细胞质基因杂合子,研究细胞质遗传①制备单克隆抗体②诊疗、预防疾病:如:生物导弹治疗[易错易混点](1)制备单克隆抗体需要三次筛选。第一次是筛选出效应B第15页细胞。第二次是筛选出杂种细胞,将效应B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合杂种细胞选择出来,在效应B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合之后,有三种情况:效应B淋巴细胞与效应B淋巴细胞融合、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合、效应B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合。第三次是筛选出能产生特定抗体杂种细胞。
(2)利用抗体能与抗原特异性结合特点,可将抗癌药品与抗体结合在一起,使药品能够直达癌细胞,增强用药针对性,降低用药量,减轻副作用。(3)原生质体融合结束标志是再生出新细胞壁,动物细胞融合结束标志是核融合。(4)若植物细胞A、B体细胞都是二倍体,体细胞中染色第10讲
│关键点探究第16页体数分别为2m和2n,则杂种细胞中染色体数为2m+2n,称为异源四倍体,该生物体与植物A、B不是同一物种。(5)利用植物体细胞杂交方法培育作物新品种过程中,其遗传物质传递不遵照孟德尔遗传规律,因为生物在进行有性生殖时才遵照孟德尔遗传规律,而植物体细胞杂交过程不属于有性生殖。第10讲
│关键点探究例2
[·赣榆模拟]传统遗传学认为,不一样物种之间存在生殖隔离屏障,不能杂交产生新物种,而且认为两个体细胞之间不能杂交融合为一个细胞。伴随当代生物科技发展,细胞工程细胞融合技术处理了这个难题,而且得到了广泛应用。以下是两个经典实例,依据材料分析回答:第17页第10讲
│关键点探究图10-1Ⅰ.单克隆抗体在医疗、诊疗等方面发挥着越来越主要作用。科学家设计了一个用被免疫B淋巴细胞制备单克隆抗体试验,图示是其试验流程,请回答:(1)制备单克隆抗体时,选择免疫B淋巴细胞原因是______________________________________________________________。
(2)怎样判断经过①后细胞就是杂交瘤细胞?_______________________________________________________________________。第18页第10讲
│关键点探究(3)②过程如在体外培养,则需要环境条件是(要求答5项)__________________________________________________。(4)单克隆抗体优点是______________________________。
Ⅱ.如图10-2所表示为科学家利用细胞工程培育“白菜—甘蓝”杂种植株过程,据图回答:图10-2第19页第10讲
│关键点探究(1)C表示______________;杂种细胞D生成标志是形成________;由D形成E过程称为________。(2)图中A、B制备,需要除去细胞壁,此时要用到________酶;诱导动植物细胞融合惯用一个化学诱导剂是________。(3)与动物细胞培养基相比较,植物细胞培养基要添加植物激素,目标是_______________________________________。
例2
Ⅰ.(1)每一个(效应)B淋巴细胞只能分泌一个特异性抗体(2)在特定选择性培养基上只有杂交瘤细胞才能存活(3)无菌、无毒,营养充分,温度适宜,pH适宜,氧气充分(4)特异性强,灵敏度高,并可大量制备Ⅱ.(1)融合原生质体细胞壁脱分化(去分化)第20页第10讲
│关键点探究(2)纤维素酶和果胶聚乙二醇(PEG)(3)诱导细胞分裂和细胞分化[解析]制备单克隆抗体是动物细胞融合一个应用实例,制备原理是利用骨髓瘤细胞无限增殖能力和B淋巴细胞受到抗原刺激后只能分泌一个特异性抗体特征。单克隆抗体最主要优点是特异性强,灵敏度高,并可大量制备。植物体细胞杂交是将不一样植物体细胞,在一定条件下融合形成杂种细胞,并培育成新植物体。在杂交之前,要取得含有活力原生质体,所以要用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁。植物细胞培养基要添加植物激素,诱导细胞分裂和细胞分化。
[点评]本题以图形式展示了单克隆抗体和体细胞杂交制备过程,考查了这两项工程基本知识。处理此题关键是熟练掌握相关基础知识。
第21页第10讲
│关键点探究A.不一样植物精子与卵细胞融合B.不一样植物原生质体融合C.完整两个体细胞融合D.植物花粉细胞两两融合变式题植物体细胞杂交是利用不一样物种两个体细胞融合成为一个杂种细胞过程。该过程是指(
)B
[解析]植物体细胞杂交对象是体细胞,杂交时,因为细胞壁会妨碍体细胞杂交,应首先去除细胞壁。去除细胞壁后部分就是原生质体,因而也称为植物原生质体融合。
第22页►探究点三胚胎工程第10讲
│关键点探究项目原理过程用途核移植细胞核全能性(属于无性生殖)克隆哺乳动物以快速繁殖良种、特异、濒危动物第23页第10讲
│关键点探究续表
项目原理过程用途胚胎分割移值细胞全能性(属于有性生殖)处理动物和人不育问题;提升良种家畜繁殖能力[易错易混点]
(1)胚胎分割技术是把一个胚胎细胞分成2组或多组,经过第24页第10讲
│关键点探究短暂培养使其修复、发育后,再一同或分别移植到不一样代孕母体中妊娠并产生多胎技术,这种技术又称作人工同卵多胎技术。胚胎分割可成倍增加胚胎数量,是一个快速繁殖种畜方法,属于动物无性繁殖或克隆方法之一。
(2)胚胎分割技术材料选择:发育良好、形态正常桑椹胚或囊胚。囊胚期分割要求:内细胞团均等分割,以免影响分割后胚胎恢复和深入发育。
例3
图10-3所表示为用两栖动物卵所做试验图解,据图回答以下问题:
第25页第10讲
│关键点探究图10-3第26页第10讲
│关键点探究
(1)蝌蚪肠上皮细胞核中含有青蛙发育所需________,重新组合细胞相当于蛙________,经过________和________形成组织和器官。本试验结果说明____________含有全能性。
(2)图中A过程采取技术伎俩称作________技术。假如用生物技术使番茄和马铃薯体细胞融合,首先要取得________,其方法是________,然后诱导____________。要将其融合形成细胞培养成植株,要用______________技术。从理论上讲用融合后细胞培育出“番茄—马铃薯”植株是________(填“可育”或“不可育”)。第27页第10讲
│关键点探究(3)若图10-4所表示过程用于制备干扰素,A为小鼠________细胞,在取得此细胞之前,应给小鼠注射对应抗原,此时B为________细胞。从A、B到C过程中,可形成3种类型C细胞(假设仅考虑两个细胞融合)。若该过程用于制备单克隆抗体,应筛选出符合要求D细胞,方法是用________培养基培养,筛选出D细胞称为________,惯用细胞培养方法有体外培养和体内培养两种:前者是在________培养基中培养。
图10-4第28页第10讲
│关键点探究
例3
(1)全部基因(全部遗传物质)受精卵细胞分裂分化动物细胞核(2)核移植原生质体酶解法原生质体融合植物组织培养可育(3)效应T淋巴骨髓瘤选择(或有对应抗原)杂交瘤细胞(或杂种细胞)液体[解析](1)蝌蚪肠上皮细胞由受精卵发育而来,含有青蛙发育全部基因(遗传物质),重组细胞相当于一个受精卵,受精卵要经过分裂和分化才能形成组织和器官,本试验说明了动物细胞细胞核含有全能性。(2)图中A表示核移植技术;假如要使番茄和马铃薯细胞融合,首先要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁取得原生质体,然后用聚乙二醇诱导原生质体融合,融合后杂交细胞要经过植物第29页第10讲
│关键点探究[点评]胚胎工程许多技术都是在了解哺乳动物自然条件下受精和早期胚胎发育基础上实现。比如:哺乳动物体内受精和胚胎发育都是在自然条件下特点和规律,人们正是在认识了这些自然规律基础上,在体
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