检验科操作规程

检查科操作规程血常规（SysmexKX-21血液分析仪)操作规程：1（准备稀释液：加样器取稀释液500微升加入一次性塑料试管中备用。2(采血：75%乙醇棉球消毒患者左手中指或无名指皮肤待干后,一次性无菌采血针采血，干棉球拭去第一滴血后按规定依次采血,推血片,采血完毕后用干棉球压迫伤口止血。3（稀释标本和全血标本室温放置3～5分钟。4（将标本混匀，插入仪器吸样管中，按start键检测开始。5（打印成果，异常成果应进行手工分片。6（登记:项目齐全、及时、精确。7（每周六下午仪器进行周保养并记录.尿常规操作规程：1（一次性尿杯留尿。2（尿试纸浸湿,卫生纸吸取多出尿液.将尿试纸放在测试仪上,按start键测试开始并打印成果.3（涂片:塑料吸管吸取少许尿液后涂片镜检并汇报成果.异常标本离心后镜检。4（登记：精确及时项目齐全。5(每天下班时将载物台取下清洗，擦干放回原处。血流变操作规程:01（打开普利生自清洗旋转式粘度计机器，待温度上升至37C，打开主机,进入血流变操作程序，并等待操作.2（静脉采血5ml加入肝素抗凝管内，充足混匀.3（将抗凝血注入温氏管至10刻度,1小时后汇报血沉数,然后以3000r/min离心20分钟，汇报红细胞压积数值。4（吸取800微升抗凝血，加入普利生自清洗旋转式粘度锥板内,按下全血试验(F5）键，测出高切、中切、低切的数值。5（将抗凝血离心5分钟，吸取800微升血浆加入普利生自清洗旋转式粘度剂锥板内，按下血浆试验(F6)键,测出血浆粘度数值。6（打印汇报。7（冲洗机器5遍，烘干关机。病区化验室血常规(Sysmex-21）操作规程:1(准备稀释液，将稀释液用加样器取500微升加入一次性塑料试管中，备用。2（采血：采病人中指或无名指，酒精消毒后用一次性采血针采血，拭去第一滴血后取20微升,完毕干棉球止血.3(检测:室温放置3～5分钟后混匀，上机检测。4(登记：出成果后登记病人姓名、年龄、性别、科别及成果的记录。5（关机：每天中午工作完毕后用清洁液清洗,关闭电源，下午上班后重新开机.6(血球仪周六下午做周保养，并记录。病区化验室尿常规（DIRUIH-500）操作规程：1（接通电源，打开开关，屏幕上显示“系统正在测试„„"仪器进入自检状态。自检结束，用原则试带或质控液进行质量控制。2（屏幕显示“请放试纸„„",在工作台前部有红光交替闪烁，仪器处在等待状态。3（查对尿标本编号,淋湿尿试纸条，将多出尿液用卫生纸拭干。4（尿试纸条放在工作台上，并保证试纸条前端同工作台的前壁接触.5（仪器确定试纸存在后，推进杆将试纸推进到步进报上方,试纸运送到测试位置。6(当推进杆退回原位时,放第二条试纸„„这样持续推进运送,实现持续测试。7（测试结束后打印机自动打印测试成果，登记，签名。8（每天下班前将样本载物台取下清洗,擦干放置好。病区化验室大便常规操作规程:1(查对标本，观测颜色及性状.2（于洁净玻片上滴生理盐水1`2滴，多点采用少许大便标本，涂匀待镜检。3（镜检后出汇报、签名、登记。4(若需要做潜血试验，则用采便棒多点采用粪便，然后将采便棒放进采便器的蒸馏水中搅拌，混匀.5（取出试纸条,以MAX标识的一端插入小试管中,1~5分钟判读成果。6（登记成果签名。7（微生物室操作常规大便培养：0收到标本后编号,接种SS平板、麦康凯平板、血平板，置35C恒温箱培养18～24小时后观测菌落形态并继续培养、鉴定、做药敏、汇报成果。痰、鼻咽拭子培养：收到标本后编号,接种血平板、麦康凯平板,涂片，若白细胞不小于25个/低被镜,上皮0细胞不不小于10个/低倍镜为合格标本。置35C恒温箱培养18~24小时后观测菌落形态并继续培养、鉴定、做药敏、汇报成果.尿标本培养：0收到晨尿后编号，接种血平板、麦康凯平板、计数平板，置35C恒温箱培养18~24小时后观测菌落形态并计数，继续培养、鉴定、做药敏、汇报成果。血液、骨髓培养:无菌手术抽取标本5～10ml，加入到血液增菌瓶中，一般按需氧培养(医生注明除外)0编号,35C培养72小时，TREK培养器报警后,即转种血平板、麦康凯平板，涂片并将成果告知医生。若无菌生长，第72小时出汇报。血培养瓶继续培养至120小时,阴性不发汇报不告诉医生，阳性告诉医生并发汇报诉医生。脓液、胸腹水、关节液及多种无菌标本培养0收到标本（量不应少于3ml）编号，注入增菌管中或增菌瓶中，35C培养6~48小时,0阴性时发阴性汇报，阳性时转种血平板、麦康凯平板，35C培养18—24小时，观测菌落形态、并继续培养、鉴定、做药敏、汇报成果。脑脊液培养：0收到标本后编号,接种血平板、麦康凯平板、预温的巧克力平板,35C培养18~24小时后观测成果.并继续培养、鉴定、做药敏、汇报成果。NG培养:0收到标本后编号,接种已预温的巧克力平板，35C培养18~24小时后观测有无水滴状、无色或灰白色菌落，并涂片革兰染色,做氧化酶试验、营养琼脂生长试验.并继续培养、鉴定、汇报成果。真菌培养:00C培养，另一种置25C培养，收到标本后编号，接种两个TTC—沙氏平板，一种置35有真菌生长后,上板黑马IDS—96板做鉴定药敏.无菌生长,第五日汇报成果。支原体培养：收到标本后编号，接种于支原体培养液中,然后转种于支原体计数、鉴定、药敏板中，24小时、48小时观测解脲人型支原体生长状况，并汇报成果。革兰阳性菌上GPIP、PRCM1F板,做细菌鉴定、药敏。革兰阴性菌上GNIP、PRCM2F板做细菌鉴定、药敏。真菌上黑马IDS—96板，做真菌鉴定、药敏。免疫室各项目操作规程乙肝五项操作规程（ELISA)：1(冰箱中取出试剂,恢复至室温.2(按待测样品数目排板，设置阴性对照两孔，阳性对照一孔。3(阴、阳对照孔中分别加入阴阳对照液各一滴，待测样品每孔加入50微升待测样品(HBcAb用生理盐水1:30稀释后加入板孔50微升）。04（每孔加入各项酶结合物1滴后混匀，37C水浴30分钟。5（洗板机洗板5次后拍干.06(每孔加入显色液A、B各1滴混匀，37C水浴15分钟.7（每孔加入终止液1滴混匀。8（酶标仪读数（双波长450nm、630nm,读取各孔OD值）.9（打印汇报单。乙肝前S（P—I抗原）测定操作规程：1RES1（冰箱中取出试剂，恢复至室温.2(按待测样品数目排板，设置阴性对照两孔，阳性对照一孔.3（阴、阳对照孔中分别加入阴阳对照液各1滴,待测样品每孔加入50微升待测血清，混0匀，37C水浴30分钟.4（洗板机洗板5次后拍干。05（每孔加入酶结合物50微升,混匀，37C水浴30分钟.6(洗板机洗板5次，拍干。07（每孔加入显色液A、B各1滴混匀，37C水浴15分钟。8(每孔加入终止液1滴混匀,（阳性显黄色，阴性无色）。9（酶标仪扫板读数，读取各孔OD值，保留数据。10（打印汇报单。ENA多肽抗体谱操作(免疫印迹法）：1(冰箱中取出试剂,恢复至室温.0C孵育302（每槽加入洗涤液0。5ml后加入待测血清10微升，充足混匀,缓慢摇动于37分钟。3（弃去槽内液体，吸水纸上拍干，洗涤液洗涤四次,每次1分钟.04(每槽加入洗涤液0.5ml，酶标抗体20微升,混匀，缓慢摇动于37C孵育30分钟.5（弃去槽内液体,拍干，洗涤液洗涤四次,每次1分钟.6（加入A显色液0.5ml,B显色液0.5ml，室温反应10分钟。7（每槽加入0。5ml终止液，1分钟后弃去液体，自来水洗涤多次，取出膜条,吸干后在标准谱带图上进行对比。8（阳性:棕色；阴性：无色。人类白细胞抗原HLA—B操作:271(空腹抽取外周静脉血5ml加入肝素抗凝管中，混匀，水平离心2500转/5分钟。2（上层血浆和下层全血弃去，取管中间全血层1ml，加入2ml盐水混匀.3（洁净试管中加入2ml淋巴细胞分离液，将上述稀释全血轻辅于分离液表面，勿破坏界面,水平离心2800转/15分钟。4（环状吸取中间淋巴细胞层加入另一试管中，加盐水5ml，吸管吹打混匀，水平离心2400转/10分钟.5（弃去上清液，加盐水4ml，吸管吹打混匀，水平离心转/5分钟。6（弃去上清液，调整细胞数个左右/微升,将调好浓度的细胞悬液混匀几下,加样枪加入到抗血清板孔底，每孔1微升。7（每孔加入免补体5微升,室温孵育1小时。08（每孔加入5%伊红5微升,室温反应2分钟，继续加入30％中性甲醛每孔5微升，40湿盒过夜.9(判断成果:死亡率（％）积分定性0～101阴性11～202阴性21～404可疑41～806阳性〉808阳性精液分析：1(依次打开主机、显示屏、打印机、显微镜开关。2（进入精子分析仪检测程序，依次输入病人姓名、年龄、精液量、液化时间。3（于记数板上加病人精液1滴，加盖玻片，选择低倍镜，调整视野清晰。4(启动自动检测,第一组检测完毕后单击下一步及确定，开始第二组检测至十组检测完毕.5(打印汇报单，镜下观测细胞数、精子有无畸形，填写于打印汇报上.抗“O"、类风湿操作规程:1（冰箱中取出抗“O"、类风湿试剂，恢复至室温。2（取待测血清(血浆）1滴（50微升）置于黑色背景反应板中。3（加抗“O”/类风湿试剂1滴，充足混匀,2分钟内观测成果.4（阳性:出现颗粒状凝集；阴性：无颗粒状凝集。金标法ANA、抗ds—DNA抗体:1(冰箱中取出试剂，恢复至室温。2（于反应板中加A试剂2滴，待其充足吸入.3（加待测血浆（清）6滴,待其充足吸入.4(清除滤过膜。5（于反应板中加B试剂3滴，待其充足吸入。6(于反应板中加A试剂2滴，待其充足吸入.7（成果鉴定阳性：中心有红点；阴性:中心无红点.抗精子抗体、抗子宫内膜抗体操作规程:1（冰箱中取出试剂,恢复至室温。2（反应板中加A试剂2滴，待其充足吸入。3(反应板中加待测血浆（清）6滴，待其充足吸入。4(清除滤过膜后加B试剂3滴于反应板中，待其充足吸入。5（加A试剂2滴于反应板中,待其充足吸入.6（成果鉴定阳性：中心有红点；阴性：中心无红点。EB病毒操作规程:1（冰箱中取出试剂，恢复至室温。2(反应板中加A试剂2滴,待其充足吸入。3（反应板中加待测血浆（清)6滴，待其充足吸入.4(清除滤过膜后加B试剂3滴于反应板中，待其充足吸入。5（加A试剂2滴于反应板中,待其充足吸入。6（成果鉴定阳性：中心有红点；阴性:中心无红点.结核抗体操作规程：1(冰箱中取出试剂，恢复至室温.2(反应板中加封闭液2滴，待其充足吸入.3（加待测血清40微升或脑脊液（胸水）80微升，待其充足吸入。4(加洗涤液6滴于反应板中，待其充足吸入.5（加金标液2滴于反应板中,待其充足吸入。6(加6滴洗液，待其充足混匀.7(成果鉴定阳性：中心有红点；阴性:中心无红点。肺炎衣原体抗体和肺炎支原体抗体操作规程：1(冰箱中取出试剂,恢复至室温.2(反应板中加A试剂2滴，待其充足吸入。3(加患者血清6滴于反应板中，待其充足吸入。4（清除滤过膜后加B试剂3滴于反应板中，待其充足吸入。5（加A试剂2滴于反应板中，待其充足吸入。6（成果鉴定：阳性:中心有红点者.阴性：中心无红点者。β—微球蛋白操作规程:1（稀释标本、质控血清。措施：10微升血清标本+1.0ml样本稀释液（101倍稀释)。原则液无需稀释。2（加5微升的原则液,稀释的待测标本，稀释质控于对应的孔内，分别再加200微升样本0C孵育30分钟.稀释液于对应各孔，混匀10秒，373（洗板：蒸馏水冲洗5遍，拍干.04（每孔加200微升酶标液，混匀10秒，37C温育30分钟，洗板同环节3。5（每孔加TMB(A与B1：1混合提前15min)200微升，混匀10秒,闭光室温放置20分钟.6（加50微升终止液，混合10秒（30分钟内于450nm波长处比色）。7（在酶标仪上比色后，选择原则曲线进行定量计算,打印汇报即可.囊虫抗体（Cyt）酶免法:1（冰箱内取出试剂盒，恢复至室温。2（取出包被条,分别向阴性对照孔、阳性对照孔、样本孔加入阴性对照液1滴、阳性对照0液1滴、稀释待测样本100微升，37C孵育15分钟。3（洗涤：各孔加洗液2滴，轻轻摇动几下弃之，然后用蒸馏水加满各孔，甩掉,拍干，重复5次。04（每孔加入酶结合物2滴(100微升）。37C孵育15分钟.5（洗涤：反复环节3。6（显色：加入底物1滴后即加入显色剂1滴,室温反应2分钟.7（成果鉴定目测阴性:2分钟时观测基本无色;阳性：颜色明显深于阴性对照组。甲型肝炎病毒IgM抗体（酶法)：1(冰箱内取出试剂，恢复至室温。2（取出包被条,待测标本1:1000稀释，每孔加入稀释标本100微升，阴、阳对照孔内加0入对应对照液100μl(或2滴），封板，置37C孵育20分钟.3（洗板:洗涤3次,每次5秒，洗板后拍干。04（每孔加入HAVAg30微升，酶结合物50微升，充足混匀封板，置37C孵育20分钟.5（洗板：洗涤5次,洗板后拍干。06(每孔加显色剂A、B各50微升,混匀,37C孵育10分钟。7（成果判断阳性:显示兰色.阴性：免疫球蛋白G、A、M测定（迅速免疫消浊法）:1（冰箱内取出试剂恢复至室温.2（血清样本、原则液用生理盐水1:11稀释。03（IgG测定：排好试管编号,每管加入IgG试剂2ml，37C孵育10分钟.4(空白管加入0。02ml蒸馏水，原则管加入0。02ml稀释过的原则品,样本管加入0。02ml稀释样本。05（混匀,37C孵育20分钟。6（半自动分析仪比浊,读取成果.7（IgA、IgM同IgG。C—反应蛋白（CRP）测定:1（冰箱内取出试剂盒恢复至室温。02(排好试管编号，每管加入试剂1ml，37C孵育5分钟。3(空白管加入20μl蒸馏水,原则管加入20μl原则品，样本管加入20μl样本.0C孵育20分钟。4(混匀,375（半自动生化分析仪比浊，读取成果.补体单体成分CC试剂(迅速免疫消浊法）:341（冰箱内取出试剂盒恢复至室温。2(待测血清样本、原则液用生理盐水1:11稀释.03（C测定：排好试管编号，每组加入C试剂2ml,37C孵育10分钟。334（空白管加入蒸馏水0。2ml，原则管加入稀释原则品0。2ml，标本管加入0。2ml稀释样本。05(混匀，37C孵育20分钟。6（半自动分析仪比浊，读取成果。7(补体C同C测定.43糖化血红蛋白测定措施：1（冰箱内取出试剂，恢复至室温。2(针刺指尖取血5μl，加于稀释液管内,混匀.3(取混合液25μl,加于反应板孔内，待渗完。4（取R试剂25μl加于反应板孔内，待渗完。25(多功能全定量金标测定仪测定。正常参照值：4～6％。尿微量白蛋白测定措施：1（冰箱内取出试剂,恢复至室温。2（取尿50ul加于稀释液管内,混匀。3（取混合尿液50ul加于反应板孔内,待渗完。4（取R试剂50ul加于反应板孔内，待渗完。25(取R试剂50ul加于反应板孔内，待渗完.36（用多功能全定量金标测定仪测定.正常参照值:〈20mg/L。乙肝表面抗原（HbsAg）、丙肝抗体（HCV—Ab）测定措施:1（冰箱内取出试剂筒,恢复至室温.2(取出试剂条粘在记录纸上，用采血管吸取全血50μl左右，垂直滴加于试剂条加样处，滴加缓冲液一滴待红色条带出现,15分钟内读取成果。3（成果鉴定：阳性两条红色条带出现，一条位于测试区(T）内，另一条位于质控区(C).阴性仅质控区（C)出现一条红色条带.恶性肿瘤有关因子TSGF操作措施；1(冰箱内取出试剂，恢复至室温。02(取待测血清40μl加入试剂杯中，密闭试剂杯放入100C水中，水浴15分钟.3（取出后再放入冷水中5分钟取出。4（加入1cm孔径的比色杯中,置470nm波长比色。5（成果鉴定:吸光度值×系数(140)=μ/ml。尿HCG操作措施：1(冰箱内取出试剂条，恢复至室温。2（将测试纸有箭头的一端插入患者小便容器中，至少3秒后取出平放.3（3分钟内观测成果。阳性：在检测线位置及对照线位置各出现一条红色反应线。阴性：仅在对照线位置出现一条红色反应线。优生四项操作措施：1（冰箱内取出试剂,恢复至室温。2（加A溶液2滴于反应板中，待其充足吸入。3(加待测血清2滴于反应孔中，待其充足细入。4(加B溶液3滴于反应孔中，待其充足细入。5(加A溶液6滴于反应孔中,待其充足吸入。6(成果鉴定阴性:四角无红点。弓形体阳性:左上角出现红点。巨细胞阳性：左下角出现红点.风疹阳性：右上角出现红点.单纯疱疹？型阳性:右下角出现红点。前列腺特异抗原PSA：1(冰箱内取出试剂盒后恢复至室温。2（取出反应板。3（每孔加入100微升零缓冲液，轻轻混匀30秒，室温温育60分钟。4(选择合适的洗板机程序洗板，然后拍干.5（每孔加入200微升酶联物,轻轻混匀10秒，室温温育60分钟。6（洗板，同3.7（每孔加入100微升TMB显色液，轻轻混匀10秒钟，室温温育20分钟。8(每孔加入100微升终止液，轻轻混匀30秒，确定兰色变为黄色，15分钟内在酶标仪上读板，打印汇报.幽门螺旋杆菌:1(冰箱内取出检测盒、缓冲液，阴阳对照液，恢复至室温.2(取出反应板。3（用试剂盒提供的尖吸管往加样孔内垂直滴加待测血清或血浆1滴。4（加入3~4滴缓冲液。5（5分钟读取成果:阴性：对照区（C)有一条红线，检测区（T）无红线。阳性：对照区（C）、检测区(T）均出现红线。化学发光免疫分析系统的操作规程：1（仪器的每天保养：在英文操作平台的主屏下，选择F6(保养），再按F4（液体冲洗）运行每日的保养程序.2（打开中文电脑，进入BMLIS操作系统。按(启动ACCESS通讯），进入(接受数据浏览）界面.3（标本测试项目的录入：在英文操作平台下，选择F1（测试申请)，录入标本架号、标本号及对应的测试项目。4（标本测试：标本测试项目录入完毕后,即按F1装载响应的标本架，按功能键F11（RUN）运行.5（病人资料的录入：在中文操作平台的（成果数据浏览）界面下,录入对应的病人资料及信息。6(打印汇报：待标本的测试成果被中文操作平台接受后，即可审核、打印汇报。7（测试完毕后，在英文操作平台的测试申请屏幕下,选择F1取出标本架,再按ESC返回主屏即可。8（关闭中文电脑：关闭（成果数据浏览）窗口,按(工作结束并备份)保留当日的数据.退出（Access通讯）,关闭中文电脑，完毕当日工作。白带常规操作规程：,.接受标本。，。记录标本颜色、透明度。，.镜检RBC、WBC、上皮细胞、滴虫、霉菌(加10％KOH数分钟后镜检）。,。登记姓名、年龄、科别及成果。前列腺液常规操作规程,。接受标本。，.镜检RBC、WBC、上皮细胞、精子、卵磷脂小体。，。登记姓名、年龄、科别及成果。脑脊液常规检查操作规程，。接受标本，查对姓名、科别。,。记录标本颜色、透明度。,。饱和石炭酸蛋白定性。6/l分类。，。镜检细胞数，白细胞超过100×10,。登记病人姓名、年龄、性别、科别及成果。生化平常操作规程：，。检查机器内试剂和管路（重要为CX3）与否要更换。,。打开主机电脑及打印机,按F3键,选当日需定标项目,将定标液1号、2号、3号加入小杯内，放入机器内，按开始键（Iniaiar）进行定标.,.打开外部电脑及打印机,键入“Lis"按回车键,输入口令密码.,.从外部电脑输入室内质控编号，从项目中选14，并把质控液加入小杯内，贴上对应条码，防入架中,按机器上的“Load"键，开始质控测定。，.从外部电脑输入病人编号、姓名、性别、年龄、科室、床号、项目。,.把病人标本贴上对应编号条码(标本为4。5ml以上）或加入小杯后贴上编号条码,防入架上，放入机器中,做标本测定.KNaCL测定（直接离子选择电极法)，.离心分离血清,将血清盛于样本杯中.，。对KNaCL分析仪进行定标,标定正常后进行测定。，.显示“分析样品，"，按“Yes"，样品针进入样品液面下，显示“在样品中，",“Yes",出成果。，。记录成果。，。每日工作结束后,进行每日清洗程序。参照值：K+：3.50—5。50mmol/L；Na+:135—145mmol/L；Cl—：96—106mmol/LCa的测定(邻甲酚酞络合酮比色法）空白管原则管样品管1（将R1与R2试剂按1:1混合均匀，即为工作液.3。0ml3.0ml3。0ml工作液2（照右表加好各管，分别混合均匀。3(在测定温度保温5分钟，以试剂空白管调零,分别测0。06ml蒸馏水定A原则,A样品。0。06ml原则4(计算：钙浓度=A样品/A原则＊原则浓度（mmol/L)参照值：2。15~2。55mmol/L0.06ml样品血糖的测定，.滴一大滴(约50ul）的全血，让其盖过整个试剂层，同步按下血糖仪启动键到计时。，.待60秒时，用干棉球均匀用力地把血样擦掉，然后再用洁净棉球擦一次，30秒时试剂面向下防入测试架内，盖上盖子，0秒时仪器自动报出成果.参照值：3.5~6。1mmol/L。BUN的测定（OPA法)（手工操作措