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文档简介

实验三

食品中微生物菌落总数的测定一、实验目的学习并掌握标准平皿活菌计数（SPC）的基本原理和方法明确菌落总数测定对被检样品进行卫生学评价的意义二、实验原理菌落总数：食品检样经过处理，在一定条件下（如培基基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。标准平皿活菌计数法（SPC法）是最常用的活菌计数法将微生物细胞充分稀释到单个分散，把这些单个分散的细胞通过混菌法或涂布法使其均匀分布在平皿培养基上，培养后长出的菌落肉眼可见，每个菌落都由原液中单个细胞发育而来。反映食品被细菌污染的程度由于倾注平板法的局限，会有一部分细菌在该实验条件下不生长，故计数结果要比实际值低。三、实验器材（一）培养基平板计数琼脂培养基（二）实验材料市售饮料（三）其他

1、无菌培养皿7套

2、无菌吸管（1支10mL，5支1mL）

3、无菌生理盐水（225mL三角瓶1个，9mL试管5支）（四）仪器

超净工作台四、实验步骤1、样品处理：以无菌操作，先用酒精棉球擦拭样品表面后，用无菌剪刀将包装剪破，量取检样25mL放入225mL灭菌生理盐水当中，充分振荡，混合均匀，制成10-1稀释度样品2、梯度稀释法依次稀释样品到10-4菌落总数操作流程图3、选择10-2、10-3、10-4三个稀释度的样品均液，用无菌移液管分别吸取1mL到无菌平皿中，每个稀释度做2个平皿；同时，吸取1mL无菌生理盐水到1个平皿中作为空白对照4、熔化培养基5、及时将已冷却到46℃的培养基倾入到平皿中

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