重组蛋白药物的复制

重组蛋白药物的复制邹君前景、利润--诱人据统计，欧美国家研发一个新药的平均投资是8亿美元，重组蛋白药物的研发相对更加昂贵。当然专利药品的回报同样也是巨大的。所有的欧美制药公司在新药研发方面都不惜重金，高薪聘请世界一流科学家，每年把20%～25%的销售利润再投回研发。95%以上的研究项目都是以失败而告终，只有极少数成功的研发项目才会发展成为今天在市场上叱咤风云、一本万利的拳头产品前景、利润--诱人据统计·我国复制一个生物药品的投人只需300万～500万人民币，不到研发一个新药的千分之一。但是复制药物也不是一个简单的事情。复制生物技术药品的一般流程复制重组蛋白药品存在的问题生物制剂目前不可精确复制生物仿制药的潜在危害——免疫原性产生抗体的后果预测蛋白质药物免疫原性的方法

生物仿制药形成两大特点的内在原因：比化学药结构复杂，审批严格。化学仿制药是原研药的复制物分子量小，两者一模一样；生物仿制药只是原研药的类似物，无法一样生物药通常都是多肽、蛋白类等，分子量大、结构复杂，无法一模一样，只能是相似产物，所以叫biosimilars。仿制药、生物制剂和生物仿制药低分子量药物(传统药物)化学药物制剂仿制药(generic)与专利过期的低分子量药物拥有等效的化学与治疗学特性

生物制剂使用一种或多种生物技术（如rDNA、控制基因表达、抗体技术）生产的药物制剂生物类似药（仿制药）(biosimilar）在原研生物制剂保护期过后，参考现有的生物制剂并按照市场授权法规，需要单独申请许可的一类生物药品制剂定义/特点EMEAdefinition;FDA:Follow-on-biologic生物制剂不同于传统药物：

难以准确复制传统药物：容易精确复制拥有精确的化学分子式和分子结构生物制剂：难以精确复制蛋白质独特的多维结构→复杂的作用方式目前无法准确复制作为生物制剂，即使分子式相同，且通过相同的细胞或微生物生产，也可能导致不同的疗效和安全性JEndocrinolInvest.2008,31:479-488.生物制剂结构复杂，复制难度大氨基酸的线性序列氨基酸链的局部折叠，由氢键维持。(如α螺旋或

折叠)二级结构的球形折叠→3维形状多个三级结构联合构成生物制剂拥有独特复杂的4级结构，任何细微变化都将导致复制失败生物制剂为何难以准确复制分子量大复杂的3-维结构在活的生物体内生产，易导致异质性易引起免疫应答生产过程复杂生物活性依赖于生产过程的再重现、车间标准以及保持冷链的完整性难以通过物理化学分析方法和生物分析完全定性其他未知的差异?CrommelinDJA,etal.IntJPharm2003;266:3-16.生物仿制药≠生物原研制剂生物制剂的生产过程极其复杂生物制药产品是在受控的条件下生产，包括培养基发酵和复杂的纯化步骤生物制剂的生产和纯化是一个复杂的过程1.插入编码目的蛋白的基因，确定合适的宿主细胞（需要精确的DNA序列和宿主细胞类型）2.建立细胞库(通过反复精细的细胞筛选，建立独一无二的原始细胞库)3.

生产蛋白质（复杂的转录和修饰）4.

纯化5.

分析6.

药物成型任何生产步骤对最终产品的性质都可造成巨大影响许多步骤许多测试（超过2000项测试）JEndocrinolInvest.2008,31:479-488.生产过程中的任何细微变异都会影响药品的完整功能任何小的变异（如温度、细胞培养条件，甚至运输和储存的任何细微变化）都可能会影响：效能（例如生物活性）选择性药代动力学免疫原性效能表达选择性药代动力学杂质:任意没有精确重组成目的蛋白的肽段都被称作杂质复制重组蛋白药品存在的问题生物制剂目前不可精确复制生物仿制药的潜在危害——免疫原性产生抗体的后果预测蛋白质药物免疫原性的方法来自单纯红细胞再生障碍（PRCA）

的教训重组人肾红细胞生成素上市10年后发生PRCA的爆发由α-重组人肾红细胞生成素（Eprex

）诱导抗体（免疫源性）导致的PRCA在美国以外地区的爆发对欧洲生物仿制药监管法规产生了重大影响PRCA的爆发很可能仅是由生产流程中的细微改变引起正常骨髓PRCA骨髓PRCA：单纯红细胞再生障碍KidneyBloodPressRes,2007,30:267–272.ClinJAmSocNephrol,2008,3:174–178.免疫原性：生物制剂和生物仿制药最重要的安全问题免疫原性：人体在使用生物技术制剂后产生的抗体反应所有生物技术