紫外分光光度法测定化妆品中烟酰胺的含量

紫外分光光度法测定化妆品中烟酰胺的含量焦雪峰【摘要】AUVspectrophotometricmethodforthedeterminationofnicotinamideincosmeticshasbeendeveloped.TheabsorptioncharacteristicsofnicotinamidetoUVweretested.Themaximumabsorptionwavelengthwas262nm,thelinearregressionequationwasA=0.02473*C-0.00107,andthecorrelationcoefficientwasR=0.99998.Thenicotinamidecontentofdifferenttypesofcosmeticswasdetermined.Themethodissimple,fastandaccurate,andtheresultofthedeterminationissatisfactory.%建立了一种测定化妆品中烟酰胺的紫外分光光度法.试验利用烟酰胺对紫外产生吸收的特性，以最大吸收波长为262nm,线性回归方程为A=0.02473*C-0.00107,相关系数为R=0.99998,可以测定不同类型的化妆品的烟酰胺的含量.该方法简单易行、快速、准确，测定结果令人满意.【期刊名称】《分析仪器》【年(卷)，期】2018(000)003【总页数】4页(P97-100)【关键词】紫外分光光度法;化妆品;烟酰胺【作者】焦雪峰【作者单位】广东省科技职业技术学校化工教研室，广州510650【正文语种】中文烟酰胺(nicotinamide)，化学名为3-毗啶甲酰胺，又称维生素B3，是一种水溶性维生素，其结构式见图1。图1烟酰胺结构式烟酰胺的作用近年来逐渐被学界所知，在化妆品行业中应用广泛，是一种多功能活性成分，其功效已在许多专业期刊中得到证实。研究表明［1］，烟酰胺可以有效地减少可消除皮肤因老化或外界侵害造成的皱纹、起皮、毛孔变大等，使得皮肤外观更加光滑和均匀，具有美白、抗衰老、改善皮肤屏障功能、保湿和治疗痤疮六大护肤功效。市场上有多个品牌的化妆品都标注含有烟酰胺，然而这些产品中是否真的添加了烟酰胺以及添加量都不得而知。因此针对烟酰胺的检测研究有利于保护广大消费者的权益。同时，可以规范企业的化妆品成分标注行为。目前，烟酰胺的检测主要以高效液相色谱法和毛细管电泳法为主，而紫外分光光度法尚没有相关报道［2］。本实验建立了一种测定化妆品中烟酰胺含量的紫外分光光度法。该方法前处理简单、快速、定量准确。1试验部分1.1仪器与试剂UV-1800PC型紫外分光光度计，上海美普达仪器有限公司；SC-10型高速离心机，转速10000r/min以上，安徽中科中佳科学仪器有限公司；NH-1001型超声水浴，广州华南超声设备有限公司；BSA124型电子天平，赛多利斯科学仪器(北京)有限公司；JJ600型电子天平，常熟市双杰测试仪器厂；100pL~1000pL可调式移液器，大龙兴创实验仪器(北京)有限公司。所用试剂均为分析纯，试验用水为分析实验室用二级水。烟酰胺标准贮备液：准确称取烟酰胺标准物0.3000g至50mL烧杯中，用水溶解，转移至100mL容量瓶中，用水定容至刻度成标准贮备液(3000pg/mL)。再吸取10.00mL的标准贮备液至100mL容量瓶中，用水定容至刻度作为标准使用溶液(300.0pg/mL)o1.2样品的提取溶剂的选择据报道烟酰胺溶于水和醇，不溶于二氯甲烷。而二氯甲烷可以除去化妆品中脂溶性成分以及表面活性剂成分［3］。因此选择了较为简便的水/二氯甲烷体系，比例为1:1。1.3样品的前处理方法称取样品约0.10g于10mL具塞离心管中，加入5mL水和5mL二氯甲烷［4］，强烈震荡后，超声提取15min，强烈震荡后于8000r/min转速下离心分离3min,取上清液检测。1.4烟酰胺检测波长的确定吸取8.00mL的烟酰胺标准使用溶液(300.0pg/mL)至100mL容量瓶中，用水定容至刻度。用紫外分光光度计的光谱扫描获得的烟酰胺在200nm至350nm间的特征吸收曲线，见图2。从吸收曲线图可看出烟酰胺在214nm和262nm处有最大吸收峰，262nm的紫外吸收有相对的特异性。考虑到在该波长下检测，可以避免二氯甲烷的紫外吸收干扰以及部分样品杂质对紫外吸收的干扰，有利于目标成分的准确定量，因此确定检测波长为262nm。图2烟酰胺的吸收曲线图2结果与讨论2.1方法的线性与检出限分别吸取0、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL的烟酰胺标准使用溶液(300.0pg/mL)至100mL容量瓶中，用水定容至刻度。该系列的标准溶液的质量浓度分别为0、3.000、6.000、12.000、18.000和30.000pg/mLo按紫外分光光度法测定其吸光度，数据如表1所示。表1标准曲线数据点内容1234567标准溶液移取量(mL)01.002.004.006.008.0010.00质量浓度((g/mL)03.0006.00012.00018.00024.00030.000测得吸光度0.0000.0720.1480.2950.4420.5950.740以吸光度A对质量浓度c(pg/mL)绘制标准曲线，见图3。烟酰胺浓度在0.000至30.000pg/mL范围内与吸光度呈线性关系，线性回归方程为A=0.024723*c-0.00107，相关系数R=0.99998。图3烟酰胺的标准曲线图在相同的测试条件下，以3、10倍空白样品的标准偏差0.001342(n=6)除以标准曲线的斜率0.02473，计算出烟酰胺的检出浓度为0.16pg/mL，最低定量浓度为0.54pg/mLo2.2方法的精密度和重复性试验取不同烟酰胺含量的膏霜样品提取液0.10mL至100mL容量瓶中，用水稀释至刻度。在波长262nm下测定其吸光度，平行测定6次，计算得相对标准偏差(RSD)在1.41%~5.89%。将同一样品按1.2处理方法提取并测定6次，计算得RSD在3.56%~4.62%。结果见表2。表2膏霜样品中烟酰胺测定的精密度和重复性(n=6)项目吸光度123456RSD(%)精密度0.0250.1020.1450.0240.1000.1490.0220.0990.1400.0260.1010.1420.0230.0980.1460.0240.1000.1445.891.412.18重复性0.0240.1020.1340.0250.1040.1390.0270.0990.1490.0260.0940.1410.0270.1070.1430.0260.1050.1444.534.623.56取不同烟酰胺含量的水剂样品提取液0.10mL至100mL容量瓶中，用水稀释至刻度。在波长262nm下测定其吸光度，平行测定6次，计算得相对标准偏差(RSD)在1.91%~3.35%。将同一样品按1.2处理方法提取并测定6次，计算得RSD在1.45%~3.87%。结果见表3。表3水剂样品中烟酰胺测定的精密度和重复性(n=6)项目吸光度123456RSD(%)精密度0.0610.0950.2650.0620.0980.2690.0600.0990.2600.0630.0910.2660.0600.0960.2610.0610.0920.2701.913.351.53重复性0.0620.1000.2600.0640.0950.2640.0640.0900.2630.0630.0920.2680.0600.0930.2680.0610.0910.2592.613.871.45取不同烟酰胺含量的乳剂样品提取液0.10mL至100mL容量瓶中，用水稀释至刻度。在波长262nm下测定其吸光度，平行测定6次，计算得相对标准偏差(RSD)在2.56%-4.29%。将同一样品按1.2处理方法提取并测定6次，计算得RSD在2.99%~4.71%。结果见表4。表4乳剂样品中烟酰胺测定的精密度和重复性(n=6)项目吸光度123456RSD(%)精密度0.0350.0850.1240.0320.0830.1200.0330.0870.1280.0310.0810.1260.0340.0840.1290.0330.0820.1254.292.582.56重复性0.0330.0870.1300.0310.0810.1260.0340.0840.1380.0350.0830.1290.0340.0800.1210.0320.0820.1354.442.994.71]]2.3方法的加标回收率试验准确移取0.00、1.00、4.00、8.00mL烟酰胺标准使用溶液(300.0pg/mL)置于100mL容量瓶中，再分别移取1.00mL各类样品加入中，用水稀释至刻度。得高、中、低水平下的样品加标回收率，如表5所示，回收率在100.20%~108.78%之间。表5烟酰胺加标回收率样品类型加标量(四/100mL)平均回收率(%)水剂3.0100.2012.0103.6724.0108.78膏霜3.0100.2312.0100.0524.0103.49乳剂3.0102.6512.0104.6424.0103.052.4方法的试样稳定性试验吸取同一样品提取液，于室温放置0、30、60、90、120min测定吸光度，其吸光度的RSD为1.09%-2.07%，表明样品在2h内稳定，数据见表6。表6烟酰胺2h内稳定性数据样品吸光度0min30min60min90min120minRSD(%)低含量水平0.0700.0740.0720.0710.0722.07高含量水平0.2720.2680.2690.2640.2671.092.5与高效液相色谱法比较(GB/T29664-2013)根据GB/T29664-2013化妆品中维生素B3(烟酸、烟酰胺)的测定中的液相色谱分析条件进行HPLC分析。样品中烟酰胺的含量，用标准曲线外标法来确定，然后计算烟酰胺含量与紫外分光光度法进行比较。HPLC测定结果与紫外分光光度法比较见表7。表7HPLC法与紫外分光光度法测定结果比较测定次数HPLC法(mg/g)紫外分光光度法(mg/g)相对偏差(％)110.129.763.56210.109.624.75310.089.654.26由表7可知，紫外分光光度法测定样品中烟酰胺含量比HPLC法略偏低，其相对于HPLC法的偏差没有超过5%，基本上可以满足样品中烟酰胺含量测定的需要。2.6实际样品分析对市售主要含有烟酰胺的6种不同类型的化妆品进行了测定，它们的烟酰胺质量比含量在4.70mg~51.27mg/g之间。3结论利用烟酰胺在紫外光区262nm处有明显的吸收，建立了化妆品中烟酰胺含量的紫外分光光度法，在0至30.000pg/mL范围内，烟酰胺质量浓度与紫外吸光度呈良好的线性关系，线性回归方程为A=0.02473*C-0.00107，相关系数R=0.99998,采用此法对化妆品中烟酰胺的含量是可行的。该方法简单易行，灵敏度较高，结果准确，可快速测定化妆品中烟酰