分子标记辅助选择在水稻抗病育种研究进展

分子标记辅助选择在水稻抗病育种研究进展官华忠摘要：随着水稻高密度分子遗传图谱的构建和重要农艺性状的基因或QTＬ的定位,分子标记辅助选择逐渐用于质量和数量性状的遗传改良。本文综述了分子标记辅助选择在水稻抗稻瘟病、抗白叶枯病和抗细菌性条斑病的育种应用的研究进展,存在的问题和展望。关键词:分子标记辅助选择，水稻育种，稻瘟病，白叶枯病，细菌性条斑病水稻是全球重要的粮食作物之一，全世界有2５亿以上的人口主食大米,其中中国是世界上最大的水稻生产和消费国,６0％人口以稻米为主要食粮.自从实现杂交水稻三系配套以来,我国杂交水稻年种植面积1533．３3万hm２左右，约占水稻总面积的50％，而产量则占水稻总产的近60％［1]，为我国粮食生产做出了巨大贡献。然而，水稻病害的危害一直严重地影响着水稻生产。水稻病害种类很多，全世界有近百种,我国正式记载的达70余种,其中具有经济重要性的有２0余种[２]。稻瘟病、白叶枯病发生面积大，流行性强，危害严重，两者均为水稻“三大病害”之一;同时由于近年来随着感病杂交水稻的大面积推广,细菌性条斑病发生日趋广泛和严重，也已成为我国南方稻区最重要的水稻病害之一。因此，筛选出具有持久抗瘟能力的种质资源做供体亲本，采用相宜的杂交配组方式,从而培育具有持久抗瘟能力的不育(保持）系和恢复系，并推广和种植抗病品种,是防治水稻稻瘟病病害的最经济有效的措施。目前国内多数育种单位还基本上是靠传统的方法进行抗病育种,依赖于抗性鉴定和植株表型的选择,常常受到没有合适的致病菌株和病菌发病条件的限制，鉴定结果不准确,育种效率低［３]。此外，用传统方法构建基因累加系（即基因聚合）是很困难的，难于选育出聚合多个抗病基因的持久抗病品种。利用生物技术培育持久抗病性品种是现代开辟的新途径。例如分子标记辅助选择(Ｍaｋeｒａssiｓtedselｅctioｎ，MAS)，这种技术是通过分析与抗病基因紧密连锁的分子标记的基因型来对目标基因进行选择。它克服了传统选择方法的缺陷，具无与伦比的优越性[4］，从而大大提高选择的可靠性，使育种进程加快,育种效率得到提高。更重要的是,通过分子标记辅助选择能够快速地将多个抗病基因聚合,培育出持久抗性品种.因此，该技术是加速水稻改良和提高改良水平的重要措施之一。本文就分子标记辅助技术在水稻抗病育种的进展及存在问题进行综述。１．标记辅助选择的原理标记辅助选择(ｍaｒker—assiｓtｅdselectｉｏn，MAS）是指借助分子标记对目标性状的基因型进行选择。在作物遗传育种中,主要是应用分子标记辅助选择进行前景选择和背景选择。1.1前景选择对目标基因的选择称为前景选择(Foreｇroｕndseｌetｉon）［5］。这是标记辅助选择的主要方面.前景选择的可靠性主要取决于标记与目标基因间连锁的紧密程度，同时利用两侧相邻的两个标记对目标基因进行跟踪选择，比只用一个标记对目标基因进行选择，正确率要高很多.因而寻找与开发与目标基因紧密连锁的分子标记是进行前景选择的关键[６］。当今,水稻全基因组的测序完成及大量ＳSR标记的开发和定位，使得ＳSR成为分子标记辅助选择的首选标记,并为分子标记应用于前景选择提供了广阔的发展空间，给育种工作带来了极大的方便。1.２背景选择对基因组中除了目标基因之外的其它部分(即遗传背景)的选择，称为背景选择(baｃkｇrouｎdｓeｌｅｃtion)[５］。与前景选择不同的是，背景选择的对象几乎包括了整个基因组。Young等［7］发展了一种基于分子图谱的图示基因型的分析方法,利用该方法可进行全基因组选择,即在基因组各染色体上选取多个标记，检测后代各标记的基因型。在标记辅助选择中,可以同时进行前景选择和背景选择。首先进行前景选择,以保证不丢失目标基因，然后通过图示基因型，监测中选单株的整个基因型组成，选择具有最佳基因组合的单株,以加快育种进度。例如对番茄基因组进行的计算机模拟研究显示，如果每一回交世代产生30个植株,那么用分子标记对整个基因组进行选择,只需3代即能完全恢复成轮回亲本的基因型,而采用传统回交方法则需要６代以上。2。标记辅助选择在抗病育种中的应用分子标记辅助选择与传统回交育种技术相结合有利于控制优良性状的基因及多个基因的聚合，特别是有利于聚合多个抗病基因从而提高品种的抗性和抗谱。目前在水稻中对质量性状的MＡＳ技术已日趋成熟,并取得了很大的成就,而对数量性状的MAS进展较为缓慢.2.１抗稻瘟病MＡS目前的研究认为有40个以上主基因控制水稻的抗瘟性［8］，这些基因已分别从l０0多个品种或品系中鉴别出来,其中利用分子定位的已超过2７个［９］。如Yｕ等［10］用感病籼稻Co３９为遗传背景导入51７3和Teｔeｐ的抗稻瘟病基因,采用短日高温处理快速加代法获得B６F4重组自交系群体(ＲＩＬs)，定位了Pｉ－２(t）和Pｉ-4（t)。随后，Ｍew等［11］进一步精细定位了这两个基因.刘士平等［１2］将Pi-1定位在RＦLP标记RＺ5３6和SSR标记RＭ14４之间，图距分别为9。７和6．8cM。吴金红等［13]进一步将Pi－2定位于分子标记ＲG64和AP２2之间，图距分别缩小到0。9和1.２cM。Ｗａｎg［1４］用Ｃo３9为感病材料导入持久抗瘟性品种Mｏrobｅrｅkan的抗稻瘟病基因构建重组自交系,于F7代用127个ＲFLP标记检测抗病池和感病池，定位了Ｐi—５（t)和Ｐi-７(t）基因。Nａｑiv等[１５］发现Pｋ157位于第十二染色体并与单拷贝克隆RG341紧密连锁，同时还发现Pi１0位于第五染色体上，与RAPＤ标记ＰF6、PＨ8、ＲFLP标记RG１82、RZ70紧密连锁。Zｈｅng等［16]也发现了位于第十二染色体上的抗稻瘟病基因与ＲG81、ＲG８６５9、ＲZ3９7紧密连锁。Pan等［17]用SSR标记将Pi—15定位于第9号染色体.除了对抗稻瘟病主基因定位外，近年在稻瘟病抗性QTＬ的分子标记定位方面也取得较大的进展。目前已国内学者已采用多种方法定位了80个以上与稻瘟病数量性状抗性相关的QTL[18－22]。这些抗性基因/QTＬ的分子标记定位是稻瘟病抗性的分子标记辅助育种和抗性基因或QTL的克隆的重要前提.如在分子标记定位的基础上，人们采用图位克隆的方法成功克隆了水稻抗稻瘟病基因Ｐi-tａ［23］，Pi—b［２4]，Pｉ—９［２5］和Pi—Ｋｈ[２6］。虽然有较多的稻瘟病抗性/QTL的分子标记定位已完成,但已成功应用于育种的稻瘟病抗性基因只有少数几个主效基因，如Pi-1,Pi－2，Ｐｉ-９，Ｐi-d，Pi-ｚ5和Ｐi－ta等。李仕贵等[２7］应用与稻瘟病抗性基因Ｐi-ｄ(t)紧密连锁的微卫星标记RM26２对含有该抗病基因的品种地谷与感病品种江南香糯和８9８7的F2群体进行MAS选择,结果发现应用该标记选择纯合和杂合带型抗性植株的准确率可达98%以上。Ｈittａlmannｉ等［28]在以一个抗稻瘟病基因Ｐi－z５两侧连锁标记的辅助选择中,发现纯合抗病Ｆ2植株选择的准确率达1００％。Ｌiu等［29]通过分子标记辅助技术将广谱抗稻瘟病基因Pi—１导入到珍汕9７B中，并获得带有该基因的１7个株系。陈志伟等［3０］成功地将Pi-2从供体材料51７3导入到迄今广泛使用的雄性不育保持系珍汕9７B中,获得了一批携有Pi—2的珍汕9７B近等基因系。在稻瘟病抗性基因聚合方面，刘士平等［31］研究发现多个抗性基因聚合后，并不简单地表现为单个抗病基因的抗谱之间的简单累加，而是抗性基因之间表现为极显著的基因互作，使其能够抵抗单个抗病基因不能抵抗的生理小种，使得基因聚合后抗谱拓宽、抗性增强。何月秋等［3２］利用分子标记辅助选择方法培育出ＢL13(Pi—1、Ｐi－３)，BＬ2３(Pi-２、Pｉ-３）和ＢL123（Pｉ—1、Pi－2、Ｐｉ—３）的近等基因累加系。Hitｔalmａnｎi等［3３］用MAS对水稻稻瘟病抗性基因Ｐi-１、Ｐｉ－z5和Ｐｉ－ta进行累积,含有Pi-z5的2个或3个抗性基因的聚合比单独存在时抗性增强,能感染单个基因的兼性生理小种不能侵染抗性基因累加的品系，说明非等位基因有互补作用。陈学伟等［３4］通过对地谷，ＢILｌ，Pi－4号等三个分别含抗病基因Ｐｉ—ｄ(t)、Pｉ－b、Ｐｉ-tａ的稻瘟病抗性材料与Ｇ46B聚合杂交，并利用抗病基因连锁的分子标记对杂交后代进行辅助选择,在聚合杂交的F２代及ＢｌＣl代群体中共获得了l5株含Piｄ、Pi-b、Pi-ｔa等三个抗稻瘟病基因的材料,该研究结果表明利用分子标记可快速、有效地实现多个抗病基因的聚合，大大提高水稻抗病育种的效率。对于稻瘟病抗性QＴL位点虽已有不少定位的报道,但未见将其应用于育种的上的报道。２.2抗白叶枯病的MAＳ目前已鉴定和定位的白叶枯病抗性基因达３0个.如章琦等［35］从我国普通野生稻中鉴定出一个新的白叶枯病抗性基因Xa—2３（t），研究结果表明Xａ-２3（t）是迄今已知基因中抗谱最广,抗性导入效应很强的一个完全显性的全生育期抗性基因，并初步将该基因定位于水稻第11染色体SSR标记ＯSR０６和RM２２4附近，图距分别为5.3cM和２7.7cＭ。此后,潘海军等［３6］用Xa-23的近等基因系CＢＢ2３及其感病轮回亲本JＧ30构建了包含2562个单株的F2作图群体。通过分析5７1个感病单株,找到2个新的与Ｘa2３基因连锁的SSR标记RM18７和RM２０6,它们与Ｘa23之间的遗传图距分别为7．１ｃM和1。9ｃM.通过筛选120０个RAPD引物,获得2个与Xa23基因连锁的RAPＤ标记ＲpｄH5和RpdＳ118４,与Ｘa2３之间的遗传图距分别为7．0ｃM和7．6ｃM;王春连等[3７］将Ｘａ23定位于两个EＳT标记Ｃ189和CP02662之间,图距分别为0.8和1．３ｃM。高东迎等［38］利用RAPＤ标记对从体细胞突变体HX—3中鉴定出的抗水稻白叶枯病新基因Xａ-2５（t）进行了研究,在306个随机引物中,两个引物S1269和Ｓ1327在亲本和抗感池之间表现多态性。用这两个引物对龙特甫A和ＨX—３的F２群体的１１4个单株进行连锁分析,表明S1269和S１3２7与Xa—2５（t)的连锁距离分别为5.3和23．7ｃＭ,且位于Xａ25(t)的两侧；Ronalｄ［39]把来自于野生稻Oryzalonｇiｓｔamｉnaｔa中的广谱抗白叶枯病基因Xa２1定位在第11染色体上，该基因与3个分子标记（RＧ１０3、RAPＤ２4８和RAPD81８紧密连锁，它们与Xａ2１之间的距离仅为１．２cM。此外，利用分子标记还定位了３0个以上与白叶枯抗性相关的抗性QTL［40－42］，这些抗白叶枯病基因(ＱTL）的定位大大促进了抗白叶枯病的分子标记辅助育种和抗白叶枯病基因克隆工作的展开。如在基因定位的基础上,Ｓong等[４3]采用染色体登陆战略克隆了Xa-21，Yosｈiｍurａ等[４4]采用典型的定位克隆战略克隆了Ｘａ－１，已克隆的抗白叶枯病基因还有Xa5和Xa26。目前，成功应用于育种的抗白叶枯病基因只有Ｘa－4，Xa-５,Xa-13，Xa—21和Ｘa－23.应用较多的是广谱抗性基因Ｘa—21，我国多项研究先后以ＩRBB21为供体亲本，通过MAS将广谱抗白叶枯病基因Ｘa21导入明恢63,6078，R8006和9311等恢复系中，结果表明恢复系及相应杂交种对白叶枯病抗性显著增强［4５—47］。除改良恢复系外,也有利用MAＳ把Ｘａ２１渗入光敏核不育系３418S的报道［４8]。在白叶枯病抗性基因的聚合方面，徐建龙［４9]等报道聚合了ｘa５和Xa3抗性基因的晚粳品系Ｄ601、D602和D６03的抗性水平和抗扩展能力强于双亲，抗谱宽于含单基因Xa3的秀水1１.Huang等［50]用分子标记在杂交Ｆ4代将4个抗白叶枯病基因(Xa-4,Xa—5，Xa－１3,Xa—21)聚合于IRBＢ6０中。Ｓiｎgｈ[5１］将三个水稻白叶枯病抗性基因Xａ—5、Ｘａ—1３和Xa—2ｌ进行标记辅助聚合育种,获得了聚合有2个和3个抗性基因的品系,该品系在自然条件下表现了较广的抗谱，并把上述三个基因聚合到籼稻品种PR１０６中。罗彦长等[52]通过杂交、回交和自交将两个抗病基因Xa21和Xa—2３聚合到不育系中,获得双基因纯合稳定的新品系Ｒ１06B（A），所育成的不育系及保持系对中国的７个病原型代表菌株均表现全生育期高度抗病，可能会大大延长其抗性寿命。另外,邓其明等[５３］采用复合杂交结合分子标记辅助选择技术将Xａ2１、Xa23和Xa4聚合到杂交水稻优良恢复系绵恢７2５中，并利用9个白叶枯病致病菌系对其原始亲本和不同基因组合聚合后代进行了田间接种鉴定，研究结果表明Xa21、Xa23和Xa4的累加系植株对白叶枯病菌的抗性明显强于基因型为单基因植株和双基因累加系植株。除了上述5个白叶枯病抗性基因在MAS育种中获得成功应用外,还有将外源基因与抗白叶枯病基因进行聚合的报道。何光明等［5４］将抑制衰老有关的异戊烯基转移酶（ＩＰT）基因与Xa－23进行聚合，并转到93１1和E32中。在抗个白叶枯病微效多基因的利用方面也有少量的研究。如王兴春等[5５]以受微效多基因控制白叶枯病抗性的五丰占2号和主基因Xａ—５控制的IRBＢ5为材料，应用分子标记辅助选择、花药培养和回交技术成功地聚合了白叶枯病抗性主基因和微效多基因。2．３抗细菌性条斑病的MAS自60年代以来抗细条病遗传研究以来，国内外不同学者采用不同的材料和菌株得出的结论不尽相同.如张红生等[56]认为Duar和ＩR36对细菌性条斑病的抗性是由一对主效基因控制,但有人认为Ｄular［57］和ＩR3６[58]对细菌性条斑病的抗性都是由两对隐性基因控制的；徐建龙等[５７]认为Hａshikalｍi对Ｓ-１０3的抗性由２对隐性基因所控制；90IRBBN４4带有１对隐性抗性基因,Ｈａshｉｋａｌｍi和Ｄｕlar的2对基因中至少有1对是等位的,但这2对基因与9０ＩRBBN4４的1对基因均不等位.但也有不少人认为细条病抗性属数量性状遗传（唐定中等,１998）.如唐定中等［59]认为Ａcc8518和Acｃ８55８对细菌性条斑病的抗性与细胞质无关,符合简单加性模型，基因的效应为积加作用,具有较高的广义和狭义遗传力，属于多基因控制的数量性状。尽管在细条病抗性鉴定、抗源筛选以及抗性遗传研究方面已取得一些进展，但对抗性基因的数目、染色体位置、效应等方面的研究仅有个别报道。如吴为人等[60]利用一个重组自交系群体和该群体构建了一张包含22５个分子标记的连锁图,综合采用ｔ测验、CIM和MＣIM的分析结果，总共检测出了11个控制细条病的抗性QTＬ,7个QＴＬ在两年中均被检出,在所有11个QTL中，大多数抗病等位基因来源于抗病亲本Aｃc85５８,只有位于第３、4号染色体上的两个ＱTL的抗病等位基因来自感病亲本H359,各QTＬ大小效应大小相近,没发现主效基因。对细条病抗性QTL的分子标记定位为细条病的抗性ＭAS和抗性ＱＴL的克隆奠定了基础.郑景生等[6１]用中抗和高抗细菌性条斑病（简称细条病）的两个籼稻品种明恢86和佳辐占为亲本构建了F2群体,应用ＳSR标记在水稻第2染色体的RM279~ＲＭ１５4之间检测到１个与水稻细条病抗性有关的QＴL，其可解释遗传表型变异的13.7％，其加性效应为０。9576，来自抗病亲本佳辐占。陈采红等[６2]定位了一个来源于Ｄular的抗性QＴL位点，该位点位于１１号染色体,与分子标记RＭ１2０和RM441连锁.由于有关水稻细条病抗性基因定位的研究极少，在利用MAS技术在育种中的应用也只处于探索阶段。陈志伟等［6３]筛选了与3个效应较大的抗细条病QTL连锁的SSＲ标记,并应用于把高抗细条病的品种Aｃc8558中的抗病基因导入到高感细条病的品种珍汕９７B中的回交育种中。通过4次回交和1次自交，育成了５个遗传背景基本上与珍汕9７B相同,导入了来自Acc8５５8的不同抗病区段的株系。该研究证明了将标记辅助选择技术应用于旨在改良单个数量性状的回交育种的可行性。3。MAS存在的问题3.1在单个质量性状的改良上优势不强目前对于质量性状的MＡＳ技术体系已日趋完善，并在育种上取得了很大的成就，培育和改良不少杂交稻亲本和组合。但在育种实践中，发现该技术在单个质量性状的改良上并不比传统的选择方法有明显优势；主要是因为1)必须要有于目标基因紧密连锁的分子标记,才能进行MAＳ;2）其程序相对繁琐，对实验的仪器和技术有较高的要求;３)育种成本较高对。3.2对数量性状的改良还很少对多基因控制的重要农艺性状，由于QTL在遗传上的复杂性、背景依赖性以及与环境的复杂互作,现有的ＱＴＬ定位成果很难直接用于指导分子标记辅助选择育种，因而对数量性状的MＡS进展较为缓慢。4．展望4。1增强在持久抗性上的应用水稻生产实践中，由于抗性品种的单一化、主栽品种的遗传同质性、病原菌的复杂性和易变性等特点,常造成抗病品种在推广种植3－5年后丧失抗性,引起病害暴发和流行防止水稻品种抗病性丧失。提高水稻品种抗性持久度的主要措施应是尽可能地防止病原菌产生新的致病小种或防止新的优势小种出现。在目前的技术条件下，避免病原菌产生新的致病小种或新的优势小种可以有两种策略,一个是抗性基因聚合（genepｙramｉｄiｎg），另一个是抗性基因混合(ｇeneｍｉxｉｎg).而MＡS技术已在抗性基因聚合的应用上表现出较强的优势.目前已有多个研究表明，ＭAＳ技术可以克服用传统方法进行基因聚合表型鉴定的困难，快速地将多个抗病基因聚合，培育出持久抗性品种。同时利用杂交稻的抗性可以来自父本或母本中的任何一方,通过MAＳ技术可以较容易地把不同显性抗稻瘟病基因分别导入杂交稻的两亲本中，再通过携有不同抗性基因的两亲本配制杂交稻组合，配制出的杂交稻同样可以聚合两个或多个抗性基因。从育种技术来讲，往杂交稻中分别聚合２个和4个显性抗病基因与往常规稻中导入１个和聚合2个抗病基因是一样的。因此,建议可将MＡS技术应用于杂交稻亲本的抗性改良上.４。2将ＭAS技术提高到分子设计育种的高度随着分子遗传学的不断发展，分子标记技术和辅助选择育种技术的不断完善,将有利于更多的重要农艺性状ＱＴL被精细定位和克隆，利用MＡS技术将有效地改良水稻的产量、品质和抗性,特别是有利于成簇分布的有利基因的聚合,使该技术成为分子设计育种时代有利工具。参考文献袁隆平.我在杂交水稻方面所做的工作[J］。中国科技奖励。20０1,９(１）：１4－１9。徐雍皋,徐敬友．农业植物病理学［M］．江苏科学技术出版社。19９5．危文亮，赵应忠.分子标记在作物育种中的应用［J］.生物技术通报，２000，(2）1２-１６。李海渤。分子标记辅助选择技术及其在作物育种上的应用(综述）[Ｊ］.河北职业技术师范学院学报,2０02，16（４）：6８－７2.HosｐitａlF＆ＣharcossetA.Markeｒ—asｓｉstedintroｇｒesｓｉonofｑuaｎｔitａtivetrａitlｏｃi[Ｊ］．Genｅｔｉcｓ,1997，１4７：１4６９—1485.方宣钧，吴为人，唐纪良．作物DＮＡ标记辅助育种[Ｍ］。科学出版社,2001.YoungND&SＤTaｎksｌｅy.RＦLPaｎａlｙｓisofthesizｅofcｈromｏｓomａlsegｍｅｎtsrｅtainedarｏｕndtｈｅTｍ－2lｏｃuｓｏｆtomａｔodｕringbackcroｓｓbreeｄiｎg［Ｊ］．TheoｒAｐpｌＧeｎet，１989，７７：3５3—3５９.李晓方，毛兴学，邢丹英等.水稻稻瘟病抗性基因研究综述(英文)[J]。分子植物育种,2０03，1（５）：７25－73０．ZhuM,ＷangL，aｎdPａｎQＨ．Identｉficａｔioｎanｄchａｒａcｔeｒｉzaｔioｎofａｎewblastｒesistａncegeneloｃatｅｄｏｎricecｈｒomｏｓｏmｅ１ｔhrｏuｇhliｎkaｇeaｎddifferｅnｔｉaｌａnaｌyｓes[Ｊ］。Ｐhytｏpａｔholｏgy，２0０４,94：5１5-5１9。YｕＺＨ,MaｃkiｌｌＤＪ，BonｍanJM，eｔaｌ．TａggiｎggｅｎesforblasｔrｅsｉstanceｉnriｃｅvialinkaｇetoRFLＰmarkers[J］．ThｅｏreticalanｄAｐpliedGenetiｃs，1９９1，８１：４71-476．MewＴV,ＰaｒcoaS，ＨｉtｔalmａniＳ，ｅtal.Fｉneｍappｉｎgofｍajｏｒgeneｓfoｒblａstｒeｓistaｎｃeiｎrｉce［J].RGＮ，1994，1１，1２６-12８。刘士平.利用分子标记辅助选择改良珍汕97对稻瘟病的抗性．硕士学位论文.武汉，华中农业大学，２002.吴金红,蒋江松等。水稻稻瘟病抗性基因Ｐi—2（t）的精细定位[J]．作物学报,２０02，2８（4）：５0５—５09．ＷａngGＬ,MackillDJ,BｏmmoｎJM,etaｌ.RFＬPｍaｐpｉngｏftｈegenｅsconferriｎgcompｌｅｔeａndｐaｒtialｒesistancｅｔobｌasｔiｎadurabｌyreｓistanceｃｕltiｖar[Ｊ].Ｇenｅｔｉcs,1994，136:1421-１431．NaｑvinＩ，BｏnｍaｎjＭ，ＭａｃkillDＪ,ｅtａl.IｄenｔｉfｉcａtionofＲＡＰDmａｒkerslinkedｔoamajｏｒgｅneforｂlａstresiｓtａｎｃeｉnrice［J］,Moleｃulaｒbｒeeding，1９95，1，341-３48．ZｈeｎgKＬ，ＱianHＲ，ZhuangＪＹ。TaggingｒicｅｂlａstｒesｉstａnceｇenesviａDNAMarkｅr［Ｊ]。ACTAＰhytopatholｏgicaSINICA，１９９5，２5（4），３07—313.PanQＨ，HuZD，TaｎｉｓakaT，etａl．FiｎeMaｐpinｇｏfｔｈeBlastReｓｉstａｎceGenePi１５，LinkedtoPｉiｏnRiceCｈromosoｍe９［J］．ActａＢotaｎicaＳｉnｉcａ，２0０３，4５(7）：871－８７７。TaｂｉeｎE，LｉZ，ＰaterｓｏｎH,etal。MaｐpingQＴＬsfoｒfiｅldｒeｓｉsｔanｃｅtoｔhｅriｃeｂlａstｐaｔｈogenａｎdevａluａｔingｔｈｅirｉndｉviｄualanｄcoｍbinedutiｌityｉnｉmpｒoveｄｖariｅties［J]。Theoｒｅticalaｎdａpｐlieｄｇeneｔｉｃｓ，２００2，1０5，pp.3１3—３２４．SａｌｌａudC，ＬｏriｅｕxM,RouｍｅｎＥ，etａl.Ideｎｔifｉcatｉoｎoｆｆｉvｅnewblastｒesｉstａnｃｅｇeneｓintheｈighlyｂlａｓｔ-rｅsｉstaｎｔrｉcevarｉｅｔyIR64uｓingaQTLｍａppｉｎgsｔratｅgy［Ｊ]。Theｏｒetiｃalandapplieｄgeneｔｉcｓ，２０03,106,pｐ.794—803．ＦｕkuｏkａS,ＯｋunｏK．QＴＬanａlｙsｉsforfiｅｌdresiｓtanｃｅｔｏriceblaｓtｕsingRＦLPｍａｒkeｒs[J］，RGN,1997，１4,98-9９.ＣheｎＨ,ＷaｎgS,ＸingY,etal.CoｍｐaraｔｉvｅaｎaｌｙsesofgeｎｏmｉｃlｏｃationｓaｎｄracｅsｐeｃificitｉesofｌｏciｆorｑｕantitａｔｉvｅrｅsｉsｔanceｔoPｙriculariagｒｉseainriｃeａｎｄbarley［J]。ＰrocｅｅdｉｎgsoftheＮatｉonalＡｃadeｍyｏｆSｃieｎｃesｏｆthｅUniteｄStateｓoｆAmｅrｉｃa，20０3。樊叶杨,吴建利，庄杰云等。应用候选基因定位水稻抗稻瘟病ＱＴL［Ｊ].中国水稻科学,2001,１５（4)：253～25６ＧregｏｒｙTB,ＷuKS，ＬｅoｎnａrdF，ｅtａl．AsiｎgｌｅaｍinｏａcｉddiffｅｒencｅｄｉsｔingｕishｅｓrestrictｉoｎａndsuscepｔibｌealliｅｓoftｈeriｃeｂｌａstresisｔancegｅneＰｉ—tａ［Ｊ］。PlａｎtＣell，2００0,12：２0３３-２045。ＷaｎgZＸ，YａnoM，YaｍａnonｃhｉU,etａｌ。ＴhePｉ－bgｅｎeｆorricｅblaｓｔrｅｓistancebｅｌｏｎgstothｅｎｕｃｌeoｔideｂindingａndlｕcｉne－ｒichrｅpｅａtｃｌａsｓoｆpｌａntdiｓeasｅresistanｃｅｇｅｎes[J]。TheＰlantJ，1９99,1:55-６4.ＱuSH，ＬｉuGF，ZhoｕB.TｈeBroａｄ-SpectrumＢlａｓtＲesistａnceＧｅｎePｉ9EncｏdesaNucｌeoｔiｄｅ－BｉndiｎｇSitｅ–Lｅucine—RiｃhＲｅｐeａtＰroteｉnandＩｓaＭｅｍbeｒofａＭulｔigｅｎeFaｍｉlｙｉnRicｅ[J］。Geneｔics,2006，17２：1901-1９14.SharｍａTR，MaｄhavＭS,SinghBK，etal．High-ｒｅｓoｌutionmａｐpinｇ,cｌoningaｎdmolｅｃularｃhａraｃｔerizatｉｏｎoｆtｈｅPi-khgenｅofrｉcｅ，ｗhiｃｈconfersｒｅｓｉstａｎcｅtoMagｎapｏｒtｈeｇriｓea[Ｊ]．ＭolｅcｕlａｒGeneticsandGenｏmｉcs,2０05,２７4（６):56９-５78.李仕贵，王玉平,黎汉云等.利用微卫星标记鉴定水稻的稻瘟病抗性［J］．生物工程学报，2000，16（3)：３２４-３２7。HiｔtalmaniＳ,ＭeｗＴ，FoｏｌａdMＲ，eｔaｌ．IdeｎtifiｃａtionoｆblastrｅsistanｃｅgｅneＰｉ－2(t)ｉnasｅｇrｅtｇatｉngｐoｐulationofｒicｅ［Ｊ］。ＴheｏrApplGenet,1９95，91：9－１４。LiｕＳP,LｉX，ＷangCY，eｔａl.ImprovemenｔｏｆＲesiｓtanceｔｏRiｃeBlａｓｔinＺheｎshａn９7byMolecuｌarMaｒkeｒ-aidedSelectioｎ[J]．ＡctaＢｏtａｎicaSiｎｉca２０0３,45（１1):1346-135０．陈志伟，郑燕，吴为人,赵长江．抗稻瘟病基因Pi—2(t）紧密连锁的SSR标记的筛选与应用［J］．分子植物育种,2004，002（0０3):３21—32５.刘士平，李信，汪朝阳，李香花，何予卿．基因聚合对水稻稻瘟病的抗性影响[J].分子植物育种,2003，０01（００1）：22－2６.何月秋,唐文华．水稻抗稻瘟病遗传研究进展［Ｊ]．云南农业大学学报，20００，0１5（004）:３71-375．ＨittalｍａｎｉＳ,ParcoA，MewTV,ｅtal.FinｅｍappingａndDNAmａｒker－asｓisteｄpyramidingoｆtheｔhｒｅemａjorｇenesforblａstresｉsｔaｎcｅｉnｒｉｃｅ［Ｊ]。TheｏrAｐｐlＧenet,200０，1０0:１１２1－1128．陈学伟，李仕贵，马玉清等．水稻抗稻瘟病基因Pi－d（t)、Pi-b、Ｐｉ—ta２的聚合及分子标记选择[J］.生物工程学报,２００4,２0（5）：70８—7１4．章琦，赵炳宇，赵开军等。普通野生稻的抗水稻白叶枯病（Xantｈｏｍonaｓｏryzaepv。oryｚaｅ）新基因Xa—2３(t）的鉴定和分子标记定位［J]。作物学报，2０0０，26（５）:537-5４2。潘海军,王春连，赵开军等。水稻抗白叶枯病基因Ｘa23的PＣＲ分子标记定位及辅助选择［J］。作物学报，2003,２9(4）:5０1～5０７。王春连，戚华雄,潘海军等.水稻抗白叶枯病基因Xa2３的EST标记及其在分子育种上的利用［J］.中国农业科学,20０5，３８（１0):19９６—20０１高东迎,许志刚,陈志谊等。体细胞突变体HＸ3抗水稻白叶枯病基因的鉴定［Ｊ］.遗传学报，２０0２，29(2)：1３8~14３.RoｎaldPc,AlbａnoＢ,ＴａｂｉｅnRetal。Genｅticaｎdphyｓicalanaｌｙsｉｓoｆｔhericｅbaｃterialblｉｇｈｔｒeｓｉｓtancelocus，Xａ21［Ｊ］。MｏｌGenGeｎet，1992,2３6:113－１2０。RaｍａｌingamＪ,ＫukreｊaＫ，ChittoorJM，eｔａl.Caｎdidatedefｅnsｅｇeｎesfｒoｍrice，bａｒley，anｄmａizeandｔheｉrassoｃiａtｉoｎwithqｕａliｔatｉveａndquａｎtiｔａtiveｒｅｓistaｎｃｅｉｎｒicｅMoleｃularｐlaｎt-microbeinteracｔｉoｎs[J］．MPMI，20０3，１6，pｐ．14－2４.LiZＫ,ＬuoLJ,MeiHW,eｔal．A‘dｅfeaｔｅd'rｉceresｉｓtanｃegeneａｃtｓasａQＴLagainsｔaviｒuleｎtｓtｒａiｎofＸaｎｔｈｏmonasorｙzａepｖ。oryｚａe［J]。Ｍｏlｅｃulａr＆GenｅralGenetｉcs，199９,26１（１):５８—63.梅捍卫,罗利军，王一平等.水稻对白叶枯病Ｘanthｏmｏnasoｒｙzaｅpv。oryzaｅ水平抗性的数量性状位点（QTL)定位[J］．遗传学报，1999，4:34５-3４9。SｏngWY,WangGＬ，CｈenLL,etａｌ.Aｒｃepｔorｋiｎase-likeproｔeiｎｅｎcodedｂｙthｅricedisｅaseｒisisｔaｎcegｅnｅ，Xa2１［Ｊ］.Sｃieｎce，199５，２70；1８04—180６。ＹoshimuｒaＳ，YａmanｏucｈｉＵ，ＫａtａｙoseYeｔal.ＥｘｐreｓsｉonofXａ１，ａｂａcｔｅriａlbligｈｔｒeｓｉｓｔaｎｃegeｎeinriｃｅｉsindｕceｄｂyｂactｅrｉaｌinocuｌａｔion［J］。ＰrocＮatｌＡｃadSｃiUSＡ，19９８,９５：166３-166８。薛庆中，张能义，熊兆飞等.用分子标记作辅助选择育成抗白叶枯病杂交水稻新组合［J］。云南大学学报（自然科学版)，199９，２1：1８7。ＣｈenS,ＸuＣG,ｅtal。Improvｉngbacteriａlblightresｉｓｔanceof‘6０7８'ａneliteresｔｏrｅｒｌiｎeoｆhｙｂrｉdｒiｃｅbｙｍolｅcularｍａrkｅr－aｓｓi