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文档简介

第三章细胞生物学研究方法

细胞生物学有哪些研究方法，它们各有何用途？第一节显微镜技术一

光学显微镜技术

1mm100μm10μm1μm100nm10nm1nm0.1nm

光学显微镜

电子显微镜

扫描隧道显微镜图3--1显微镜的分辨范围（一）普通复式光学显微镜技术

光学显微镜的组成主要分三部分:（1）光学放大系统；（2）照明系统；（3）机械和支架系统。

普通光镜的最大分辨率是0.2微米。

PartsofaNikoncompoundlightmicroscope.

（二）荧光显微镜技术

特异蛋白质等生物大分子定性定位的最有力的工具。

（三）激光共焦点扫描显微镜技术

比普通荧光显微镜的分辨率提高1.4---1.7倍。

通过”光学切片”观察较厚样品的内部结构。

（四）相差显微镜技术

相差显微镜的样品不需染色,可以观察活细胞，甚至研究细胞核、线粒体等细胞器的动态。

二

电子显微镜技术

（一）电子显微镜的基本知识1.电子显微镜与光学显微镜的基本区别2.电子显微镜的分辨本领与有效放大倍数3.电子显微镜的基本构造（二）主要电镜技术介绍

1.

超薄切片技术2.

负染色技术3.冷冻断裂和冷冻蚀刻电镜技术4.

电镜三维重构技术5.

扫描电镜技术

CO2临界点干燥法三纳米显微技术扫描隧道显微镜STM的主要特点:(1)具有原子尺度的高分辨本领；(2)可以在真空,大气,液体等多种条件下工作；(3)非破坏性测量。第二节细胞的分离和培养一、

流式细胞仪(flowcytometry)二、细胞培养概念细胞培养(CellCulture)是指从活体中取出细胞(或其它建系细胞),在体外使之能继续生存,生长甚至增殖的一种方法.

(一)动物细胞培养体外培养的动物细胞可分为原代细胞(primaryculturecell)与传代细胞(subculturecell)。细胞株(cellstrain)细胞系(cellline)(二)植物细胞培养

体外细胞培养的方式粘附型培养:附着在某一固相支持物表面才

能生长的细胞。粘附是大多数有机体细胞在体内外生存和生长发育的基本存在方式

2.悬浮型培养:不必附着于固相支持物表面，而在悬浮状态下即可生长的细胞。来源

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