中药抗乙型肝炎药物的研究进展

中药抗乙型肝炎药物的研究进展

民族主义是世界公共卫生的一个问题。全球约有20亿人感染过乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV),慢性肝炎患者超过了3.5亿。每年约有50万人死于由HBV感染引起的急性肝炎、肝硬化及肝癌等疾病。尽管HBV疫苗的出现在一定程度上缓解了HBV感染人群的增加,但仍有大量已感染HBV的患者急需得到有效的治疗。抗病毒治疗是治疗HBV感染的关键。目前临床上广泛应用的抗病毒药物主要有α-干扰素及拉米夫定。然而,因其不良反应严重,价格昂贵,且病毒易产生耐药性,难以在临床广泛应用。因此,对治疗HBV感染新型药物的开发,仍是人们研究的热点。传统中医虽然没有乙型肝炎的病名,但与其相类似的症状、体征,如:黄疸、胁痛、积聚、臌胀、肝瘟等却早有记载,可见,中药用于HBV感染的治疗已有悠久的历史。在我国,中药制剂仍然应用于HBV感染的临床治疗。然而,传统中药虽然在临床实践中取得一定疗效,但是大多数中药的有效成分尚不明了,作用机理也不清楚,使其推广应用受到限制。近年来,随着HBV转染的细胞模型的应用,许多中药及其有效成分的体外抗病毒作用得到证明,为抗HBV中药的进一步研究与开发提供了理论基础。本文就近年来报道的具有体外抗HBV活性的复方制剂、单味中药、中药有效成分及中药单体化合物等进行归纳总结,旨在为今后抗HBV中药的研究和开发提供参考。1复方六月雪及其主要成分的体外抗hbv活性1982年,Thyagarajan等首次证实苦味叶下珠具有抗HBV的活性。其后,对中药复方制剂及单味中药抗病毒治疗乙肝病毒的研究逐渐受到人们的广泛关注。小柴胡汤作为中药复方,已经被证明具有免疫调节、提高肝脏机能以及抗HIV-1复制等多种药理活性。Chang等测定了小柴胡汤对HepG2.2.15细胞HBV的抑制作用。结果表明,小柴胡汤对病毒HBsAg、HBeAg及HBVDNA均具有明显的抑制作用,其中对HBsAg的半数抑制率浓度(IC50)为55.76mg/ml。复方六月雪为双子叶植物药茜草科植物白马骨或六月雪的全草,具有祛风、利湿、清热、解毒等功效。张士军等对复方六月雪及其主要成分六月青体外抗HBV的活性进行了一系列的研究。结果表明,复方六月雪在体外具有显著的抗HBsAg、HBeAg及HBVDNA的活性,且毒性较低;而作为复方六月雪主要成分之一的六月青,在体外同样具有显著的抗HBV的作用,且毒性较低。此外,向毓明等还对复方大黄的体外抗HBV活性进行了测定,结果复方大黄虽然可抑制HepG2.2.15细胞分泌HBeAg,但对HBsAg却无明显抑制作用。除了中药复方,许多单味中药也具有明显的抑制HBV的作用。姜黄(CurcumalongaLinn)属姜科植物姜黄属植物,研究表明,姜黄水提物作用9d,对HepG2.2.15细胞HBsAg的抑制率可以达到80%,并且,姜黄水提物还可以明显地抑制HBVDNA的复制。Wu等的研究表明,鹿角草(GlossogynetenuifoliaCass.)醇提物具有明显的体外抗HBV的作用,其对HBsAg的IC50为0.093mg/ml。杨雄志等研究了三叶青不同极性提取组分对HBV的抑制作用,结果表明,三叶青各提取组分均具有明显的抑制HBsAg及HBeAg的作用,其中乙酸乙酯部分还能明显降低HBV的DNA复制水平。唐庆年等的研究发现,雪灵芝醇提物和水提物体外均有明显的抗乙肝病毒作用,但醇提物细胞毒性较大,而水提物作用确切且毒性较低,雪灵芝水提取物作用96h后,对HBsAg和HBeAg的最大抑制率分别为52.5%和72.8%。此外,人们还对人衔草、槟榔、黄芪等提取物的体外抗HBV活性进行了研究。结果表明,除槟榔提取物毒性较大,且无明显体外抗病毒活性外,其余几种提取物均具有明显的抗HBsAg及HBeAg的活性,其中,黄芪对HBsAg和HBeAgIC50分别为115.4μg/ml和317.2μg/ml。2抗hbv的植物源左国营等曾经对药用植物体外抗HBV的活性成分进行了总结和归纳,发现具有抗HBV作用的植物源天然产物主要包括木脂素、酚性成分、生物碱、萜类、黄酮和香豆素等类化合物。近年来,随着对中药抗病毒有效成分及单体化合物研究的不断深入,又有许多新的有效成分及化合物被证实具有体外抗HBV的活性。2.1槐定碱与槐果碱体外抗hbv活性的比较苦参碱及氧化苦参碱是目前研究最为深入的一类具有抗HBV活性的生物碱类化合物。聂红明等的研究表明,苦参碱与氧化苦参碱在浓度为0.1~1000μmol/L时,对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg的抑制率均高于50%,抑制效果甚至优于拉米夫定,但对HBeAg的抑制作用较弱。为了提高苦参碱的药效,Li等制备了氧化苦参碱脂质体,并研究了其体外抗HBV的活性,结果显示,虽然苦参碱脂质体对HBsAg的抑制活性略有降低,但对HBeAg的抑制活性升高,且毒性明显降低,其作用11d后对HBsAg及HBeAg的IC50分别为0.078mg/ml和3.35mg/ml。槐定碱与槐果碱主要来源于豆科植物苦豆草(SophoraalopecuroidosL.)的地上部分,其在结构上只相差两个H原子。聂红明等对槐定碱与槐果碱体外抗HBV的活性进行了一系列的研究,结果表明,槐定碱对HBsAg和HBeAg的IC50分别为0.339mmol/L和0.356mmol/L,且毒性较低,属低毒有效药物;而槐果碱对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg的IC50只有4.9μmol/L,虽其对HBeAg的抑制活性不高,但明显优于拉米夫定。此外,Romero等对小檗碱体外抗HBV的活性进行了研究,发现作用21d后,其对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg及HBVDNA的IC50分别为11μmol/L和90μmol/L,具有明显的抑制作用。但小檗碱毒性相对较高,对细胞生长的半数抑制浓度(CC50)达到了50μmol/L,属于毒性较高的活性化合物。2.2抗hbv活性分子林兴等对中药复方六月雪的主要成分六月青总皂苷体外抗HBV活性进行了一系列的研究,结果显示,六月青总皂苷对HepG2.2.15细胞HBsAg、HBeAg及HBVDNA的分泌均具有明显的抑制作用,其中对HBsAg的IC50为9.45μg/ml,而对细胞的CC50为349.51μg/ml,属于低毒有效成分。蒋泽伟等还对刺参糖胺聚糖和荔枝核总皂苷体外抗HBV的作用进行了研究,结果表明,刺参糖胺聚糖和荔枝核总皂苷均具有一定的抗HBV活性,其中荔枝核总皂苷对HepG2.2.15细胞分泌的HBsAg、HBeAg及细胞外HBVDNA的IC50分别为0.096、0.085和0.128mg/ml。黄芪甲苷(astragalosideⅣ)是中药黄芪(Astragalusmongholicus)的主要活性分子,具有抗肿瘤、抗疲劳以及抗病毒等多种药理作用。Wang等通过对黄芪提取物抗HBV活性分子的筛选,证实黄芪甲苷具有很好的体外抗HBV的活性,是黄芪抗HBV的主要活性分子,其在100μg/ml用药9d后,对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg的抑制率分别为23.6%和22.9%,抑制作用优于同组100μg/ml的拉米夫定,具有较好的开发前途。中药大黄(RheumpalmatumL.)具有解毒消炎的功效,其醇提物已被证实具有很好的抗HBV的活性。Li等通过抗HBV活性分子筛选的方法,自大黄中分离获得了一种活性化合物anthraquinonechrysophanol8-O-β-D-glucoside。研究显示,其对HepG2.2.15细胞胞外HBVDNA的IC50为36.98μg/ml,远低于大黄醇提物的IC50(212.36mg/ml),具有较好的体外抗HBV的作用。2.3细胞活性化合物黄芩素(wogonin)是中药黄芩(Scutellariabaicalensis)的主要有效成分,是目前研究较多的抗HBV的活性分子之一。Guo等通过研究,证实了黄芩素对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg及HBVDNA的抑制作用,其对HBsAg及HBeAg的IC50均为0.4μg/ml,而50μg/mL黄芩素作用9d后,其对HBVDNA的抑制作用要优于同组10μg/ml剂量拉米夫定。中药水芹(Oenanthejavanica)具有很好的保肝抗炎作用,Wang等对其中的黄酮类化合物进行了提取。研究发现,水芹黄酮提取物对HBV具有很好的抑制作用,低剂量作用9d,即可明显抑制HepG2.2.15细胞HBsAg及HBeAg的分泌,其IC50分别为0.64mg/ml和0.30mg/ml。2.4对细胞生长的影响甘草甜素是从中药甘草(Radixglycyrrhiza)分离出的单体化合物,李永伟等探讨了甘草甜素对HepG2.2.15细胞上清液中HBsAg、HBeAg和HBVDNA的作用及对细胞存活率的影响。结果发现,甘草甜素在低剂量时对HBsAg、HBeAg及HBVDNA具有抑制作用;而高剂量却反而出现HBeAg分泌增加及HBVDNA复制增强的现象。Han等研究了水芹总酚对HepG2.2.15细胞中HBV的作用。结果显示,作用9d,水芹总酚对细胞HBsAg及HBeAg分泌的抑制率分别达到70.12%和72.61%,且无明显的细胞毒性。Zhou等的研究发现,提取自中药丹参(Salviamiltiorrhiza)的化合物原儿茶酚(protocatechuicaldehyde)在体外具有很好的