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子情境:谷氨酸发酵条件控制-发酵罐取样操作为什么在发酵过程中需要取样呢?取样后需要检测那些指标呢?取样方法:一、材料准备1.“短管”准备:外径Φ12的优质胶管(医药公司售)若干条。每条长15公分左右每条两头都各用一层布和一层牛皮纸包扎好灾菌备用。(如图l)2.“采样瓶”准备:用250mL三角烧瓶若干个,瓶塞用优质胶塞,其上打两个Φ8的孔,并各插进Φ10的玻璃管(每根6-8厘米)玻管上套外径是Φ12的优质胶管,胶管的另一端则用一层纱布和一层牛皮纸包好。灭菌备用(如图2)3.发酵罐的取样口准备:改用Φ10的铁管或铜管,套上外径Φ12的优质胶管。在实消后,把取样阀关紧,同时要把其上的胶管用止血钳夹紧(如图3)二、取样操作1.先把发酵罐取样口胶管上的止血钳松开2.同时打开取样管上的阀门,让发酵罐里的发酵液把滞留在取样管里的发酵液冲尽。3.关住取样阀门并把取样管上的胶管夹住。4.点火焰并移到取样管下方,把其上的胶管拔出,火焰完全封住取样管出口。5.把取样瓶上的胶管(其中任何一条)用无菌操作的方法套到取样管上,把火焰移开。6.慢慢地打开取样阀门,发酵液就顺胶管流到三角瓶中,瓶中的气体则从另一条胶管排出。(图4)。7.待三角瓶中的发酵液数量足够检验,使用后,关住取样阀。同时用火焰封住取样口,将取样瓶的胶管从取样口上拔出(图4)8.用无菌操作把已灭菌过的短管套住取样口,并用止血钳夹住胶管的另一端。9.第二次取样按照1-8进行。从发酵罐中取出的样品该如何处理呢?一、发酵液的处理①镜检:每隔6小时检测菌体的生长状况,要求无杂菌和噬菌体。②从发酵4小时开始,每间隔2小时测定OD,pH,糖含量,③从发酵12小时开始,除测定上述指标外,每隔4小时测定谷氨酸含量。④OD用光密度计测定,pH值在线测定,糖含量用裴林试剂测定,GA用茚三酮比色法测定。数据记录发酵时间h0612182430364
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