KHB ST-360酶标仪标准操作程序

KHBST-360酶标仪标准操作程序1目的通过对ST-360酶标仪的规范操作，以获取准确的结果，使其处于良好的工作状态，并保证操作人员的人身健康与安全。2仪器简介、工作原理2.1基本原理ST-360酶标仪依据了比色法原理用于检测体内微量的特异性抗原和抗体。酶免反应中的显色反应是通过偶联在抗原或者抗体上的酶催化显色底物进行反应，从而显示出颜色，通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗原或抗体的浓度。酶标仪利用分光光度计的原理，读取酶免实验中反应物的吸光度值，进而进行分析。ST-360酶标仪是一种通道垂直光路光密度检测仪，可用来进行标准光密度测定与凝集反应检测。2.2检测原理ST-360酶标仪利用了垂直光密度检测的概念，即光束经过整个标本的垂直测光发，光的吸收与板孔中吸光物质的多少呈正比。吸光值由以下公式表示：A=（a/s）×mA为吸光度值；a为物质的克分子吸收率；m为吸光物质的质量；s为垂直于光路的横切面积。2.3参数设置设置日期，时间波长：双波长单波长，版类型：96孔输入质控类型和数量，输入阴，阳对照。2.3技术性能（1）吸光度值可测范围：0.000—3.000（0.000—2.000为线性范围）（2）滤光片波长，基本配置405，450，492，630。按用户要求可另配414，546，578，690。（3）测试速度：96孔/5秒（4）稳定性：≤±1%（5）重复性：≤0.005（A）3仪器运行环境（1）电源条件：AC200V～AC240V，50/60Hz（2）环境温度：10℃～30℃（3）相对湿度：<=80%（4）大气压：86—106Kpa（5）工作位置：水平（6）工作时间：连续8小时4授权操作人适用于生免室经授权的检验专业技术人员，具体见仪器授权一览表5程序编制5.1取出附件袋中的电源线，一端接在后面板的电源插座山，一端接在220V电源上。5.2接通仪器后面板的开关，仪器自检后，进入待机状态。5.2.1测量方式设置待机状态下按测量方式键―――选“双波长检测”―――选当前第一波长为450，第二波长为630―――选2“多孔试剂空白”―――输入空白对照孔位置（选择完按确定键）5.2.2计算方式设置待机状态下按计算方式键―――选5“单限检测法”―――选2“极限值计算”―――输入公式参数（对照试剂说明书）a=*b=*c=*（选择完按确定键）―――输入阴阳性对照孔位置（＋/－键切换阴阳性，输入完按确定键）5.2.3存储程序待机状态下编辑好程序后按功能键―――选择4“存贮当前内容”―――选择A“存贮当前设置程序”―――输入存储位置（1～50），输入完按确定键5.2.4调用程序待机状态下按功能键－－－选择5“调用当前内容”―――选择A“调用当前设置程序”―――输入程序位置（1～50），输入完按确定键5.3读板待机状态下放入检测板，打开控制电脑，输入相应的参数，按开始键读板。6仪器校准6.1滤光片波长精度检查将不同波长的滤光片从酶标仪上卸下，用UV-2201型紫外-可见分光光度计（波长精度±0.3nm）于可见光区对每个滤光片进行扫描，其检测值与标定值之差为滤光片波长精度。一般酶标仪无585nm滤光片，可选用550nm或630nm滤光片。450nm滤光片的检定选用普鲁兰溶液（校正波长为630nm）。6.2通道差与孔间差检测通道差检测是取一只酶标板小孔杯（杯底须光滑，透明，无污染以酶标板架作载体，将其（内含200ul甲基橙溶液吸光度调至0.500A左右）置于8个通道的相应位置，蒸溜水调零，于490nm处连续测三次,观察其不同通道的检测器测量结果的一致性，可用极差值来表示。孔间差的测量是选择同一厂家，同一批号酶标2板条（8条共96孔）分别加入200ul甲基橙溶液（吸光度调至0.100A左右）先后置于同一通道，蒸溜水调零,于490nm处检测，其误差大小用±1.96s衡量。6.3零点飘移（稳定性观察）取8只小孔杯分别置于8个通道的相应位置，均加入200ul蒸馏水并调零，于490nm处每隔30分钟测一次，观察各个通道4小时内吸光度的变化。6.4精密度评价每个通道3只小杯分别加入200ul高中低3种不同浓度的甲基橙溶解，蒸馏水调零，于490nm作双份平行测定，每日测二次（上下午各一次），连续测定20天。分别计算其批内精密度，日内批精密度,日间精密度和总精密度及相应的CV值。6.5线性测定用电子天平精确称取甲基橙配制5个系列的溶液，于490nm平行测8次，取其均值。计算其回归方程，相关系数及标准估计误差s，并用±1.96s表示样品测量的误差范围.双波长测定评价：取一分甲基橙溶液，分别加入3种不同浓度的溶血液（测定波长为490nm，校正波长为585nm），先后于8个通道检测，每个通道测3次，比较各组之间是否具有统计学差异，以考察双波长消除干扰组分的效果。7样品测定7.1打开电源开关。仪器自检。7.2把检测板放入运载台上。7.3进入主菜单，按“READ”键。7.4选择要做项目的编号及名称，按“ENTER”键，输入要测的样本数量，“ENTER”键。7.5再按“READ”键。测读，仪器自动打印仪器自动打印报告进行汇总。7.6取出微孔板，关闭电源。8维护与保养8.1保养8.1.1为保证仪器持续的稳定性和准确性，应干扰光学系统的任何部件。光路的调校错误会影响测量结果。8.1.2保持光学系统的清洁，以确保正常功能和结果的准确，应避免任何液体流入仪器内部，并防尘、防止其它外源性物质，不要用手指摸透镜表面、滤光镜、光电检测器。8.2仪器常规清洁8.2.1关掉仪器，并拔掉电源插头。8.2.2使用一次性手套，用一次性擦布沾水或温和去污剂，清洁仪器外部、导轨和板架。8.2.3清洁光学系统：详见仪器使用说明书。8.3消毒方法：在使用危险性的传染性物质后，用以下方法消毒仪器。8.3.1关掉仪器，并拉掉电源插头。8.3.2使用一次性手套，用一次性擦布沾70%乙醇，清洁仪器外部、轨道和板架。8.3.4仪器内部消毒，详见仪器使用说明书。9故障处理错误原因建议采取的方法开机后电源不通检查电源是否接好，保险丝是否烧断滤光片盘出错滤光片盘定位出错1.检查是否有东西阻碍盘转动或电机坏2.电机插头松3.请与服务商联系样品盘出错1.检查酶标板是否装平在板架上2.检查是否有异物阻碍板架3.导轨是否干净，有无弯曲，齿型带是否破损4.返回光耦找不到5.请与服务商联系无灯灯泡坏换灯泡滤光片出错滤光片能量低换滤光片前置出错能量太高、暗信号低1.检查电缆线是否插好,电源插座是否接地2外来电源不稳（可自配稳压器）3.与服务商联系设备故障修复后，应首先分析故障原因，如果设备故障影响了分析性能，应通过以下合适的方式进行相关的检测和验证：9.1可校准的项目实施校准验证，必要时，实施校准；9.2质控物检测结果在允许范围内；9.3与其他仪器的检测结果比较；要求：样本数n≥5，浓度应覆盖测量范围，包括医学决定水平，至少4份样品测量结果的偏差＜1/2TEa，或小于规定的偏倚。9.4使用留样再测结果进行判断。要求：依据检测项目样品稳定性要求选取长期限样品，n≥5，浓度应覆盖测量范围，包括医学决定水平，至少4份样品测量结果的偏差＜1/3T