微免病毒总论

医学微生物学许文7A208基础医学院微生物学与免疫学教研室温州医学院微生物学分类原核细胞型:细菌、四体（螺旋体、支原体、立克次体、衣原体）真核细胞型:真菌非细胞型：病毒等

HBV、HIV病毒(virus)体积小(nm)无完整的细胞结构一种核酸(RNA或DNA)，朊病毒只有蛋白在敏感的活细胞内增殖

定义：体积小，结构简单，含一种类型的核酸，只能在活的、敏感细胞内增殖的非细胞型微生物。主要特点：病毒体结构模式HIV病毒真核细胞1886年德国人麦尔证实了烟草花叶病的传染性1892年俄国人伊万诺夫斯基证实其病原是新的病原因子1896年荷兰贝叶林克给这种病原命名为virus（病毒）病毒是如何发现的？临床病毒学现状引起多种感染性疾病：临床表现多样性：轻微疾病:鼻病毒和冠状病毒引起感冒流行性疾病:流感病毒引起流感急性感染和慢性感染:急性、慢性肝炎致畸作用:孕期感染风疹病毒引起胎儿先天性心脏病与肿瘤相关：EBV，HBV，HPV

新现与重现病原体增多：SARS病毒、禽流感病毒接种人痘或牛痘预防天花琴纳给小儿接种牛痘3000BC，埃及孟非思壁画中长老患小儿麻痹症病毒的大小与形态病毒体：具有传染性的、结构完整的病毒颗粒。病毒的形态与结构病毒的测量单位——纳米（nm）。

细菌---微米20-300nm大、中、小三型微生物的大小比较葡萄球菌(1000nm）

牛痘病毒300×250nmABCDEFG立克次体450nm衣原体390nmA、大肠杆菌噬菌体

(65×95nm)B、腺病毒

(70nm)C、脊髓灰质炎病毒

(30nm)D、乙脑病毒

(40nm)E、蛋白分子

(10nm)F、流感病毒

(100nm)G、烟草花叶病毒

病毒的形态有球形、砖形、杆形、弹状和蝌蚪形等。动物病毒多为球形。球形病毒（多见动物病毒）杆状病毒（植物病毒）蝌蚪形(噬菌体)砖形病毒子弹状病毒（狂犬病毒)病毒的结构与化学组成病毒结构

基本结构（核衣壳）核心衣壳（壳粒→衣壳）包膜裸病毒包膜病毒病毒结构与化学组成核酸蛋白:

结构蛋白:衣壳蛋白包膜蛋白非结构蛋白:与复制有关的酶等病毒结构示意图核心衣壳包膜无包膜病毒有包膜病毒核心只含一种核酸，DNA或RNA除去病毒衣壳仍具有感染性的核酸称感染性核酸控制病毒的增殖、变异、毒力等性状单链(ssRNA,ssDNA)、双链(dsRNA,dsDNA)、分节段（分别称DNA病毒和RNA病毒）核酸本身能够进入细胞，启动复制病毒核心外的蛋白质层

衣壳壳粒(多肽)由一定数量的壳粒组成；分为二十面体立体对称型、螺旋对称型和复合对称型；有维持外形、保护核酸、介导感染和决定抗原性等作用。螺旋对称型20面体立体对称型复合对称型包膜包膜蛋白形成刺突包膜的作用：具有抗原性维护病毒的完整性决定病毒的感染途径介导病毒的感染化学成分：脂质和蛋白质包膜病毒不能经消化道感染脂质来自宿主细胞蛋白质由病毒基因编码--衣壳外的脂双层膜

病毒的增殖

病毒增殖条件：活细胞、敏感细胞增殖方式：复制

以病毒基因为模版，籍DNA多聚酶或RNA多聚酶复制病毒的基因组，转录、翻译出病毒蛋白，组装成病毒颗粒并释放出子代病毒。

病毒增殖方式病毒的复制周期吸附穿入脱壳生物合成组装与释放吸附穿入脱壳宿主细胞核酸游离mRNA转录翻译早期蛋白质病毒ＤＮＡ

复制mRNA转录晚期蛋白质

转译组装与成熟释放吸附

病毒表面蛋白质与细胞接触→结合→特异性吸附（病毒表面蛋白与细胞膜特异受体结合）

——决定病毒的嗜组织性非特异吸附穿入融合---病毒包膜与细胞膜融合后释放核酸：有包膜病毒吞饮---先形成吞噬小体，再释放核酸病毒体穿过细胞膜进入细胞内的过程。有包摸病毒无包摸病毒吞饮---多数无包膜病毒直接进入–噬菌体穿入penetration融合胞饮直接穿入脱壳uncoating

核酸从衣壳中释放出来的过程。

穿入胞质中的核衣壳脱去蛋白质，使基因组核酸裸露的过程

细胞溶酶体酶

脱壳酶生物合成Biosynthesis

利用宿主细胞提供的小分子物质合成病毒核酸和蛋白质不同病毒的生物合成方式不同，按照核类型分：双链DNA病毒；单链DNA病毒；正单链RNA病毒；负单链RNA病毒；双链RNA病毒；逆转录病毒早期：基因组在细胞内合成非结构蛋白（病毒复制酶及抑制细胞正常生物合成的抑制酶）晚期：根据基因组的指令在细胞内复制病毒核酸，合成结构蛋白和非结构蛋白生物合成的过程：1、DNA病毒（双链）：细胞核内合成DNA，细胞质内合成病毒蛋白早期：病毒DNA依赖DNA的RNA多聚酶早期mRNA转译早期蛋白DNA多聚酶脱氧胸腺嘧啶激酶调控病毒基因组转录的酶抑制宿主细胞生物合成的酶药物作用的靶晚期：解链正链DNA负链DNADNA多聚酶子代DNA转录晚期mRNA晚期蛋白病毒衣壳蛋白及其他结构蛋白2、RNA病毒（单链）：多数在细胞质内合成子代RNA及病毒蛋白正单链RNA病毒（有mRNA功能）：正单链RNA复制子代RNA结构蛋白（衣壳蛋白等）非结构蛋白（依赖RNA的RNA多聚酶）

双链RNA（复制中间型）药物作用的靶3.逆转录病毒（有逆转录酶，即依赖RNA的DNA多聚酶）单链RNA逆转录酶RNADNA（复制中间型）进入细胞核双链DNA整合（前病毒）子代病毒RNA病毒mRNA病毒蛋白质DNA肿瘤发生药物作用的靶逆转录病毒的合成RNA逆转录酶互补DNARNA:DNA双股DNA整合宿主细胞DNARNA

逆转录病毒的复制周期组装与释放

assemblyandrelease

装配细胞核内细胞质内核膜上胞质膜上释放

裂解细胞释放（无包膜病毒）出芽释放（有包膜病毒）装配（assembly）释放（release）无包膜病毒释放：

——一次大量释放

——致细胞破裂死亡有包膜病毒释放：

---出芽方式

——病毒核衣壳出芽时套上宿主细胞的核膜或细胞膜——细胞不死

——逐个释放病毒复制周期

装配与释放

assemblyandrelease

病毒的异常增殖与干扰现象1）病毒方面：缺陷病毒（defectivevirus

）：基因组不完整的病毒体。缺陷干扰颗粒缺损病毒不能复制，但却能干扰同种成熟病毒体进入细胞辅助病毒：辅助缺损病毒复制具有感染力的完整病毒1。病毒的异常增殖

---病毒增殖过程被切断，出现异结果。丁型肝炎病毒--乙型肝炎病毒

非容纳性细胞——顿挫感染容纳性细胞细胞条件不合适，病毒进入细胞但不能复制顿挫感染（流产感染）：2)宿主细胞方面:

宿主细胞不能为病毒增殖提供必要条件,导致病毒不能增殖.干扰现象interference

当两种病毒同时或先后感染同一细胞时，可发生一种病毒的增殖抑制另一种病毒增殖的现象产生原因

——干扰素interferon，IFN

干扰现象的意义1、非特异性免疫的构成部分——抗病毒作用2、指导正确使用疫苗理化因素对病毒的影响

从细胞中释放出来的病毒体，受到外界理化作用后，会失去感染性，称病毒的灭活。

一、物理因素：（一）温度加热50-60℃30min或100℃几秒钟即可灭活。在-70℃或-196℃条件下，可存活数月至数年。（二）酸碱度：

多数病毒在pH5-9范围内稳定，强酸强碱可灭活病毒。（三）射线：X射线、γ射线和紫外线都能灭活病毒。射线可使病毒核酸链发生断裂，核苷酸结构形式改变，影响病毒复制。二、化学因素：

（一）脂溶剂：乙醚、氯仿、去氧胆酸盐、阴离子去污剂等能使病毒包膜溶解

（二）化学消毒剂：酚类、氧化剂、卤类、醇类对病毒均有灭活作用。

（三）抗生素与中草药：病毒对抗生素不敏感；中草药对病毒有一定的抑制作用。本章小结病毒是由核酸（核心）及蛋白构（衣壳）成的非细胞型微生物。其完整形态称病毒体。严格细胞内寄生：进入特定的靶细胞产生核酸及蛋白—

复制周期出现异常（缺陷病毒、非容许细胞）、受到干扰顿挫感染病毒的感染与免疫病毒的感染病毒进入机体,并在易感染细胞内增殖的过程.病毒的感染方式

一、水平传播病毒在人群不同个体间的传播一、水平传播1、通过黏膜表面传播2、通过皮肤传播昆虫叮咬——乙脑病毒动物咬伤——狂犬病毒3、医源性传播注射、输血、拔牙——乙肝、丙肝呼吸道——流感病毒消化道——甲肝病毒泌尿生殖道—艾滋病毒

二、垂直传播通过胎盘或产道，病毒由母亲传给胎儿的方式胎盘：风疹病毒、CMV、HIV、HBV产道:HIV、HSV-II

病毒

母体

新生儿胎盘

显隐胎受先流性性儿染天产感感正胎畸死染染常儿形胎病毒在体内的播散方式局部播散血液播散神经播散病毒在感染组织增殖、扩散，而不侵入血流。脊髓灰质炎病毒水痘－带状疱疹病毒脊髓后根神经节或颅神经的感觉神经节内入侵细胞中增殖–入血–到达靶器官入侵细胞中增殖––沿神经末鞘散播至中枢神经–传出神经末鞘--到达外周组织器官流感病毒病毒感染的类型

隐性感染：不引起临床症状的感染。获得免疫；成为病毒携带者显性感染：急性感染持续性感染--由于病毒种类、毒力强弱、机体免疫力的不同，可表现不同的临床类型。引起明显临床症状的感染。病毒数量多，毒力强，机体免疫力弱

潜伏期短、发病急、病程短、愈后好

病毒数量少，毒力弱，机体免疫力强慢发病毒感染：迟发病毒感染。潜伏期长，一旦症状出现，多为亚急性，且进行性加重。慢性感染：持续存在于组织或血液中，并不断排出体外或经血传播。潜伏感染：以基因形式潜伏于一定的组织或细胞中，但不增殖（检测不出病毒，也无临床症状）；可被激活增殖，导致临床症状。持续性感染病毒持续存在于机体内。急性病毒发症感染的迟发并发症：麻疹病毒/亚急性硬化性脑炎朊粒/疯牛病病毒的致病机制一、病毒对宿主细胞的直接作用二、病毒感染的免疫病理损伤病毒的致病机制一、病毒对宿主细胞的直接作用杀细胞效应

1）阻断细胞大分子合成

2）细胞溶酶体膜通透性改变：细胞自溶

3）细胞器损伤致细胞病变作用（CPE）：病毒感染的细胞经一定时间培养后，可出现细胞变圆、脱落、坏死等现象。细胞病变效应（CPE）病毒在细胞内增殖引起细胞形态学改变。2.稳定状态感染细胞膜的改变细胞融合：多核巨细胞细胞表面出现新抗原；

形成包涵体：有些病毒感染的细胞在普通光学显微镜下可观察到胞浆或胞核内出现圆形或卵圆形的斑块状结构。不同病毒包涵体的形态、染色性、存在的部位不一，可作为诊断依据如狂犬病毒的内基小体狂犬病毒包涵体（Negribody）基因整合与细胞转化病毒的遗传物质插入宿主细胞染色体DNA上。全基因组整合；失常式整合（部分片断）细胞转化：失去接触性抑制、出现新抗原、激活癌基因

肿瘤细胞（宫颈癌、肝癌等）细胞凋亡二、病毒感染的免疫病理损伤体液免疫损伤通过Ⅱ、Ⅲ型超敏反应引起损伤

II型:肝细胞表面出现新抗原

III型:Ag-Ab复合物沉积细胞免疫损伤通过Tc细胞和Th1细胞杀伤病毒感染的细胞，同时造成组织细胞损伤病毒直接损伤淋巴细胞或淋巴器官艾滋病毒直接杀伤CD4+T细胞抗病毒免疫非特异性免疫:干扰素、NK细胞特异性免疫干扰素干扰素概念：干扰素是个体出生后，由病毒或干扰素诱导剂刺激多种细胞所产生的一种糖蛋白。种类：

Ⅰ型干扰素：α干扰素、β干扰素

Ⅱ型干扰素：γ干扰素（免疫干扰素）干扰素的产生及干扰素的作用机制干扰素的生物学活性：抗病毒、免疫调节、抗肿瘤病毒干扰素剌激干扰素前体干扰素剌激病毒增殖

被抑制干扰素的产生及抗病毒作用原理抗病毒机理：细胞受干扰素作用后，合成抗病毒蛋白（蛋白激酶、2，-5，合成酶、磷酸二酯酶）抗病毒特点广谱性、间接性、种属特异性应用IFN-α慢性乙肝的治疗非特异性杀伤不受MHC限制通过依赖抗体的杀伤作用（ADCC）不依赖抗体的杀伤作用（自然杀伤）干扰素可调节NK细胞的杀伤作用NK细胞特异性免疫体液免疫的保护作用

中和抗体：IgM,IgG,IgA

阻止病毒吸附;

依赖抗体的细胞毒作用（ADCC）：杀伤病毒感染的细胞;

激活补体细胞免疫的保护作用

Th1：释放细胞因子效应Tc（CTL）：特异性杀伤病毒寄生的细胞抗体的中和作用病毒感染的检查方法与防治原则

病毒感染的检查方法形态学观察分离培养核酸与抗原检测血清学检测

标本采集与送检：用于培养：注意时间、部位、处理、保存血清学诊断：

双份血清标本:急性期与恢复期各一形态学检测显微镜观察：电镜、光镜病毒或包涵体分离培养：动物、鸡胚、组织细胞核酸与抗原的检测:PCR血清学检测特异性抗体（IgM、IgG)；双份血清

动物接种鸡胚接种鸡胚接种的优点鸡胚接种的缺点鸡胚接种部位卵黄囊接种尿囊腔接种绒毛尿囊膜接种组织培养方法原代培养：如原代猴肾细胞等二倍体细胞株：如人胚肺成纤维细胞传代株W1-38传代细胞系：多为肿瘤细胞或突变的二倍体细胞，如Hela细胞、Hep-2细胞等核酸与抗原的检测:PCR血清学检测特异性抗体（IgM、IgG)；双份血清

血凝试验和血凝抑制试验血凝试验：血凝素＋鸡红细胞－→红细胞凝集血凝抑制试验：血凝素－抗体＋鸡红细胞－→红细胞不凝集病毒感染的防治原则病毒感染的预防主动免疫1）减毒活病毒疫苗：麻疹、脊髓灰质炎2）灭活病毒疫苗：狂犬病毒、流感病毒3）亚单位疫苗4)基因工程疫苗被动免疫病毒感染的治疗化学治疗中草药:板蓝根干扰素免疫治疗小结病毒通过水平、垂直方式在人群中传播;通过局部、血液、神经在体内扩散；不一定发病：隐性、显性（潜伏、慢发）；病毒对机体的损伤：直接杀伤（杀细胞效应、包涵体形成）；免疫病理；机体可针对病毒：非特异免疫（干扰素）、特异免疫（抗体、效应T细胞）；病毒是细胞内存活：动物、鸡胚、细胞来培养；检测核酸、抗体；预防为主掌握内容病毒的大小、形态、结构、化学组成及功能病毒复制周期及异常增殖现象（顿挫感染、缺陷病毒）病毒的概念及主要特征病毒遗传与变异病毒的干扰现象了解内容物理因素、化学因素对病毒的影响病毒的分类原则病毒体：具有传染性的、结构完整的病毒颗粒。病毒体病毒结构

基本结构（核衣壳）核心衣壳（壳粒→衣壳）包膜裸病毒包膜病毒具有传染性