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文档简介
动物生理学实验
教学课件16海洋生物2017年9月目录INDEXEXP1.肠系膜血流显微观察EXP2.坐骨神经-腓肠肌标本制备EXP3.红细胞的凝集与ABO血型鉴定EXP4.动脉血压的间接测定EXP5.红细胞渗透脆性的测定EXP6.红细胞比容测定EXP7.红细胞沉降率测定EXP8.人体心电图的描记肠系膜血流显微观察请务必认真学习本课件然后开始实验操作!!!目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题返回目录P114目的要求观察蛙肠系膜血管内血液的流动,了解外周血管的血流特点及其影响因素目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题基本原理肠系膜薄而透明,可观察血流情况及神经递质对内脏血管舒缩的作用。
动脉血管内血液由主干流向分支;静脉血管内血液由分支流向主干;毛细血管内血细胞往往单排流动。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题仪器材料蛙蛙类手术器械、显微镜、任氏液、0.01%去甲肾上腺素溶液。0.01%组胺溶液、蛙板、蛙钉。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题方法步骤1、实验准备:损毁蟾蜍的脑、脊髓目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题先背位固定,剪开腹腔,找到肠系膜。然后腹位固定四肢;拉出肠系膜,用大头针将肠系膜固定在蛙板孔上。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题2、实验观察项目(1)低倍镜下,识别动脉、静脉、毛细血管及管内血液流动特点(血管壁、血管口径、血细胞形态、血流方向和流速)。(2)机械刺激的影响(血管口径和流速的变化)。(3)肾上腺素、组织胺的影响。实验报告描绘观察到的现象并加以分析。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题注意事项1、固定肠系膜避免撕裂;2、大头针斜插固定,以免遮挡物镜;3、注意不要污染显微镜。4、实验过程加少许任氏液,防止标本干燥。5、手术操作仔细,避免出血造成视野模糊。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题思考题1、根据观察结果,归纳交感神经及其递质对内脏血管活动的作用。2、如何判断动脉血管和静脉血管?3、微循环是如何调节的?目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题坐骨神经-腓肠肌标本制备请务必认真学习本课件然后开始实验操作!!!目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题返回目录目的要求学习并掌握两栖类神经-肌肉标本的制备方法;观察肌肉的收缩现象。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题基本原理两栖类神经肌肉标本体外保持活性的条件相对简单,操作容易,其兴奋、收缩特性与哺乳动物的类似。神经组织受到刺激时,能产生可传导的动物电位。该电位可引起神经-肌肉标本的肌肉收缩。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题仪器材料蟾蜍。蛙毁脊针、蛙类手术器械、玻璃分针、锌铜弓、任氏液、滴管、细线等。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题方法步骤1、损毁脑脊髓。2、在两前肢附近剪断脊柱,去掉内脏,剥离皮肤,制备双后肢标本。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题3、从正中间剪开后肢。4、分离坐骨神经。5、分离腓肠肌。6、活性检验。用线结扎8cm左右目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题实验报告描述所制备的蛙坐骨神经-腓肠肌标本,标注出各组成部分;观察、描述并分析肌肉二次收缩、损伤电位和心肌的生物电现象。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题注意事项1、剪刀的用法:粗剪刀用于剪骨骼、皮肤等,大剪刀用于剪肌肉、眼科剪用于剪神经、血管等纤薄组织。2、神经组织避免牵拉及金属器械夹持,一定要用玻璃分针。3、制备过程中用任氏液保持神经肌肉的湿润。4、标本受皮肤分泌物和血液等污染时,不能用清水冲洗。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题思考题1、兴奋是如何从神经传递到肌肉的?2、用锌铜弓刺激神经时,为何会引起肌肉收缩?3、神经兴奋与肌肉收缩如何保证是一对一的关系?目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题红细胞的凝集与ABO血型鉴定请务必认真学习本课件然后开始实验操作!!!返回目录目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题目的要求观察红细胞的凝集现象。学习血型鉴定的基本原理,掌握利用标准血清进行人类ABO血型鉴定的方法。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题基本原理血型是根据红细胞细胞膜上抗原(凝集原)的种类而将血液分成的类型。红细胞膜上只含有A型凝集原、血清中含有抗B凝集素的为A型血,红细胞膜上只有B型凝集原、血清中只有抗A凝集素的为B型血,红细胞膜上具有AB两种凝集原、血清中没有凝集素的为AB型血,红细胞膜上没有AB凝集原、血清中具有抗A和抗B两种凝集素的为O型血。当相应的凝集原、凝集素相互作用时,就产生红细胞的凝集。可依此用标准血清判定被测定人红细胞上凝集原的类型,即血型。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题仪器材料人。双凹载玻片、一次性采血针、牙签、酒精棉球、干棉球、标准血清、显微镜。
目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题方法步骤1、取一干燥清洁双凹载玻片,在左、右上角标好“A”、“B”字样,分别滴入抗A(即B型)、抗B(即A型)标准血清1滴。2、人指尖或耳垂、采血针消毒,待酒精挥发后采血。挤出第一滴血用干棉球擦去,再挤出一滴血液,用牙签刮下,与标准血清混合均匀;再挤出一滴血,用牙签另一端刮下,与另一侧的标准抗血清混合均匀,室温下静置几分钟,观察。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题3、观察判定:如果红细胞聚集成团,虽经振荡或轻轻搅动亦不散开,为“凝集”现象;红细胞散在均匀分布或虽似成团,一经振荡即散开,则为未凝集或“假凝集”。必要时可在显微镜下观察。按下图判定血型。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题左侧:A型标准血清(含抗B凝集素)右侧:B型标准血清(含抗A凝集素)注意事项一次性采血针一定要专人专用。牙签两端不可混用。采血后要迅速与标准血清摇匀,防止血液凝固。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题思考题如果没有标准血清,仅知道1人的血型为A型或B型,请你设计无标准血清情况下测知全班同学血型的实验方案。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题动脉血压的间接测定请务必认真学习本课件然后开始实验操作!!!返回目录目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题目的要求1、学习并掌握人体间接测压法的原理和方法。2、观察在正常情况下,某些因素对动脉血压的影响。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题基本原理目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题仪器材料血压计、听诊器目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题方法步骤1、正常血压的测定(1)受试者脱左臂衣袖,静坐5min。(2)松开打气球上的螺丝,将压脉带内的空气放出,再将螺丝扭紧。(3)将压脉带裹于左上臂,其下缘应在肘关节上约3cm处,松紧应适宜,位置应与心脏同一水平。(4)在肘窝部找到动脉搏动处,左手持听诊器的胸具置于其上。注意:不可用力下压。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题(5)将听诊器两耳器塞入外耳道,使耳器的弯曲方向与耳道一致(向前)。(6)听取血管音变化,右手持打气球,向压脉带打气加压,此时注意倾听声音变化,在声音消失后再加压30mmHg,然后扭开打气球之螺丝,缓慢放气(切勿过快),此时可听到血管音的一系列变化,声音从无到有,由低而高,而后突然变低,最后完全消失。然后扭紧打气球螺丝继续打气加压,反复听取声音变化2~3次。记录血压数值。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题2、运动对血压的影响
受试者作原地蹲起运动,1min内完成30次,共做2min。运动后立即坐下,30s测量血压一次,直至血压恢复正常。精确记录每次测量血压的时间,画出血压恢复过程与时间的函数关系曲线。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题注意事项1、保持室内安静,以利听诊。在听诊过程中,压脉带充气或放气不宜过快或过慢。2、戴听诊器时,务使耳具的弯曲方向与外耳道一致,即接耳的弯曲端向前。3、重复测压时,须将压脉带内空气放尽,使压力降至零位,而后再加压测量。测压前嘱受试者休息10分钟。
目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题思考题1、心动周期中血管的平均压与舒张压和收缩压的关系。2、测定血压时为什么要与心脏基本保持水平?3、高血压与低血压分别反映了心血管什么方面的问题?目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题红细胞渗透脆性的测定请务必认真学习本课件然后开始实验操作!!!目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题返回目录目的要求学习测定红细胞渗透脆性的方法。加深对细胞外液渗透张力在维持红细胞正常形态与功能重要性方面的理解。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题基本原理正常情况下,红细胞的渗透压与血浆的渗透压相等。若将红细胞置于高渗溶液中,则红细胞将因失去细胞内的液体而皱缩;反之,若置于低渗溶液中,则水分进入细胞内,使红细胞膨胀,甚至胀破溶解,释放血红蛋白,形成溶血。测定红细胞渗透脆性即测定红细胞对低于0.9%NaCl溶液的抵抗力。抵抗力高,则红细胞不易破裂,脆性低;反之,抵抗力低,则红细胞易于破裂,脆性高。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题基本原理将红细胞悬浮于等渗NaCl液中,其形态不变。若置于低渗NaCl溶液中则发生膨胀破裂,此现象称为红细胞渗透脆性。但红细胞对低渗盐溶液具有一定抵抗力,其大小可用NaCl溶液浓度的高低来表示。将血液滴入不同浓度的低渗NaCl溶液中,开始出现溶血现象的NaCl溶液浓度为该血液红细胞的最小抵抗力。出现完全溶血现象时的NaCl溶液浓度为该红细胞的最大抵抗力。前者代表红细胞的最大脆性(最小抵抗力),后者代表红细胞最小脆性(最大抵抗力)。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题仪器材料鱼试管架、小试管13支、滴管、移液管、注射器1%NaCl溶液、0.85%氯化钠溶液、蒸馏水,1.9%尿素溶液,1%肝素。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题方法步骤目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题1.配制不同浓度的低渗NaCl溶液:取口径相同的干燥洁净小试管10支,分别编号排列在试管架上,配制出10种不同浓度的NaCl低渗溶液(0.25%,0.3%,0.35%,0.4%,0.45%,0.5%,0.55%,0.6%,0.65%,0.7%)。每个试管总量均为2ml。另取3支小试管,在三支试管上分别编号11-13,分别加入0.85%NaCl溶液、1.9%尿素和蒸溜水2ml,与前面10支试管量一致。(配制方法见实验课本P102)目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题2.制备抗凝血:用心脏取血法取2ml血液放入含有肝素的试管内,混匀。1%肝素1ml可抗凝血10ml。3.加抗凝血:用滴管吸取抗凝血,依次向13支试管内各加1滴,轻轻颠倒混均,切忌用力振荡。先观察11、12、13管的变化,其他10支试管在室温下放置1小时。2、实验观察项目4.观察项目(1)观察不同浓度低渗NaCl
混合液的颜色和透明度。记录红细胞脆性范围。(2)比较第11、12、13管的溶血情况并分析其原因。(3)描述实验结果,分析红细胞渗透脆性与红细胞膜对低渗透压抵抗力的关系。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题试管号12345678910111213现象注意事项1.每支试管内血液滴入量应准确无误(只加一滴)。2.确保每支试管NaCl溶液的浓度准确、容量相等。3.试管必须清洁、干燥。4.混匀时,轻轻颠倒1-2次,减少机械振动,避免人为溶血5.观察结果时应以白色为背景。6.滴加血液时要靠近液面。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题思考题1、输液时为什么要用等渗溶液?2、红细胞渗透脆性的大小说明了什么?目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题红细胞比容测定请务必认真学习本课件然后开始实验操作!!!目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题返回目录目的要求学习红细胞比容测定的方法。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题基本原理将抗凝血放在有刻度的玻璃管(温氏分血管)中,经过离心沉淀,使血细胞与血浆分离。红细胞下沉,彼此压紧而又不改变每个血细胞的正常形态。根据玻璃管刻度的读数,测出红细胞占全血的容积百分比即细细胞比容。此时管中的血液分为三层:上层为淡黄药的透明液体即血浆;中层为很薄的一层呈灰白色的白细胞和血小板;下层为挤压很紧的暗红色的红细胞。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题仪器材料蟾蜍或鱼。温氏管、台氏离心机、注射器、试管、抗凝剂(双草酸盐溶液、柠檬酸钠)、酒精和棉球。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题方法步骤目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题1.草酸盐抗凝剂的酸制:草酸钾0.8克,草酸铵1.2克,甲醛1.0ml,再加蒸馏水至100毫升。每1毫升血液可用0.1豪升上述溶液。吸取混合草酸盐抗凝剂溶液,置于小试管内,并使该抗凝剂均匀分布于小试管内壁上,60-80℃烘干备用。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题2.采血:将血液缓缓注射于有抗凝剂的试管中,用拇指堵住管口,倒转试管两、三次(慢),使血液与抗凝剂充分混合。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题3.离心:用长颈滴管吸取试管内的抗凝血,将滴管插入温氏分管的底部,沿管壁将抗凝血准确加到分血管刻度10厘米处。注意不要有汽泡。将温氏分血管配平后放入离心机中,3000转/分钟离心30分钟。4.读数。目的要求基本原理仪器材料方法步骤注意事项思考题草酸盐附着比容管内壁烘干柠檬酸钠附着比容管内壁烘干比容比容实验安排5%的柠檬酸钠水溶液,每毫升血液加5mg,即0.1毫升。注意事项选择不影响红细胞体积的抗凝剂。用抗凝剂处理的温氏管必须清洁干燥。用混匀血液与抗凝剂及注血时应避免红细胞破裂溶血,若有溶血
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