几丁质酶-蛋白质化学

天然含钙几丁质酶（PSC）的纯化及表征

赵广华原因?溶解性差食品组分干扰吸收途径单一补Ca天然？植物源资源？新型补钙制剂研究背景(PSC)几丁质酶的结构与分类——Collinge,D.B.etal.Plantchitinases.PlantJ1993,3(1),31-40.——Rao,D.H.,GowdaL.R..J.Agric.FoodChem.2008,56,2175–2182.粗纤维：58.76%粗脂肪：18.22%粗蛋白：12.30%总糖：9.54%还原糖：7.27%矿物质元素（μg/g）：

结果与分析(PSC)KMgCaNaFeZnMnCu103003250300021312853.8234.5——李志西等．中国野生植物资源．1994（03）：11-14．阴离子交换层析图谱凝胶过滤层析图谱SDS图谱泳道M：标准蛋白Marker泳道1：纯化的PSC30kDa一、PSC的分离纯化结果与分析(PSC)——SEC——MALDI-TOF-MS天然PSC的分子量为29,388Da二、PSC性质表征结果与分析(PSC)PSC和几丁质酶有着~70%的序列同源性。和其它同源蛋白质相比，PSC含有21个酸性氨基酸残基，数量最多。等电点：4.60植物源Chitinase！三、PSC结构表征——基因克隆α-helix：29%β-sheet：18%random：53%三、PSC结构表征结果与分析(PSC)——CD光谱α-helix：30.77%β-sheet：19.05%random：50.18%≈三、PSC结构表征结果与分析(PSC)粉色：α-螺旋黄色：β-折叠蓝色：无规则卷曲绿色：酸性氨基酸红色：活性位点(βα)8折叠桶必需氨基酸（Eaa）PSC中Eaa（mol/molPSC）Eaa摩尔比（%）PSCGSGSBGThr259.163.014.50Leu238.428.328.60Ile155.495.064.30Val134.767.165.60Phe114.033.775.70Lys82.932.004.50Trp51.83--Met20.731.411.20总和10237.3630.7334.4PSC中必需氨基酸组成分析与葡萄籽球蛋白（GSG）、大豆球蛋白（SBG）比较四、PSC营养成分结果与分析(PSC)PSC和葡萄籽球蛋白（GSG）中必需氨基酸组成与FAO/WHO推荐量的比较必需氨基酸PSC（mg/g）GSG（mg/g）FAO/WHOpatternAminoacidscoresPSCGSGThr102.6617.61234.460.76Leu104.0075.58591.761.28Ile67.82842.91302.261.43Val52.5053.95391.31.38Phe+Tyr155.4784.75384.092.23Lys41.3711.42450.920.25Met+Cys35.3514.66221.610.66总和559.17300.882562.181.18>四、PSC营养成分结果与分析(PSC)金属元素分子量Mw摩尔浓度（μmol/L）金属/PSC（mol/mol）Mg240.42±0.150.32±0.11Ca4014.76±0.3711.26±0.28Cr520.00±0.000.00±0.00Mn550.00±0.000.00±0.00Fe570.00±0.000.00±0.00Co590.00±0.000.00±0.01Ni600.01±0.000.00±0.00Cu630.04±0.000.03±0.00Zn660.00±