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文档简介
目的基因的获得及分离方法2023/10/1311.1目的基因的获得来源:动、植物体,微生物,化学合成等。
1.1.1概念目的基因那些已被或者准备要分离、改造、扩增或表达的特定基因或DNA片段,主要指结构基因。
目的基因包括蛋白(酶)基因、抗逆性相关基因、生物药和保健品相关基因、毒物讲解相关的基因等。2023/10/1321.1.2结构基因组成1.原核生物的基因组成(1)基因区:操纵子形式存在,但各基因分别有ATG的起始密码子和TAA(TAG、TGA)的终止密码子。(2)启动区:RNApol识别、结合和开始转录的一段DNA核苷酸序列。(3)SD区:在起始密码子ATG上游约10bp处,有一个富含嘌呤的保守序列,其与16SrRNA3′端序列互补。
SD区的作用:SD序列与起始密码子ATG之间的距离决定了mRNA在细菌中的转录效率。(4)转录终止子和终止因子转录终止子:一个基因或一个操纵子3′端,提供转录停止信号的DNA核苷酸序列。终止因子:协助RNA聚合酶识别终止信号的辅助因子的蛋白。2023/10/1332.真核生物基因组成(1)基因区(2)转录启动区(3)转录终止子
不含SD序列,核糖体与mRNA5’端的帽子结构结合2023/10/1342023/10/1351.1.3基因的排列
基因组的每个基因一般一个一个直线排列在DNA分子上,并且两个基因之间存在非编码的间隔序列,但存在一些特殊排列。1.重叠基因(overlappinggenes)核苷酸序列彼此重叠的基因,即不同基因共用同一段DNA的核苷酸序列,他们的核苷酸序列彼此重叠。2023/10/1362.重复基因2006年3月15日报道:随着多种生物基因组被破译,科学家证明生物的新基因是通过基因重复获得的。美中两国科学家组成的研究小组在最近的研究中证明,进化理论所推断的“重复基因中的一部分可能产生新功能,有助于生物对环境适应”的论断是正确的。3.加倍基因多倍体生物中的基因,与重复基因相似4.基因重排有的基因组中,同一基因簇处在不同细胞中时,基因排列会发生变化。2023/10/137目的基因分离是基因工程研究和应用的关键内容不同基因组类型的基因组大小、基因组成和基因排列各不相同根据不同的实验要求,采用不同的途径和方法分离目的基因(开放阅读框)2023/10/1381.2目的基因的分离方法
根据不同类型基因组的大小、基因组成和基因排列方式不同,采用以下的方法可以把目的基
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