总大肠菌群方法验证方法证实报告

工程名称： 生活饮用水 总大肠菌群方法名称： 微生物指标总大肠菌群多管发酵法GB/T5750.12-2006验证单位： 安阳协力环境检测4Ｆ报告编写人：报告日期： 年月 日一、试验室根本状况

注：参与验证人员需要生疏仪器构造、原理，娴熟操作仪器，能独立完成整个分析过程。姓名性别年龄注：参与验证人员需要生疏仪器构造、原理，娴熟操作仪器，能独立完成整个分析过程。姓名性别年龄职务或职称所学专业从事相关分析工作年限张鑫男32初级工程师应用化学8关少坤男23化验员计算机1魏悦女23化验员社会体育1仪器名称仪器厂家、规格型号仪器编号仪器名称仪器厂家、规格型号仪器编号性能状高压蒸汽灭菌器上海申安医疗LDZX-50KBSAYXL/YQ-16〔计量/校准状态、已校前处理仪器、设备生化培育箱北京东联哈尔HPS-200AYXL/YQ-10已校药品冷藏柜中科美菱YC-395LAYXL/YQ-17已校电子天平赛多利斯SQPAYXL/YQ-11已校器、设备生物显微镜宁波永光学N-125AYXL/YQ-06已校注：仪器包括采样、前处理、分析过程涉及到的全部仪器。名称厂家、规格有效期名称厂家、规格有效期开标准溶液、考物质无蛋白胨乳糖磷酸氢二钾琼脂蒸馏水伊红水溶液美蓝水溶液结晶紫乙醇乙醇草酸铵水溶液碘碘化钾沙黄二、方法原理及证明内容1适用范围生活饮用水及其水源水中总大肠菌群的测定2使用仪器设备生化培育箱药品冷藏箱电子天平生物显微镜3乳蛋白胨培育基：称取乳糖蛋白胨干粉培育基23g1000ml蒸馏水中，家人煮沸至完全溶解，分装有倒立发酵管试管中，每管10ml，115℃，20min46g1000ml10mL,115℃,20mi37.5g1000ml水中,加热煮沸至完全溶解,121℃,15min8.5g1000ml,12℃，15min革兰氏染色液4方法步骤及条件验证用菌株及菌种要求50验证样品制备18~240.851mL100-1000cfu10mL90mL10~100cuf。试验操作1mL1mL,9mL1:1010mL10mL1mL10mL1mL1:105151mL比照管,36℃±124±2h试验结果推断依据乳糖蛋白胨培育管未产气产酸,判该管未检出总大肠菌群;假设产酸产气,应取发酵管中的培育物一环分别接种于伊红美蓝琼脂平板上,培育18-24h染色、镜检和证明试验。紫黑色、不带或略带金属光泽的菌落:淡紫红色中心较深的菌落。经上述染色镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌,同时接种乳糖蛋白胨培育36℃±124±2h,有产酸产气者,即报告总大肠菌群阳性。总大肠菌群最可能数的报告MPN100ml菌群的MPN样品编号样品编号样品名称初发酵复发酵镜检EMB平板分别结果MPN/100mlA1加菌液的461010.11010.11010.11010.1+++++++++++++--+--+--+--+--+--+--+--+--+--+--+--+--+--+--+--样品样品编号样品名称结果MPN/100ml空白A2空白比照<2初发酵复发酵镜检EMB平板分别1010.11010.11010.11010.1------------------------------------------------------------样品编号样品编号样品名称结果MPN/100ml空白A1空白比照<2样品编号样品名称结果MPN/100mlA2加菌样品编号样品名称结果MPN/100mlA2加菌液的110初发酵复发酵镜检EMB平板分别1010.11010.11010.11010.1+++++++++++++--+--+--+--+--+--+--+--++-++-++-++-++-++-++-++-初发酵复发酵镜检EMB平板分别1010.11010.11010.11010.1------------------------------------------------------------样品样品编号样品名称初发酵复发酵镜检EMB平板分别结果MPN/100ml加菌加菌A3液的941010.11010.11010.11010.1+--+--+--+--+--+--+--+--+--+--+--+--++++++++++++++++++++++++初发酵复发酵镜检EMB平板分别1010.11010.11010.11010.1------------------------------------------------------------样品编号样品编号样品名称结果MPN/100ml空白A3空白比照<2综上所述，依据本方法验证明验，可得出以下结论：本试验室的证明试验符合生活饮用水标