遗传学实验复习

遗传学实验复习1、 有丝分裂观察最适合的部位是？原因？分生组织植物体生长旺盛的分生组织（根尖茎尖幼叶等）都在进行着有丝分裂。该部位细胞分裂旺盛，细胞个体小，排列紧密，细胞壁薄，细胞核人，细胞质浓厚，无人液泡。2、 为什么选用玉米雄花序和蝗虫精巢作为减分材料？在高等植物花粉形成过程中，花药的某些细胞分化成小抱子母细胞，小孑包子母细胞经减数分裂形成四个单倍的小泡子，玉米在两次分列之间，有一短暂的间期，且雄花序最后形成四个等大的单核花粉。蝗虫染色体数目较少，染色体较人，易于观察。3、 孚尔根染色的时候，解离为什么是60度？温度过高会造成水解过度，使染色体不均匀着色，单细胞质着色深，反之，染色体着色浅,细胞之中可能有其他醛基存在而呈现扩散的红色，只有水解合适才能使染色体着色较深而细胞质不显示任何颜色。4、 多倍体加倍的原理和程序？自然发生：未减数配子结合，杂交使得后代染色体数加倍。人工诱发：抑制细胞分裂时纺锤体的形成，使染色体向两级的移动被阻止，而停留在分裂中期，这样细胞不能继续分裂，从而产生染色体数目加倍的核。5、 染色体组型分析的染色体形态依据是？染色体的数目，人小和着丝粒位置，臂比、次缢痕、随体等形态特征。6、 染色体组型分析的粘贴依据？对染色体进行测屋，根据测量数据将染色体配对，并依据从人到小，短臂向上，长臂向下的顺序，把染色体的着丝粒排在一条直线上。如果染色体长度相同，则以短臂长度为标准，从大到小排列，有特殊标记的以及性染色体可单独排列。7、 固定的目的？利用化学药物将生活细胞迅速杀死，使蛋白质变性，保持染色体的固有形态和结构。可增加细胞的透性和易于染色。&果蝇雌雄差异？雌性：体型大，末端尖，腹部背面环纹五节，无黑斑，腹面腹片七节，第一对足附节基部无性梳。雄性：体型小，末端钝圆，腹部背面环纹七节，延续到末端成黑斑，腹面腹片五节，第一对足跚节基部有黑色鬃毛状性梳。9、 巴氏小体的原理？巴氏小体是一种细胞核内着色较深的叫性染色质体的结构。它是由一条失活的x染色体形成的，在雌性的两条x染色体中只有一条是具有活性的。另一条失活的x染色体在间期细胞核中呈异固缩状态，形成一个约一微米的贴近于核膜边缘的染色小体，又称x染色质。巴氏小体普遍存在于雌性哺乳动物的体细胞中，在正常雄性的体细胞中没有。~1/4~10、 经过预处理和未经处理的片子有何不同？为什么？预处理的作用：为了阻止纺锤体的活动以获得较多的中期分裂相，同时染色体相对缩短，便于染色体分散和计数。11、 固定、解离、染色、烤片、压片的作用分别是什么？它们对时间有什么要求？固定：用药物将活细胞迅速杀死，使得染色体基本保持原有形态，一般为2-24小时。解离:通过对■组织细胞进行酸性水解或酶处理，町以分解细胞之间的果胶质并使细胞壁软化,细胞彼此散开，有利于染色和压片预处理：通过处理可使染色体缩短变粗，易于分散，便于进行观察，研究。染色：运用不同的试剂，使被观察部位着色，这样在显微镜就可清晰观察到想看到的结构与染色体形态。时间短染色浅，时间长染色深不易观察。烤片：使细胞固定在载玻片上。火焰上方2-3秒压片：使得材料细胞分散开来，便于观察。（时间短，细胞容易紧贴在一起不易分开，时间过长，细胞过于分散，视野内可以会观察不到细胞）12、 要得到很好的减数分裂的实验结果，取材应注意什么？要选取适当大小的花蕾，是观察花粉母细胞减数分裂的关键。13、 如何取蝗虫精巢？剪掉蝗虫吃饱，从腹部背面剖开，靠近胸节处有橘黄色团状结构，为精巢，如材料经长期保存后，其染色发喑棕色。14、 在做杂交时会出现表型分离比不符合3比1的比例，为什么？子二代的群体数目不够人，计数时的误差，培养过程中不幸死亡的后代，都可使实际的结果与预期结果不符。15、 果蝇麻醉时注意项有哪些？检查麻醉瓶内有无乙醯液体，如有必须将乙醯液体倒入瓶盖的棉塞中，否则会使果蝇致死;注意不要将果蝇粘在培养基上。步骤：先轻轻敲打培养瓶，使杲蝇落到培养瓶底部，然后将培养瓶II向下扣在麻醉瓶II上,使两瓶II对正对平，以防飞逸，用左手紧握上卞对准的两瓶门处，并用右手拍打上瓶使果蝇落入麻醉瓶里，待果蝇不动后，移去上瓶立即塞上瓶塞，将已麻醉的果蝇倒在白瓷盘上。16、 果蝇伴性遗传为什么要做正反交？因为正反交结果不同，是伴性遗传的典型特点，正反交后代雌雄性状表现是区分伴性遗传和常染色体遗传的一个重要特征。~2/4~17、 说出能够诱发多倍体的其他因素，想一想，这些因素应该怎么做这个实验。高温、低温、x射线、嫁接、切断。18、 根尖经秋水仙素处理后为什么会膨大？秋水仙素使细胞染色体加倍，致使细胞体枳膨大：秋水仙素使细胞通透性改变，吸水。19、 果蝇唾腺染色体在遗传学上有哪应用？在遗传学研究染色体结构、化学组成、基因差别表达等方面提供独特的研究材料。20、 说说染色体组型分析的意义：对于探讨人类遗传的发病原理，动植物物种间的亲缘关系等都具有重要意义。21、 为啥要用相对长度来表示染色体长度？染色体相对长度=染色体长度/染色体组总长度*100%相对长度排除了因技术原因引起的染色体短缩程度不同。22、 果蝇唾腺怎么剥取？选取发育良好的果蝇三龄幼虫放于载玻片上，加一滴生理盐水，左手持蹑子夹住幼虫末端三分之一处，右手持解剖针按住果蝇头黑点（II器）处，用力向前拉，把头部自身体拉开，这时可看见一对透明微白的长形小囊，即为唾腺。23、 处女蝇选取的意义？处女蝇为羽化后12小时内未交配的雌蝇，因雌蝇生殖器官有贮精囊，可保存犬量精子，以供后续受精，如不选取处女蝇而直接进行交配，则该果蝇町能已有其他雄蝇的精子，而使产生的后代不是所用亲本交配中产生的预期后代。24、 绝对长度得来的方法？绝对长度二放大的染色体长度(微米)*1000/放大倍数绝对长度不人稳定，这是因为预处理条件和染色体的缩短程度，难以完全相同，即使同一个体的不同细胞的染色体，缩短程度也常常不同。25、 果蝇作为实验材料的优点？容易饲养、生活周期短、繁殖能力较强、突变类型多且多数是形态特征变异、便于观察、唾腺染色体较大。26、 伴性遗传的实验原理？位于性染色体上的基因叫做伴性基因，其遗传方式与位于常染色体上的基因有一定的差别，它在亲代与子代之间的传递方式，与雌雄性别有关，伴性基因的这种遗传方式就称为伴性遗传。27、 秋水仙素诱导多倍体的原理？秋水仙素通过抑制细胞分裂时纺锤体的形成，使染色体不能向两极移动，细胞被阻止在分裂中期，这样细胞不能继续分裂，从而产生染色体数目加倍的核。若染色体加倍的细胞继续分裂，就形成多倍体的组织。~3/4~28、 三点测验的优点是什么？比两点测验更方便、准确，一次三点测验相当于三次两点测验的结果。两点测验需要三次杂交试验，其实验环境条件等因素不完全一致，而三点测验只需要一次杂交，即可避免该弊端，又能减少测量误差，可获得双交换的资料。证实了基因在染色体上是有线排列的。29、 果蝇生活史？卵一36h-幼虫一6d—蛹一6d—成虫一12h—交配一24-48h—卵30、 设计性实验：实验一植物细胞的有丝分裂染色体标本制片及观察一、 实验目的1•观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形态和变化。学会植物根尖有丝分裂装片的制作方法和技巧。二、 实验原理背景知识介绍：1882年，德国生物学家费莱明(WaltherFlemming)发现了有丝分裂现象；但从更详细的一些资料看，认识有丝分裂过程是人们在不断地对比和总结中获得的。——1841年，波兰生物学家RobertRemak)发现一个母细胞可分裂为两个子细胞； 1842年,瑞士植物学家内格里(KarlWilhelmvonnageli)观察到分裂期的染色体结构。——1848年，德国生物学家霍夫曼斯特(WilhelmHofmeisteC发现了分裂期核膜消失现彖。——1877-1882年，费莱明提出了分裂期染色体"纵向分裂"模式，并用"mitosis"表示整个细胞分裂的过程。 1884年，波兰 德国植物学家斯觉斯伯格(EduardStrasburger)用"prophase"、"metaphase"和"anaphase"表示分裂期中的前期、中期和后期。 1894年，德国解剖学家伦德加德(HenrikLundegardh)用"interphase"表示分裂间期。-至此，有丝分裂全过程就被认为划分为前期、中期、后期、末期和间期5个时期，有丝分裂全过程的描述得到了统一。有丝分裂的过程：间期：包括Gl、S、G2期。G1期，合成细胞生长必需的蛋白质、糖类和脂质等生化物质；染色质去凝集，为DNA合成做准备，因此又称DNA合成预备期或复制前期。有些细胞暂时离开了细胞周期进入GO期，停止分裂；一旦得到信号指令便又会返回细胞周期，分裂增殖。GO期细胞多发生于G1期,人体绝人多数细胞是处于GO期。像肝细胞，当它受到外部因素刺激后，如切割掉部分肝，便可使细胞从GO期返回到细胞周期中。~1/5-S期，DNA复制，组蛋白合成，复制后两份DNA分子在S期货或S期后不久，通过黏结蛋白(cohesion)相互黏合。G2期，RNA和蛋白质合成，特别是微管蛋白大量合成，为M期纺锤体装配提供原材料。同种细胞，细胞周期时河长短因生理活动、营养状况等差异而有所不同，不同种类细胞之间，细胞周期时间短的差别很人，主要是G1期不同，而S期、G2期和M期时间相对恒定，尤其是M期更为恒定，常仅维持0.5小时。在蚕豆根尖细胞的有丝分裂周期中，G1期为5hr,S期为7.5hr,G2期为5hr,间期共长17.5hr,而M期全长只有2hr。前期(prophase)当染色体呈町见的细线时标志着细胞分裂开始，进入细胞分裂前期。•每个染色体两条染色单体开始螺旋化、卷曲；•着丝粒尚未分裂，因而螺旋、卷曲的两条染色单体由同一个着丝粒联结；•核仁、核膜逐渐解体，前期结束时核仁消失。中期(metaphase)标志:核仁、核膜消失•染色单体进一步螺旋、收缩直至呈最短、最粗的状态；•纺锤丝形成一个三维的结构，称为纺锤体(spindle)；•纺锤丝与染色体的着丝点附着，并牵引染色体，使其着丝粒均匀分成在垂直于两极的一个平面上(赤道板或赤道面)染色体臂自由分布在赤道面的两侧。•染色体形态稳定，排列均匀，是研究染色体形态和数目的最佳时期。后期(anaphase)后期就是从着丝粒分裂到染色单体到达两极的过程。•由于纺锤丝的牵引作用，着丝粒发生分裂；•每条染色体的两条染色单体，分别由纺锤丝拉向两极：•两极都具有相同的染色(单)体数。末期(telophase)染色体到达两极后：•核膜、核仁重建；•染色体解螺旋化，呈松散状态：•细胞质分裂，细胞板形成。植物根尖的分生细胞的冇丝分裂，每天都有分裂高峰时河，此时把根尖固定，经过染色和压片，再置放在显微镜卞观察，可以看到人量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。三、 实验材料蚕豆（Viciafaba2n=12）~2/5-洋葱（Aillumcepa2n=16）大蒜玉米四、 实验器具和药品用具：显微镜、载玻片，盖玻片，指管，试剂瓶，滴瓶，蹑子，解剖针，滤纸、铅笔、橡皮等。药品：无水酒精，95%酒精、80%酒精、70%酒精，冰醋酸，1N盐酸、1%醋酸洋红、铁矶（硫酸亚铁）、对二氯苯或秋水仙素、*澳蔡、8-疑基座I牀。试剂配制卡诺固定液的配制：用3份无水酒精，加入1份冰醋酸（现配现用）。染色液的配制：1%的醋酸洋红染色液：将100ml45%的乙酸加热煮沸，移去火苗，徐徐加入洋红，溶解后再煮沸l-2min,冷却加入2%的铁矶水溶液5-10滴，或在煮沸醋酸洋红染色液中悬置数枚锈铁钉（防止溶液溢出），以增强染色性能。配制的染色液过滤后贮存于棕色试剂瓶中备用。0.01%-0.2%秋水仙碱溶液：先以少量95%酒精将lg秋水仙碱溶解，再加蒸饰水至100ml配成1%的母液，贮存于棕色瓶中，置冰箱内保存。用时可量取一定量母液，按比例桶释即可。对二氯苯饱和水溶液：取10g对二氯苯加蒸懈水100mL0.002mol/L的8-疑基嚨I姝水溶液：用分析天平称0.2901g8-疑基嗤咻用蒸馆I水定容于1000ml容量瓶中，在60°C下溶解后备用。五、 实验步骤（1） 取材洋葱根尖：将洋葱的鳞基，置于盛水的小烧杯上， 思考：放在25°C温箱中，待根长到2cm左右时，在上午a.为什么遗传学有丝分裂实验中经九时左后剪下摘下根尖。 常选洋葱、蚕豆、大蒜做材料？蚕豆根尖：黑暗或室温卞培养蚕豆40-50h,待根b.不同材料为什么取材时间不同？长至l-2cm时于上午10点左右剪取。 C.取材时间对实验结果有什么影大蒜： 响？玉米：（2） 预处理低温处理：将根尖放入盛有蒸馆水的指形管中，置思考：~3/5~于冰水共存的冰瓶中，然后把冰瓶放到A.不同的预处理原理是什么？0-3°C的冰箱内处理24ho B.相同材料不同处理的效果如药剂处理： 何？0.01%-0.2%秋水仙碱溶液处理2-4ho C.那种处理效果最好？对二氯苯饱和水溶液处理3-4ho对二氯苯饱和水溶液加1-2滴a-漠蔡处理3-4ho0.002mol/L的8-疑基嗤I牀水溶液处理3-4ha各种药剂处理时，注意温度不宜过高，保持10-15°C为宜。（3） 固定经过处理后的材料冲洗干净后，放到卡诺固定液中固定24小时，固定材料可以转入70%酒精中，在4°C冰箱中保存，保存时间最好不超过二个月。（4） 解离酸解：从固定液中取出根尖，用蒸馆水漂洗，再放到O.lmol/LHCI中，在60°C水浴中解离5—20mino（5） 染色将解离的材料用蒸馆水漂洗后，用吸水纸吸干，切取材料分生组织部分放入载玻片上,滴1滴1%的醋酸洋红染色液后压片。（6） 压片一个解离良好的材料，只要用蹑子尖轻轻的敲打盖玻片，分生组织细胞就可铺展成薄薄的一层，再用毛边纸把多余的染色液吸干，经显微镜检查后，选择理想的分裂细胞，再在这个细胞附近轻轻敲打，使重叠的染色体渐渐分散，就能得到理想的分裂相，要达到这个目的，必需掌握以下几点：压片材料要少，避免细胞紧贴在一起，致使细胞和染色体没有伸展的余地。用镇子敲打盖玻片时，用力要均匀，若在压片时稍不留意，使个别染色体丢失，而被迫放弃一个良好的分裂相的细胞。（7） 镜检将制片先放在低倍镜视野下，寻找典型的各时期的分裂相细胞，然后转换于高倍镜下仔细观察染色体的形态并描绘下来。（8） 计数统计四种材料比较那种材料制片最易成功（一次、两次及以上）.每种材料，不同的处理方法卞所做片子中，选择较理想的片子计数细胞分裂相。~4/5~六、作业与思考1、 制作细胞有丝分裂清晰图像1-2张，要求当堂课交给指导老师。2、 绘出你所看到的细胞有丝分裂各个时期的典型图象，并简要说明各时期染色体的行为和变化。3、 分析并比较所见何种分裂相细胞最少，何种分裂相最多？为什么？果蝇遗传性状的观察一、 实验目的观察果蝇的野生型和常见的几种突变型的主要性状，全面了解果蝇在遗传学实验中经常涉及到的遗传性状，为今后的实验奠定基础。二、 实验材料品系名称基因符合表现型野生型红眼，直刚毛，长翅，灰身白眼W白眼残翅Vg翅残缺，不能飞卷刚毛sn刚毛卷曲照檀体e体乌木色，黑亮棒眼B眼棒状，小眼数少小形翅m翅小，与腹部等长黄体体呈浅黄色果蝇的突变型影响部位突变名称基因符号性状特征染色体号数翅形残翅vg翅退化n小翅m翅小I(X)勺状翅nub2翅小似勺n翘翅cy翅后翻n眼白眼w复眼白色I(X)棒眼B复眼棒状I体色黑檀体e体色黑亮m黑体b体色黑n黄体y体色浅橙黄色I刚毛焦刚毛sn3刚毛卷曲I叉刚毛f刚毛近中部分叉I三、实验器具及试剂1、 器具显微镜；放人镜：麻醉瓶；蹑子；白瓷板；毛笔；吸水纸；呆蝇瓶；棉花；死蝇盛留器。2、 药品乙醛。突变性状果蝇部分突变性状基因符合性状特征小翅M翅膀小，长度不超过身体白眼W复眼白眼照檀体E身体呈乌木色，黑亮黄体Y全身呈浅橙黄色残翅Vg翅明显退化，部分残缺，不能飞叉毛f毛和刚毛分叉且弯曲四、实验内容1、野生型果蝇基本特征的观察野生型果蝇是指没有发生任何基因突变的果蝇品系，它具有红眼、直刚毛、长翅、灰身等特征，并且已经对其相对应基因进行了定位，常常作为果蝇杂交的亲本。2、突变型杲蝇的突变性状观察突变型果蝇与正常型野生型有明显的区别。果蝇的突变性状很多，已经育成许多纯合性的突变系。根据已知定位的基因，可选用适当的品系进行杂交遗传试验，观察和统计杂交后代的性状表现，从而验证遗传的基本规律。五、作业描述所观察到的野生型和突变型果蝇的相对特征。实验三果蝇唾腺染色体压片及观察一、 实验目的练习取出果蝇等幼虫唾腺的技术和制作唾腺染色体标本的方法。根据唾腺染色体上带纹的形态和排列识别不同的染色体，也是进一步研究和鉴别果蝇染色体结构变异的有用方法之一。二、 实验原理果蝇的唾腺细胞中8条染色体之间以着丝粒相互连结在一起形成染色盘或异染中心和同源染色体之河的假联会，经碱性染料染色后，可以观察到一个染色较深的染色盘和以染色盘为中心向外辐射出的5条染色体臂。在这些染色体臂上可以看到染色深浅不同的横纹，被称为明带和暗带，这些横纹的位置、宽窄、数目都具有物种的特异性，不同物种，不同染色体的不同部位形态和位置是固定的因此根据染色体各条臂带纹特征和各条臂端部带纹的特征能准确识别各条染色体。在染色体臂上还可看到某些带纹通过染色体的界旋、膨人形成的疏松区和巴尔比尼坏，其富含转录出来的RNA