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CentralLaboratoryofBiology实验六微生物液体深层培养—发酵罐的使用微生物学实验目的要求与基本原理【目的要求】1.了解微生物液体深层培养的方法和设备的使用。【基本原理】好氧微生物的生长繁殖需充足的氧。为了进行大规模的工业生产，微生物需进行液体深层培养，其氧的供给由空气系统完成，“通风搅拌”是最常用的方式。生产前，空气过滤器至罐体以及其他与罐体相通的管道、培养基都需进行彻底地灭菌。然后，控制好微生物培养所需的温度、风量、搅拌速度并接种，方可正常生产。【实验用品】1.材料：玉米粉、豆饼粉2.试剂：K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H20、红曲霉液体菌种3.仪器：小型通风发酵罐【方法步骤】1.准备工作1）培养基的配制：玉米粉5%，豆饼粉2%，K2HPO4·3H2O0.5%，MgSO4·7H200.1%，pH自然。2）检查本系统各单件设备，确保各设备能正常运行时方可开机。3）温度、pH、转速、消泡设定值的调节【方法步骤】2.空气过滤及空气管路的消毒1）慢慢打开蒸汽阀门，排尽冷凝水。2）蒸汽通过空气过滤器进入发酵罐内。3）消毒时间一般为30分钟。4）吹干空气过滤器需20分钟左右。3.空消1）排尽夹套中的水。2）排尽蒸汽管中冷凝水，使蒸汽徐徐进入发酵罐。3）空消时间一般为30～50分钟。排尽发酵罐内的冷凝水。4.加培养基液1）将培养基原液加入发酵罐内，并加水至所配培养液总量的75～85%左右。5.实消1）排尽夹套中的水。2）夹套预热：调节电机转速至150rpm左右，进行慢速搅拌。3）发酵罐内温度达到80℃左右时，排尽蒸汽管中冷凝水，使蒸汽徐徐进入发酵罐。4）当培养液温度达到95～100℃后方可停止搅拌。5）实消时间一般为30分钟。自然冷却10分钟左右。6）通冷却水进行冷却。7）当罐内温度降至70℃以下时，慢速搅动培养基。【方法步骤】6.接种1）当发酵液温度降到接种温度时即可进行接种。2）准备合格的摇床菌种。3）在接种口四周围上酒精棉。4）点燃酒精棉，拧下接种口螺母，并将其放入预先准备的盛有酒精的培养基中。5）将装菌种

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