葡萄胎患者宫内不同部位组织中pcna和ki-67的表达

葡萄胎患者宫内不同部位组织中pcna和ki-67的表达

pcna和ki-67是细胞生化的指标，它们出现在细胞周期s、t2和m期。它们的殖民化程度与许多肿瘤的程度、浸润、转移和预后密切相关。本文采用免疫组化方法对38例葡萄胎患者宫内不同部位组织中检测PCNA和Ki-67的表达形式,以帮助临床处理及预后判断。数据和方法一、病理及不良反应情况本研究对象选自2003年1月～2004年10月在我院住院的所有葡萄胎患者38例,按其住院先后日期编号,并均经病理确诊。其中侵蚀性葡萄胎3例,完全性葡萄胎25例,部分性葡萄胎10例。年龄21～47岁,平均年龄30.05岁。经产妇16人,有孕无育史20人,其中首次妊娠15人,二人未婚。停经时间6～20w,其中>12w11人,8-12w16人,6-8w11人,38例患者均未绝经,此前均无葡萄胎病史。二、方法1.样品采集对每一位葡萄胎患者刮宫时,取宫腔中央典型的葡萄样组织及刮宫临结束感官壁粗糙时靠近宫壁似蜕膜样组织各一份,分装送病检。2.常规免疫组织化学先对送检两组织进行石蜡切片病理组织学诊断,确诊为葡萄胎。再分别对这两组织进行免疫组织化学测定PCNA与Ki-67的表达。采用免疫组化方法SP法,SP试剂盒及Ki-67和PCNA抗体均购自福州迈新生物技术有限公司,常规设阳性对照和阴性对照,用已知阳性片作阳性对照,以TBS代替一抗作阴性对照,进行一系列常规免疫组织化学处理后,显微镜下见到棕黄色颗粒为阳性着色,阳性颗粒定位于细胞滋养细胞及合体滋养细胞核中,阳性细胞占细胞总数<5%为(-),5%-25%为(+),25%-50%(++),>75%(+++)。三、统计处理对免疫组化结果应用SPSS10.0软件进行统计学分析,两组间比较采取χ2检验。四、肿瘤诊断与新规范随访我们按照中华医学会妇产科学会,中华妇产科杂志编辑委员会1998年制定的妇产科常见恶性肿瘤诊断与新规范进行随访,最长的随访2年,最短的1个月,失访4例。随访内容主要是阴道出血等临床症状、血HCG值、妇科检查、胸片检查、B超检查等。38例葡萄胎中1例1个月后转为侵蚀性葡萄胎,2例术后即诊断为侵蚀性葡萄胎,余35例均无复发,6例再次妊娠,均正常。pcna在不同葡萄胎组织中的表达差异一、PCNA在宫腔中央水泡样组织中阳性表达大于靠宫壁蜕膜样组织,分别是89.47%及65.79%(P<0.05)有明显差异。Ki-67在宫腔中央水泡样组织中阳性表达也大于靠宫壁蜕膜样组织,分别是76.31%及42.11%(P<0.05),有极其显著差异。在二组织中PCNA比Ki-67的阳性表达更为明显,见表1。二、不同类型的葡萄胎组织中PCNA及Ki-67的阳性表达存在差异,PCNA在三种葡萄胎类型中表达分别是70、96、100和30、80、100;Ki-67的表达分别是60、80、100和0、52、100。即部分性葡萄胎<完全性葡萄胎<浸润性葡萄胎。见表2。葡萄胎的治疗葡萄胎是妊娠滋养细胞疾病之一,其恶变率高,并有局部侵蚀及远处转移的潜在危险。而其宫内组织性状及增殖强度又与其预后密切相关,所以,如何处理及预测其恶变是提高葡萄胎治愈率的关键。为进一步弄清葡萄胎宫内组织的增殖状态,本研究采取了对葡萄胎宫内不同部位组织中能代表细胞增殖程度的2个标记物PCNA与Ki-67的测定,了解其表达状况及与不同类型葡萄胎之间的关系,为我们诊断、治疗及预后判断提供一定的理论依据。一、葡萄胎刮宫时细胞增殖研究中我们把在葡萄胎患者刮宫时的组织进行分类,对宫中央的水泡样组织和靠宫壁的蜕膜组织分别检测其PCNA与Ki-67的表达程度,发现水泡样组织中这二种标记物表达明显强于蜕膜样组织,分别为89.47%、76.31%与68.42%、42.11%,(P<0.05),有明显差异。说明葡萄胎的细胞增殖主要表现在水泡样组织中,因此,在临床上对葡萄胎刮宫时,一定要刮净宫腔内的水泡样组织,不能残留,以免引起不良预后。而对于刮宫时已感宫腔净,子宫收缩良好,宫壁有粗糙感时,应停止进一步搔刮,尤其是二次刮宫。因二次刮宫时刮出的组织多为蜕膜样组织,甚至是肌纤维组织,经检测这一组织中PCNA及Ki-67的阳性表达率明显下降,其细胞增殖程度明显降低,加之病检基本已无滋养细胞残留,如果进一步搔刮宫势必会造成过度损伤,引起术后宫腔粘连,月经失调,甚至不孕的结局。曾有国内外学者报道认为清宫次数多,有可能性破坏子宫防御机制,增加恶变的机会。本研究从另一角度也为此提供了一定的理论依据。故建议葡萄胎患者不必要常规进行二次清宫,应加强第一次刮宫的技术提高及刮宫后的随访,以免残留及恶变。二、pcna和ki-97对养老工病发展的检测近年来国内外学者对此进行过研究,他们的结论与本研究结果一致。妊娠滋养细胞疾病是一组以滋养细胞增生为本质特征的病变,分为部分性葡萄胎、完全性葡萄胎、侵蚀性葡萄胎等,前二者为良性病变,但极易发展为恶性滋养细胞病变。恶变率可达10～20%,尽管有明确的病理组织学诊断标准,但仍有观察者间的认识不一致。本研究通过检测二种增殖标记物,发现三者之间的表达呈递增形成,提示表达的差异由滋养细胞异常增生所致。故此,我们认为PCNA和Ki-67可准确反应滋养细胞疾病的增殖活性,可作为评价滋养细胞疾病进展的指标。也可作为判定葡萄胎的指标之一。临床上若发现葡萄胎中这二种增殖标记物均呈强阳性表达时,应警惕葡萄胎恶变的可能,建议进行预防性化疗处理,以免进一步病情进展。三、pcna和ki-97在葡萄胎不同组织中的表达我们知道,PCNA与Ki-67均为细胞增埴标记物,它们的指数高低与许多肿瘤的分化程度、浸润、转移及预后密切相关,因此被广泛作为各种恶性肿瘤的必检项目之一。但Ki-67是一种单克隆抗体,在细胞周期S、G2、M期均有表达,Go期缺如。而PCNA是一种仅在增殖细胞中合成或表达的核内多肽,其表达和合成与细胞周期有关,主要表达于增殖细胞的S期、G1、G2初期。因此在不同组织中的敏感度可能不同。本研究中发现,PCNA与Ki-67在葡萄胎宫内这二种组织中的阳性表达均较敏感,尤其PCNA表达更为明显。因此我们认为PCNA与Ki-67是目前能代表葡萄胎滋养细