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医学微生物学问答题(每小题10分,共100分)1、什么是培养基?分为几类,主要用途。培养基(MediUm)是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。不同培养基可根据实际需要,添加一些自身无法合成的化合物,即生长因子。有些微生物,如自养型微生物,不需要碳源,所以上述物质只具有一般性。一、培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类.(1)固体培养基.是在培养基中加入凝固剂,有琼脂、明胶、硅胶等.固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面.(2)半固体培养基.是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态.可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面.(3)液体培养基.液体培养基中不加任何凝固剂.这种培养基的成分均匀,微生物能充分接触和利用培养基中的养料,适于作生理等研究.常用于微生物增殖和富集.发酵工业通常使用该类培养基.二、按照培养基的成分来分,可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类.(1)合成培养基.各种成分完全是已知的各种化学物质.这种培养基的化学成分清楚,组成成分精确,重复性强,微生物在这类培养基中生长较慢.一般用于特定微生物的培养和鉴定.(2)天然培养基.由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌.这类培养基的化学成分很不恒定,也难以确定,但配制方便,营养丰富,培养效果好.一般用于微生物的增殖和富集.(3)半合成培养基.在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基.这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要.一般用于特定类别微生物的增殖和富集.通常在菌种选育和工业生产中使用.2、人工培养细菌的实际意义?(一)在医学中的应用.细菌的鉴定和研究:对细菌进行鉴定,研究其形态、生理、抗原结构、致病性、遗传与变异等生物学性状,均需人工培养细菌才能实现。.细菌性疾病的诊断和治疗:细菌感染引起的疾病,常须从患者体内分离出病原菌才能确诊。同时对分离出的病原菌作药物敏感试验,帮助临床选择有效的药物进行治疗。.生物制品的制备:人工分离培养所得的纯种细菌及其代谢产物,可制成疫苗、类毒素、诊断用标准菌液,或经类毒素、纯种细菌免疫动物后制备抗毒素及诊断血清,用于传染性疾病的诊断、预防与治疗。.细菌毒力分析及细菌学指标的检测:人工培养细菌后,再用免疫学和其他方法检测细菌的毒力因子,并配合动物实验来鉴定细菌的侵袭力和进行毒力分析;也可通过定量培养计数等,对饮水、食品等的微生物学卫生指标进行检测。(二)其他方面的应用.在工农业生产中的应用:利用细菌的培养和发酵,可提纯精制出抗生素、维生素、氨基酸、醇类、味精等产品,还可用于石油脱蜡、污水处理、制造菌肥等。.在基因工程中的应用:由于细菌繁殖快,容易培养,故常用细菌作为基因受体细胞。如将人或动物细胞中编码胰岛素的基因重组到质粒上,再导入大肠埃希菌,就能从大肠埃希菌的培养液中获得大量基因工程胰岛素。基因工程制造干扰素、乙型肝炎疫苗等都已成功。3、常用的湿热灭菌法有哪些?主要用途。.干热灭菌法灼烧与火焰灭菌:灼烧主要是用于接种工具灭菌,在火焰上灼烧即可达到彻底灭菌,火焰灭菌通常用于无菌操作中陷试管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反复通过火焰数次,利用火焰对管口等进行灭菌,阻止管口污染,作为无菌操作过程中的辅助灭菌手段.干烤灭菌:利用热辐射及干热空气进行灭菌.一般将待检灭菌的物品如金属、玻璃、陶瓷制品包装后,均可在烤箱内干热灭菌.通常加热至160℃,保温2h可完全灭菌.但不宜超过170℃,玻璃量具易变形.降温过速,骤冷易引起玻璃器皿炸裂.干热灭菌时装入干烤箱内的物品切勿紧密,应有空隙,利于热空气流动,过密,致使温度不均,部分物品灭菌不彻底..湿热灭菌法通过加压提高蒸汽温度,用高压蒸汽灭菌,穿透力强,温度高,灭菌效果最好.注意事项:1.完全排除高压灭菌器内的冷空气.有冷空气存在时,在同一表压下所达到的温度值要低,而冷空气排出越少,温度就低得越多.在高压蒸汽灭菌时,为保证达到规定的温度,必须将冷空气完全排除.否则,虽然压力达到,而温度达不到规定的要求,灭菌就不彻底..紫外线杀菌谱广,但穿透力弱,影响因素多,杀菌效能受到一定限制.紫外线消毒效果与紫外线强度、照射时间、温度与湿度等因素有关.我国规定紫外灯照射强度距离1m处不低于70μw∕cm2.一般紫外灯使用超过100h,则应更换.表面有尘土,降低灭菌效果.紫外灯杀菌的温度以20~40℃,相对湿度40%~60%为宜.4、病原微生物包括哪几类,几型,各是什么?从大类来说的话分四大类,原虫、真菌、细菌、病毒。其中细菌又可以细分为真细菌和三体(衣原体、支原体、立克次氏体),病毒分为普通病毒和朊病毒等。,5、细菌的基本结构有哪些?各有何功能?细胞壁固定细胞外形和保护细胞不受损伤等细胞膜选择透过性细胞质新陈代谢的主要场所核区储存和传递遗传信息内含物储备营养物质6、细菌的特殊结构有哪些?各有何作用?特殊结构是细胞可变部分,不是每个都有,如荚膜、鞭毛、芽孢。特殊结构的作用:1、荚膜:1)抵抗干燥;2)加强致病力,免受吞噬;3)堆积某些代谢废物;4)贮存物。2、鞭毛和菌毛:细菌运动器官。3、芽孢:极强的抗热、辐射、化学药物和静水压的能力。7、革兰阳性菌的细胞壁,与革兰阴性菌的细胞壁有何异同,有何实际意义?G+细胞壁:肽聚糖、磷壁酸G-细胞壁:外膜、磷壁酸【意义】1、维持菌体固有的形态2、保护细菌(抵抗低渗透压环境,阻挡有害物质)3、参与菌体内外的物质交换4、与细菌致病有关(G+菌黏附、G-菌内毒素)5、具有多种抗原表位,诱发机体免疫应答6、可作为鉴别细菌的依据7、某些抗生素作用的靶位8什么是革兰染色法?其原理、结果和意义。革兰染色法由丹麦病理学家ChriStainGram于1884年创立,是细菌学中很重要的鉴别染色法,因为通过此法染色,可将细菌鉴别为革兰阳性菌(G+)和革兰阴性菌(G-)两大类。原理:G+菌:细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性屏障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔隙缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。G-菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,番红染液复染后呈红色。革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:⑴载玻片固定。在无菌操作条件下,用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀,在火焰上加热以杀死菌种并使其粘附固定。⑵草酸铵结晶紫染1分钟。⑶自来水冲洗,去掉浮色。(4)用碘-碘化钾溶液媒染1分钟,倾去多余溶液。⑸用中性脱色剂如乙醇(95%)或丙酮酸脱色30秒,革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色,革兰氏阴性菌被褪色而呈无色。酒精脱色为整个流程最关键的一步。⑹用蕃红染液或者沙黄复染30秒,革兰氏阳性菌仍呈紫色,革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌即被区别开。9、细菌生长繁殖的条件有哪些?1、温度①微生物生长最旺盛时的温度叫最适生长温度;②绝大多数微生物最适生长温度为25℃~37℃;③最适生长温度范围内,微生物生长速率随温度上升而加快;超过最适生长温度后,微生物生长速率急剧下降.原因是细胞内蛋白质和核酸等发生不可逆破害.④依据最适生长温度,可将微生物分为低温型、高温型、中温型.[问题6]若以横坐标表示温度,纵坐标表示生长速率,你能画出温度对微生物生长的影响曲线吗?2、PH①每种微生物最适PH不同;②多数细菌最适PH是6.7.5,真菌5.6.0,放线菌7.8.5;③③超越最适pH,影响酶活性、细胞膜温度性等,从而影响微生物对营养物质的吸收.3、氧依据对氧的需求,微生物分为一一好氧性微生物:如多数细菌,大多数真菌.厌氧性微生物:如某些链球菌,某些产甲烷杆菌.兼性厌氧性微生物:如酵母菌.4化学环境,一些化学药品及拮抗菌等对微生物的生长繁殖、生理生化过程产生影响.5渗透压6紫外线(辐射)10、细菌的合成代谢产物有哪些?有什么实际意义?初级代谢产物是指微生物通过代谢活动所产生的、自身生长和繁殖所必需的物质,如氨基酸、核苷酸、多糖、脂类、维生素等。在不同种类的微生物细胞中,初级代谢产物的种类基本相同。止匕外,初级代谢产物的合成在不停的进行着,任何一种产物的合成发生障碍都会影响微生物正常的生命活动,甚至导致死亡。与
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