细胞培养基本知识 基本知识1培养细胞的生长特点和生长过程

培养细胞的生长特点和生长过程2023/10/2712023/10/272一、细胞的生长特点

1、贴附并伸展是体外培养细胞的基本生长特点；大多数哺乳动物细胞在体内、体外均附着底物生长。2023/10/272023/10/273贴附前：呈球形；贴附后：细胞伸展，呈现各种细胞形态；影响细胞贴附和伸展的因素附着因子、生长因子、离子作用、温度、培养液的流动速度等；特别是小牛血清和钙、镁离子影响更为明显。2023/10/272023/10/274贴附过程吸附：贴附因子先吸附于底物接触：悬浮细胞与底物附着贴壁伸展：伸展成特定形态2023/10/272023/10/275接触抑制：指一个细胞被其他细胞围绕无处可去而发生接触时，细胞不再移动，接触区域细胞膜皱褶样运动停止的现象。正常细胞：接触抑制保证培养过程中不重叠。转化和肿瘤细胞：无接触抑制现象，能继续移动和增殖，细胞发生堆积。2023/10/272、接触抑制2023/10/2762023/10/272023/10/2772023/10/272023/10/2782023/10/27

不受正常生长调控系统的控制，能持续的分裂与增殖。

许多癌细胞具有变形运动能力，并且能产生酶类，使血管基底层和结缔组织穿孔，使它向其它组织迁移2023/10/279(二)细胞的生长增殖过程1、单个细胞的细胞周期细胞周期：一个细胞分裂结束后形成的细胞至下一次分裂结束形成两个子细胞的这段时期。间期+分裂期（1）间期（G1，S，G2）:大多数细胞处于间期，间期时间长，DNA合成。G1:DNA合成前期，为DNA和蛋白质合成、中心体复制准备。S:DNA合成期，易受致癌物影响。G2：DNA合成后期

，进行RNA和蛋白质合成。2023/10/272023/10/2710（2）分裂期:M期（前，中，后，末）：时间短，主要是分裂。细胞周期=间期+M期=G1+S+G2+M2023/10/272023/10/2711单个细胞的细胞周期2023/10/272023/10/27122、细胞系的生长过程细胞系：原代培养经首次传代成功后即成细胞系。正常细胞体外培养有寿命期限，大致分三个阶段：2023/10/272023/10/2713(1)原代培养期---亦称初代培养期新鲜组织从体内取出接种培养到第一次传代的阶段,一般持续1~4周。特点：原代细胞培养通常为异质性细胞独立生存能力差多呈二倍体核型更能代表其来源组织的细胞类型及组织特异性，是药物检测的很好实验工具。2023/10/272023/10/2714(2)传代期原代细胞长满后，分至多个容器培养。此期的持续时间最长，一般为30—50代；能维持二倍体核型，特性稳定；一般在原代、5代、10代冻存。若持续反复传代，将逐渐失去二倍体性，增殖变慢，停止分裂，进入衰退期。2023/10/272023/10/2715(3)衰退期细胞虽存活，但增殖基本停止，细胞形态轮廓增强，发生衰退、死亡。有限生长细胞系:细胞系的寿命是有限的，只能维持一定的期限。无限生长细胞系：细胞在第二期末或第三期初通过所谓“危机期”(crisis)；获得不死性；具有持久或无限增殖的能力；失去接触抑制。2023/10/272023/10/27163.每代细胞的生长过程细胞的一代：从接种开始到下一次再传代接种的时间。每代细胞的生长过程分三个阶段1)滞留期(latentphase)：生长缓慢2)指数生