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文档简介

化学发光技术

概念：某些化合物分子吸收化学能后，被激发到激发态，再由激发态返回至基态时，以光量子的形式释放出能量，这种化学反应称为化学发光反应，利用测量化学发光强度对物质进行分析测定的方法称为化学发光分析法。化学发光与其它发光分析的本质区别是体系产生发光(

光辐射)

。所吸收的能量来源不同。化学发光反应两个关键步骤：化学激发和发光。故化学反应要成为发光反应，必须满足两个条件：1.反应必须提供足够的能量（170～300KJ／mol）；2.这些化学能必须能被某种物质分子吸收而产生电子激发态，并且有足够的光量子产率。发光效率：指发光剂在反应中的发光分子数与参加反应的分子数之比。一般化学发光反应，值约为10－6常见化学发光剂直接：吖啶酯类三联吡啶钌间接：酶促化学发光剂

（辣根过氧化物酶---鲁米诺及其衍生物，碱性磷酸酶----AMPPD）酞箐，二甲基噻吩衍生物等（活性氧）

条件：碱性PH8.6催化剂：辣根过氧化物酶，氧化血红素等氧化剂：过氧化氢，高锰酸钾，碘等量子产率：0.05----0.15应用：检测血迹425nm470nm条件：碱性氧化剂：过氧化氢应用：标记半抗原和蛋白质不需要催化剂优点：背景发光低，干扰因素少，发光效率高，易于蛋白质联接，且不影响自身三联吡啶钌Ru(byp)3+2

电化学发光剂可直接标记抗原抗体发光剂的常见标记技术1.碳二亚胺缩合反应（酰胺键）2.重氮盐偶联法3.过碘酸钠氧化法化学发光免疫分析技术CLIA上世纪70年代中期Arakawe首先报道CLIA

是目前发展和推广应用最快的免疫分析方法也是目前最先进的标记免疫测定技术

优点：灵敏度高、特异性强、试剂价格低廉、试剂稳定且有效期（6-18个月）、方法稳定快速、检测范围宽、操作简单自动化程度高等化学发光免疫分析(CLIA)是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合。

应用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析

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