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11.1动物细胞培养基的组成和制备11.2影响动物细胞培养的环境因素第11章动物细胞培养的基本条件11.1动物细胞培养基的组成和制备11.1.1动物细胞培养必需的溶液

平衡盐溶液（BSS）：由生理盐水（无机盐）和葡萄糖制成，用于组织细胞的洗涤，也是配制各种培养液的基础溶液。其中无机离子具有维持细胞渗透势，调控培养液酸碱度平衡的功能。葡萄糖提供能量。酚红PH指示剂。Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液。培养基PH调整液：常用的有：3.7％、5.6％、7.4％的NaHCO3溶液和HEPES溶液（二羟乙基哌嗪乙烷磺酸）等。BSS中试剂规格为GR或AR试剂，用三蒸水配制；配制后液体桃红色，PH7.4；避免钙、镁离子沉淀，要单独溶解；灭菌后丢失水分应补足；液体出现沉淀应重新配制。BSS溶液配制注意事项：动物细胞的培养基分类：

天然培养基合成培养基无血清培养基11.1.2天然培养基天然培养基：直接取自动物体液或从组织中提取的天然成分作培养液，但成分复杂，来源有限。（1）血清：血浆去除纤维蛋白所得。营养丰富，其中溶有多种物质，如无机盐离子、蛋白质及氨基酸、糖类（如葡萄糖等）、脂类、激素、固醇、抗体、维生素等。血清由于营养丰富，且含有多种细胞生长因子、促贴附因子及其多活性物质，能使细胞顺利增殖生长，应用最广。缺点是组成复杂，使培养结果不稳定。常用新生犊牛血清和胎牛血清。（2）胚胎提取液：鸡胚、牛胚提取液，能促进细胞生长。来源有限。不常用。（3）水解乳白蛋白：是乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解后的产物，含丰富氨基酸。用Hanks液配制成0.5%溶液，与合成培养基按比例混合使用。多用于细胞系和原代细胞的培养。（4）胶原：胶原是从动物真皮或大鼠尾腱中提取的，具改善细胞表面特性促使其附着生长的作用。11.1.3合成培养基合成培养基是用化学物质人工模拟合成，种类相当多。合成培养基成分已知，便于对实验条件的控制。但与天然培养基相比，有些天然的未知成分尚无法用已知的化学成分所替代，因此，细胞培养中使用的基础合成培养基还必须加入一定量的天然培养基成分，以克服合成培养基的不足。最普遍的作法是加入小牛血清，称为完全培养基。合成培养基，如109培养液、DMEM、TC199、RPMI-1640，MEM培养液等。合成培养基的组成：（1）氨基酸：氨基酸是细胞合成蛋白质的基本成分，12种必须氨基酸必须由培养液提供。需加一定量的谷氨酰胺。（2）维生素：包括水溶性和脂溶性两类。一般由血清供应。（3）无机离子：

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