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文档简介
光敏感原料,天使or魔鬼?之前,以为提到化妆品的安全性,大家一定非常熟悉了。慢慢发现,其实不然。生活中大多集美们关注的焦点集中在功效上,如保湿、美白、舒敏、抗皱、防晒・・・,对于化妆品的安全性就是一个小白。安全是护肤的基础,了解一些化妆品安全性的tips,既可以省钱,又能省智商税。我们常说的化妆品安全性主要是三个方面:刺激性、致敏性以及光毒性。苦除an适轻轻QECD^fi但甫周点茸ITIwU屏的疋1也港力OECDTG4J9^F^^lETSD曲咿ngjsi的輻曰为I•阿罔4JSITElioCkullar力OECDTG4«2塞此凹日ET5Df1 念Bt爾匪事DECDn切£适ME[雄性h<-CLA.l%1HP-1toae/cosjiOEtDTfl4420Epik.uth-Qt-n<*i£EpiKuLi!!-也出1新姜4HS上関話3T}«isuan3TiOECOT@432EpiKutisHio-tota-xIciiEjAsuytlK-PA]Ip-iKuEii:日四空力EpIKutiiSo-n-EliEl'Ulrion-Astjy(EK.SAJEpiKutlE四mi禾HHJ;■耳f\化妆品安全问题及常用评估方法由于作用部位不同,产生的刺激性有皮肤刺激性和眼刺激性;关于致敏性,关注更多的是皮肤致敏性;光敏感物质在光的作用下,引起的光毒性和光致敏性。刺激性和致敏性都是“熟人”了,容易理解。但是光毒性和光致敏性究竟是个什么鬼,还可以这样操作!!!一念“天使”,一念“魔鬼”。光敏感物质(化学原料或产品本身)没有毒性,安安心心的搬砖,但紫外线“撩拨”后,能量爆棚,非常暴躁,忘了本职工作乱折腾,给周围的细胞带来伤害,给皮肤带来损伤,进而产生光感性皮炎等问题。插图光毒性/光致敏性的发生需要同时具备原料(光敏感物质)和工人(光源,多指UVA和UVB)。依据光敏感所引发的阶段和机制不同,又可以分为光刺激反应(光毒性)、光致敏反应(光变态反应)。虽然他们是“双胞胎”,但脾气和性格差异很大,光刺激反应是非免疫性组织损伤,不涉及免疫系统和免疫细胞;光致敏反应是W型超敏反应(迟发性超敏反应),由免疫系统和免疫细胞引发的免疫原性皮肤反应。另外,光刺激反应和光致敏反应的发生率、潜伏期、激发剂量及临床表现等都有所不同。光刺激反应及检测方法光刺激反应(光毒性)是什么?光刺激反应指皮肤单次接触化学物质,经紫外线照射后,引发的一种皮肤毒性反应,临床表现为晒斑、红斑、水肿、色素沉着等。其引发机制大多是由于物质在激发之后,产生的单线态氧、超氧阴离子自由基以及羟自由基等活性氧簇。
光刺激反应(光毒性)的检测方法传统的光毒性测试方法有:动物皮肤的光照实验和人体光斑贴实验,以及近几年发展的“如火如荼”的体外替代实验。动物皮钛光照试脸 人休光斑贴试脸虽然本号已经推送了多篇介绍体外替代实验的文章,这里还要再叨叨一下,即使做不到“书读百遍其义自见”,也不要成为“最熟悉的陌生人”。体外替代试验方法是用细胞、组织或者器官模型来代替动物或者人体,确定可检测的指标,建立相配套的检测方法。光毒筛选实验已建立了多种方法,如3T3中性红摄取法、角质细胞试验法等;还有对特定光毒机制进行研究的实验,如红细胞溶血法、组氨酸光氧化法等。这里简单介绍两种体外光毒性检测方法。
基于细胞模型的3T3中性红摄取法(参考OECD432标准)附丨鱷基于细胞模型的3T3中性红摄取法(参考OECD432标准)附丨鱷4WID-41IIFiKI.ISI-:Ml*TFJtTlXi:IW-i'HI-Alla:JJir[|''5III:MPI'0.J52<PEF<5ikfl.L<Mf£<JO.lS这种方法的检测路线是,先对细胞进行一定剂量的光照处理,用MTT法检测细胞活力,随后根据细胞存活率的大小来评判光毒性。基于体外重组皮肤模型建立的检测方法V活力检测II清洗EmKin』出甦京an咸般下摘药事體%基于体外重组皮肤模型建立的检测方法V活力检测II清洗EmKin』出甦京an咸般下摘药事體%:聯15富.诜壬橫旦丈可的丙烦IV后晖育VI肌林化读数VTT法制嗣Zan:这种方法,首先将待检物涂抹在模型表面,或者液下给药,处理一定时间,清洗之后UVA辐照处理,再用MTT法检测组织的活力,进而评估待检物的光毒性强弱。光致敏反应及检测方法光致敏反应是什么?光致敏性的发生机理与皮肤致敏性的类似,不过光致敏性的诱发因素是光源(主要是UVA)。检测的方法除了常规的DPRA法、h-CLAT法外,还有基于体外重组皮肤模型的EpiKutis-Genes
法,可以利用多种方法对光致敏反应进行综合的评估。SHDCNH2cn^DPFW法EpiKu(i&-Gene5j£h-CLATj£法,可以利用多种方法对光致敏反应进行综合的评估。SHDCNH2cn^DPFW法EpiKu(i&-Gene5j£h-CLATj£原理:亲核亲电共恰反应战溜:角匪搭删泡反应包括Nf扫 依据:树突狀细胞的潮活佶号通路的激活風邈症反丽化妆品原料中很多物质存在光毒性或者光致敏性,但这种活性物在特定功效上又是“特长生”。这给原料商和品牌商带来很多困惑,如:要不要放弃使用?添加量如何把握等?我们提供了一些参考方法和解决思路。光敏性原料功效检测方法与案例以光敏感性原料抗衰功效的评估为例。体外功效评估时,首先,基于模型进行安全性评估;其次,基于安全性评估确定的最大安全浓度,进行功效性评价。基于UVA成纤维细胞所建立的衰老模型,测定原料或者成品的抗衰功效。细胞形态和细胞活力(MTT)所筛选的原料在最大安全浓度下,UVA处理后,细胞活力呈现下降趋势【Sl(before)、S2(before)、S3(before)】,出现了明显的死亡现象[比较明显的白圈部分]。在测试光敏性原料功效时,采用了多种策略,其一对最大安全浓度倍比稀释为不同浓度梯度,进行功效评价。其二将“先给药后照射”的方式调整为“先照射后给药”的方式,降低活性物的光毒性。mBiifars:矗詹药再黑射物的光毒性。mBiifars:矗詹药再黑射f■丈安全港臨}Aft*!1:先冶药再關射鼎顾的1整嘩話11S1# a■昇 r- •'ipffri调整评估策略(给药、照射顺序不变,给药浓度降低一半),活性物处理后(SI、S2、S3),胶原蛋白明显增加、MMP-1显著降低,表现出很好的抗衰效果。基于全层皮肤模型建立的衰老模型,测定原料或者成品的抗衰功效。利用相同的样品,做了基于3D全层皮肤模型的抗衰功效检测,检测结果与上述案例类似,未做浓度、给药顺序调整时,在最大安全浓度范围内,同样会表现出光毒性;处理之后,样品的抗衰功效比较明显,不再赘述,感兴趣的可扫描文章底部二维码交流。
before组、before组、after组分别为给药浓度调整前和调整后。调整后,真表皮连接处及真皮层活细胞密度均有明显改善(左侧组织结构图)。真皮中活细胞数量(右上角)有明显增多(S1、S2、S3柱子比NC高)。右下角表皮层厚度也表现出相似结果。®S3tHrfWtArter: 再朋射cj毎"障低两^-a*51IXifW*®®S3tHrfWtArter: 再朋射cj毎"障低两^-a*51IXifW*®同样,上图中,浓度处理后,S1、S2、S3组胶原蛋白W和⑷含量均有不同程度增加,尤其是S1组,含量增加非常明显,这也说明S1组的原料有很好的抗衰功效。洋洋洒洒、啰里啰嗦又说了很多了,文章最后放个大招,光敏性物质的抗衰功效体外评价策略,拿走不谢。
光敏性原料UVR-
EkUVR-
EkvivouVA-朋IJ. 芯;1r;|!ir细胞毒性检测/..光毎性检测含光敏件原料〔的化池品产品.* 安全漲度生活中接触的涉及光敏性物质的品类
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