《临床检验基础》

临床检验根底1编辑课件第一章血液一般检验皖北卫生职业学院王玲玲2编辑课件第一节血液标本采集与处理一血液标本类型

二血液标本抗凝剂与添加剂

三血液标本采集

四血液标本运送、保存与处理

3编辑课件1．全血2．血浆主要用于化学和凝血工程检测等。3．血清主要用于化学和免疫学等工程检测。血清与血浆比较，主要是前者缺乏纤维蛋白原及某些凝血因子。4．血细胞静脉全血动脉全血末梢全血一、血液标本类型静脉全血动脉全血末梢全血4编辑课件血液标本添加剂抗凝剂别离胶促凝剂二、血液标本抗凝剂与添加剂5编辑课件我是血浆，还是血清呢？抗凝：采用物理或化学的方法去除或抑制某种凝血因子的活性，以阻止血液凝固的方法称为抗凝。抗凝剂：能够阻止血液凝固的化学物质称为抗凝剂〔anticoagulant〕或抗凝物质。〔一〕抗凝剂血细胞6编辑课件〔一〕抗凝剂常用抗凝剂7编辑课件〔二〕添加剂其它常用添加剂8编辑课件

血液标本采集静脉采血法皮肤采血法动脉采血法三、血液标本采集9编辑课件〔一〕皮肤采血法皮肤采血法，又称毛细血管采血法，主要用于需要微量血液检验工程和婴幼儿血常规检验。1、采血针皮肤采血法〔1〕主要器材：一次性采血针、微量吸管、消毒用品等。一次性采血针10编辑课件〔一〕皮肤采血法〔2〕采血部位：一般采用手指指端或耳垂，婴幼儿可选择𧿹趾或足跟内外侧缘。世界卫生组织〔WHO〕推荐采血部位为左手中指或无名指指端内侧。选择皮肤完好处采血。11编辑课件〔一〕皮肤采血法材料准备（3）简要操作

选择采血部位按摩消毒针刺吸血止血（3）简要操作

12编辑课件〔一〕皮肤采血法〔4〕本卷须知：①采血时必须注意严格消毒和生物平安防范。②采血针应为一次性使用的“专用采血针〞，针刺深度以2～3mm为宜。③取血时可稍加挤压，但切忌用力过大，以免使过多组织液混入血液中。④采血要迅速，防止流出的血液发生凝固。⑤手工法血液标本采集顺序为：血小板计数、红细胞计数、血红蛋白测定、白细胞计数及白细胞分类计数、血型鉴定等。其他，激光皮肤采血法13编辑课件〔二〕静脉采血法静脉采血法临床应用广泛，所采集的静脉血能准确反映全身血液的真实情况，因其不易受气温和末梢循环变化的影响，更具有代表性。普通采血法负压采血法1、普通采血法即传统的静脉采血方法。〔1〕主要器材：注射器、试管、消毒用品等。普通采血法负压采血法14编辑课件〔二〕静脉采血法〔2〕采血部位：通常采用肘部静脉。当肘部静脉不明显时，可采用手背部、手腕部和外踝部静脉。幼儿可采用颈外静脉采血，其它：股静脉、大隐静脉及锁骨下静脉等。肘部静脉15编辑课件〔二〕静脉采血法材料准备〔3〕简要操作选择静脉扎压脉带消毒穿刺抽血止血放血与混匀16编辑课件〔二〕静脉采血法〔4〕本卷须知：①根据检验工程判断所需采血量，选择注射器。②严格执行无菌操作。③采血时切忌将针栓往回推，以免注射器中的空气进入血循环形成气栓。④为防止溶血，注射器和容器必须枯燥，抽血时应防止产生大量气泡，抽血完毕后应先拔下针头，然后将血液沿管壁徐徐注入容器，需要抗凝时应与抗凝剂轻轻混匀，切忌用力振荡试管。⑤进行血小板功能试验，为了防止血小板激活，须使用塑料注射器或经硅化处理后的玻璃试管或塑料试管。⑥采血一般取坐位或卧位，不能立位采血，因为体位影响水分在血管内外的分布，影响被测血液成分的浓度。⑦压脉带捆扎时间不应超过1分钟，否那么会使血液成分浓度发生改变。17编辑课件〔二〕静脉采血法2、负压采血法又称为真空采血法。〔1〕主要器材：负压采血系统双向采血针真空采血管

套管式一次性采血针头皮静脉式一次性采血针〔2〕采血部位：同普通采血法。18编辑课件〔二〕静脉采血法材料准备〔3〕简要操作选择静脉扎压脉带消毒穿刺针端穿刺混匀或不混匀血液退出刺塞针端针头刺塞针端刺入采血管止血退出穿刺针端针头19编辑课件〔二〕静脉采血法〔4〕本卷须知：①使用前切勿松动或拔除采血管的胶塞头盖。②刺塞针端的乳胶套能防止拔除采血试管后继续流血污染周围环境，到达封闭采血防止污染环境的作用，因此不可取下乳胶套。③采血完毕后，先拔下刺塞针端的采血试管，后拔穿刺针端。④一次采血，使用玻璃采血管多管采集血液标本的分配顺序为：血培养管、无抗凝剂血清管、枸橼酸钠抗凝管、其他抗凝剂管；使用塑料采血管分配顺序：血培养管〔黄色〕、枸橼酸钠抗凝管〔蓝色〕、加或未加促凝剂或别离胶的血清管、加或未加别离胶的肝素管〔绿色〕、EDTA抗凝管〔紫色〕、加葡萄糖分解抑制剂管〔灰色〕。20编辑课件〔三〕动脉采血法1．主要器材：2ml或5ml注射器〔准备l000U/ml无菌肝素生理盐水溶液，以湿润注射器内腔、橡皮塞〕，或一次性动脉采血针、消毒用品等。2．采血部位多项选择用桡动脉〔最方便〕股动脉、肱动脉。3．简要操作桡动脉采血21编辑课件〔三〕动脉采血法4.本卷须知：①隔绝空气：用于血气分析的标本，采集后先立即封闭针头斜面，再混匀标本。②立即送检：标本采集后应立即送检，否那么应将标本置于2～6℃保存，但保存时间不应超过2小时。③防止血肿：采血完毕，拔出针头后，用消毒干棉签用力按压采血处止血，以防形成血肿。22编辑课件血液标本预处理与保存检验后保存与处理运送接受与拒收四、血液标本运送、保存与处理23编辑课件（一）血液标本运送生物平安原那么唯一标识原那么及时运送原那么四、血液标本运送、保存与处理24编辑课件抗凝标本凝固〔二〕血液标本拒收采集容器不当

标本污染、容器破损

申请单和标本标识不一致

采血量缺乏或错误溶血转运条件不当

抗凝剂使用错误

四、血液标本运送、保存与处理25编辑课件预处理：血常规检测：室温存放血浆：可通过离心抗凝血获得血浆；血清：对未含促凝剂或别离胶采血管的血液标本置于37℃孵育，待血液完全凝固后离心别离血清；含促凝剂或别离胶采血管的血液标本可直接离心别离血清；对于需要特定细胞的实验，应根据要求采用不同的细胞别离液或别离技术别离细胞，同时尽量防止混入其他细胞。四、血液标本运送、保存与处理〔三〕血液标本预处理与保存26编辑课件保存：1．别离后标本①不能及时检验或需保存标本，一般应将标本置于4℃冰箱内保存。②标本需保存至少1个月时，放置于-20℃冰箱内保存。③标本需保存至少3个月时，别离后置于-70℃冰箱保存。④标本存放时需要密封，以免水分挥发而使标本浓缩。⑤标本应防止反复冻融。2．立即送检标本如血氨〔密封送检〕、红细胞沉降率、血气分析〔密封送检〕、酸性磷酸酶、乳酸等标本。四、血液标本运送、保存与处理27编辑课件四、血液标本运送、保存与处理〔四〕血液标本检验后保存与处理血液一般分析标本：室温24小时后处理，一般生化检验工程：4℃存放7天后处理，特殊检验工程：吸出血清或血浆-20℃冰箱内保存1个月以上。保存检验标本时应包括标本信息的保存，且与别离的血浆或血清标本相对应。保存原那么是在有效的保存期内确保被检测物质不会发生明显改变。检验后废弃的血液标本处理严格按照国家标准?实验室生物平安通用要求?〔GB19489-2004〕，由专人负责处理，根据?医疗废物管理条例?规定使用专用的容器或袋子包装，由专人送到指定的地点集中处理。检验后废弃的血液标本一般由专门机构采用燃烧的方法处理。处理保存28编辑课件〔一〕检验申请〔二〕患者准备五、血液标本采集、运送与保存质量保证〔三〕标本采集〔四〕标本运送29编辑课件第二节血涂片的制备与染色一血涂片制备二血涂片染色30编辑课件第二节血涂片的制备与染色推片载玻片血液将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度：快、大(厚)。慢、小〔薄〕一张满意的血涂片应厚薄均匀头体尾鲜明涂片枯燥后用铅笔在血涂片的头部写上姓名和编号李四B12331编辑课件第二节血涂片的制备与染色良好血液涂片标准厚薄要适宜，头体尾要明显，细胞分布要均匀，血膜边缘要整齐，并留有一定的空隙。32编辑课件引起血涂片分布不均的主要原因：推片边缘不整齐用力不均匀载片不清洁第二节血涂片的制备与染色33编辑课件二、血涂片染色(一)瑞氏染色法(Wright'sstain)1.瑞氏染料〔复合染料〕酸性染料伊红(E-)碱性染料亚甲蓝(M+，又名美蓝)美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料(即天青)，甲醇的作用：①溶解美蓝和伊红，解离为M+和E-；②脱水作用，固定细胞形态，增强染色效果第二节血涂片的制备与染色34编辑课件第二节血涂片的制备与染色2．染色原理

是染料透入被染物并存留其内部的一种过程。①物理的吸附作用②化学的亲和作用嗜酸性颗粒——碱性——与酸性染料——粉红色；细胞核蛋白——酸性——与碱性染料——紫蓝色或蓝色；中性颗粒——等电状态——与伊红和美蓝——染淡紫红色。35编辑课件第二节血涂片的制备与染色勿冲洗再加瑞氏染色Ⅱ液5-8滴后将Ⅰ液和Ⅱ液充分混匀静置10分钟直接流水冲洗3-5分钟〔切勿先倒掉染液〕涂片经水洗枯燥后用油镜分类计数100个白细胞李四123涂片枯燥后加瑞氏染色Ⅰ液5-8滴覆盖整个血膜1分钟36编辑课件3.pH值的影响细胞各种成分均属蛋白质〔两性电解质〕第二节血涂片的制备与染色37编辑课件第二节血涂片的制备与染色

染色所用玻片必须清洁，无酸碱污染。配制瑞氏染液必须用优质甲醇。稀释染液必须用缓冲液。冲洗用水应近中性。新鲜配制的染料偏碱，须在室温贮存一定时间，贮存时间愈久，染色效果愈好。DeamGilliland等采用吸光度比值作为瑞氏染液的质量规格。38编辑课件第三节白细胞显微镜检查一白细胞计数

二白细胞分类计数

三白细胞形态检查

四嗜酸性粒细胞计数五红斑狼疮细胞检查39编辑课件血液血浆血细胞红细胞白细胞血小板中性粒细胞嗜酸性粒细胞淋巴细胞单核细胞嗜碱性粒细胞第三节白细胞显微镜检查40编辑课件白细胞计数〔whitebloodcellcount〕是指测定单位体积外周血中各种白细胞的总数。白细胞计数结果仅反映循环池中的细胞数量。一、白细胞计数1．原理白细胞显微镜计数法是将全血用稀酸溶液稀释一定倍数，使红细胞破坏后，充入改进牛鲍〔Neubauer〕计数板内，在普通光学显微镜下计数一定范围内的白细胞数，经换算求出每升血液内的白细胞总数。2．白细胞稀释液冰乙酸破坏红细胞，且使白细胞核固定清晰亚甲蓝或结晶紫使白细胞核略着色，便于识别蒸馏水〔一〕方法41编辑课件3．器材〔1〕改进牛鲍计数板〔2〕改进牛鲍计数板专用盖玻片〔血盖片〕〔3〕微量吸管〔4〕显微镜一、白细胞计数42编辑课件Neubauer计数盘〔牛鲍氏计数盘〕盖玻片血细胞计数板侧面观液面高度为0.1mm一、白细胞计数43编辑课件大方格中方格小方格每个大方格体积=1X1x0.1=0.1mm3=0.1μL44编辑课件0.38ml稀释液混匀

20ul血液充池、静置镜下计数、计算

4.简要操作

一、白细胞计数45编辑课件计数：用低倍镜计数四个大方格内的白细胞数〔N〕。计算：WBC/L=N/4×10×106×20=N/20X109/L0.1μL—

1μL—

1L稀释倍数一、白细胞计数46编辑课件1．采血时间的影响2．计数误差〔1〕技术误差〔technicalerrors〕①器材误差②采血与取血不当③稀释倍数不准④充池不当⑤白细胞计数不准确〔2〕固有误差〔inherenterrors〕又叫计数域误差有核红细胞的影响校正公式：〔二〕质量保证x：校正前白细胞数y：在白细胞分类计数时，计数100个白细胞的同时计数到的有核红细胞数。一、白细胞计数47编辑课件

例：校正前白细胞数为12×109/L，在作白细胞分类计数时计数100个白细胞的同时数得的有核红细胞数为40个，那么校正后白细胞数／L=12×109/L×=8.6×109/L

例：校正前白细胞数为12×109/L，在作白细胞分类计数时计数100个白细胞的同时数得的有核红细胞数为40个，则校正后白细胞数／L=12×109/L×=8.6×109/L一、白细胞计数48编辑课件4．经验控制以血涂片中所见白细胞的多少粗略核对白细胞计数结果有无大的误差。表血涂片白细胞密度与白细胞总数的关系一、白细胞计数49编辑课件〔三〕方法学评价白细胞计数的方法学评价一、白细胞计数50编辑课件白细胞总数高于参考区间的上限称白细胞增多，低于参考区间的下限称白细胞减少。白细胞总数增多或减少主要受中性粒细胞数量的影响，其临床意义见白细胞分类计数。〔五〕临床意义〔四〕参考区间成人：〔3.5～9.5〕×109/L；儿童：〔5～12〕×109/L；6个月～2岁：〔11～12〕×109/L；新生儿：〔15～20〕×109/L一、白细胞计数51编辑课件二、白细胞分类计数对各种白细胞分别计数，即白细胞分类计数〔differentialcount，DC〕。白细胞分类计数的方法有显微镜分类计数法血细胞分析仪分类计数法〔一〕方法显微镜分类计数主要是将染色好的血涂片在油镜下根据白细胞形态学特征逐个分别计数〔一般计数100～200个白细胞〕，得出各种白细胞的相比照值或百分率，并注意观察其形态的变化。52编辑课件1．简要操作

血涂片制备染色低倍镜下检查油镜下分类计数采血高倍镜下检查二、白细胞分类计数53编辑课件最正确观察部位：

体尾交界处头体尾体尾交界54编辑课件2．报告方式〔1〕白细胞分类计数结果：以各种白细胞所占的比值或百分率表示，或者根据白细胞总数计算出各种白细胞的绝对值报告。〔2〕幼稚或异常白细胞：发现幼稚或异常白细胞，应计算在白细胞分类比值或百分率中。〔3〕有核红细胞：血涂片中如见到有核红细胞，应逐个计数，但不列入白细胞总数之内，而是报告分类计数100个白细胞的同时见到的有核红细胞个数。〔4〕寄生虫：如发现疟原虫等应报告。〔5〕红细胞、血小板的形态：如有异常改变应报告。二、白细胞分类计数55编辑课件〔二〕方法学评价白细胞分类计数方法学评价二、白细胞分类计数56编辑课件〔三〕参考区间白细胞分类计数参考区间〔成人〕注：本参考区间适用于静脉血的仪器检测方法。此参考区间来源于中华人民共和国卫生行业标准WS/T405-2021。二、白细胞分类计数57编辑课件〔四〕临床意义二者的临床意义根本一致。〔1〕中性粒细胞生理性增多：①一天之内一般下午较上午高。②剧烈运动、情绪冲动、严寒、暴热。③新生儿。④妊娠5个月以上及分娩时。以上常为一过性增多⑤吸烟者平均白细胞总数比不吸烟者高。1.白细胞总数与中性粒细胞二、白细胞分类计数58编辑课件中性粒细胞病理性增高严重的组织损伤大量血细胞破坏

急性感染

急性大出血

恶性肿瘤

急性中毒

白血病

〔2〕中性粒细胞病理性增高二、白细胞分类计数59编辑课件中性粒细胞病理性减少某些血液病：如再生障碍性贫血

某些感染：伤寒、副伤寒沙门菌

慢性理化损伤

自身免疫性疾病：如系统性红斑狼疮

脾功能亢进

〔3〕中性粒细胞病理性减少二、白细胞分类计数60编辑课件1．生理变化白天较低，夜间较高，上午波动大，下午较恒定。2．病理变化〔1〕嗜酸性粒细胞增多：①超敏反响性疾病：如支气管哮喘、荨麻疹、过敏等。②寄生虫病：如蛔虫、钩虫等。③某些皮肤病：如银屑病、湿疹等。④某些血液病：如慢性粒细胞白血病。⑤某些恶性肿瘤，如霍奇金病。⑥某些传染病：如猩红热。⑦某些内分泌疾病，如脑垂体功能低下。2.嗜酸性粒细胞二、白细胞分类计数61编辑课件2.病理变化〔2〕嗜酸性粒细胞减少：①伤寒、副伤寒、大手术后。②长期使用肾上腺皮质激素。3．嗜酸性粒细胞计数的其它应用〔1〕观察急性传染病的预后。〔2〕观察大手术和烧伤病人的预后。〔3〕肾上腺皮质功能测定。2.嗜酸性粒细胞二、白细胞分类计数62编辑课件〔1〕嗜碱性粒细胞增多①慢性粒细胞性白血病：常伴嗜碱性粒细胞增多，可达10%或更多。②嗜碱性粒细胞性白血病：嗜碱性粒细胞异常增多，可达20%以上，多为幼稚型。③过敏性疾病：溃疡性结肠炎、超敏反响等。④骨髓纤维化和某些转移癌。〔2〕嗜碱性粒细胞减少多无临床意义。3.嗜碱性粒细胞二、白细胞分类计数63编辑课件〔1〕淋巴细胞病理性增多①绝对增多：某些病毒或细菌所致的传染病，如风疹、流行性腮腺炎、传单等；某些慢性感染，如结核病恢复期也可见淋巴细胞增多，但白细胞总数多正常；急、慢性淋巴细胞性白血病淋巴细胞增多明显，且可导致白细胞总数增高。②相对增多：再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症等淋巴细胞百分率相对增高。〔2〕淋巴细胞减少主要见于长期接触放射线或应用肾上腺皮质激素之后，在急性化脓性感染时由于中性粒细胞明显增高可导致淋巴细胞相对减少。4．淋巴细胞二、白细胞分类计数64编辑课件〔1〕单核细胞增多正常儿童单核细胞较成人稍高病理性增多见于：①某些感染：如亚急性感染性心内膜炎、疟疾、黑热病、急性感染的恢复期、活动性肺结核等。②某些血液病：单核细胞性白血病、粒缺恢复期、恶性组织细胞病、淋巴瘤及骨髓增生异常综合征〔MDS〕等。〔2〕单核细胞减少意义不大。5．单核细胞二、白细胞分类计数65编辑课件

⑴胞体：10～15μm，圆形。

⑵胞核：分2～5叶，以3叶核为主。

⑶核染色质：粗糙，深紫红色。⑷胞浆：粉红色，颗粒量多、细小、均匀、紫红色。三、白细胞形态检查〔一〕外周血正常白细胞形态1.中性分叶核粒细胞66编辑课件

⑴胞体：10～15μm，圆形。

⑵胞核：弯曲呈杆状、带状、腊肠样。

⑶核染色质：粗糙，深紫红色。⑷胞浆：粉红色，颗粒量多、细小、均匀、紫红色。2.中性杆状核粒细胞三、白细胞形态检查〔一〕外周血正常白细胞形态67编辑课件三、白细胞形态检查

〔一〕外周血正常白细胞形态

中性粒细胞68编辑课件(1)胞体：13～15μm，圆形。(2)胞核：多分为两叶。(3)核染色质：粗糙，深紫红色。(4)胞浆：着色不清，橘黄色颗粒、粗大、整齐排列、均匀充满胞质。3.嗜酸性粒细胞三、白细胞形态检查69编辑课件中性粒细胞嗜酸性粒细胞三、白细胞形态检查70编辑课件(1)胞体：10～12μm，圆形。(2)胞核：因颗粒遮盖而胞核不清晰。(3)核染色质：粗糙，深紫红色。(4)胞浆：着色不清，紫黑色颗粒、量少、大小不均、排列杂乱、可盖于核上。4.嗜碱性粒细胞三、白细胞形态检查71编辑课件⑴胞体：6～15μm，圆形或椭圆形。⑵胞核：圆形、椭圆形、肾形。⑶核染色质：深紫红色，粗糙成块，核外缘光滑。⑷胞浆：透明、淡蓝色、多无颗粒，大淋巴细胞可有少量粗大、不均匀紫红色颗粒。5.淋巴细胞大淋巴细胞小淋巴细胞三、白细胞形态检查72编辑课件都是什么细胞？三、白细胞形态检查73编辑课件6.单核细胞⑴胞体：12～20μm，圆形、椭圆形或不规那么形。⑵胞核：肾形、山字形、马蹄形、扭曲折叠不规那么形。⑶核染色质：疏松网状，淡紫红色，有膨胀和立体起伏感。⑷胞浆：半透明、灰蓝色或灰红色。颗粒细小、尘土样紫红色。三、白细胞形态检查74编辑课件三、白细胞形态检查〔二〕外周血异常白细胞形态1.中性粒细胞的毒性变化在严重传染病、各种化脓性感染、败血症、恶性肿瘤、中毒、大面积烧伤等病理情况下，中性粒细胞可发生以下形态改变大小不均中毒颗粒空泡杜勒体

核变性

75编辑课件即中性粒细胞体积大小悬殊。可能是在内毒素等因素作用下骨髓内幼稚中性粒细胞发生不规那么分裂的结果。常见于一些病程较长的化脓性感染。〔1〕大小不均三、白细胞形态检查76编辑课件中性粒细胞胞质中出现的粗大、大小不等、分布不均匀的紫黑色或深紫褐色颗粒，称中毒颗粒。可能因特殊颗粒生成受阻或发生颗粒变性所致。常见于严重化脓性感染及大面积烧伤等。〔2〕中毒颗粒三、白细胞形态检查77编辑课件

中性粒细胞胞质内出现一个或数个空泡。一般认为空泡是细胞受损后胞质发生脂肪变性或颗粒缺失的结果。最常见于严重感染，特别是败血症时。

〔3〕空泡变性空泡

三、白细胞形态检查78编辑课件是中性粒细胞胞质毒性变化而保存的局部嗜碱性区域。呈圆形、梨形或云雾状，天蓝色或灰蓝色，直径1～2μm，是胞质局部不成熟的表现。〔4〕杜勒体杜勒体三、白细胞形态检查79编辑课件〔5〕核变性核肿胀核变性核碎裂常见于细胞衰老后，严重感染时该类细胞增多。三、白细胞形态检查80编辑课件2.中性粒细胞的核象变化中性粒细胞的核形标志着它的发育阶段。正常以2～3叶为主。病理情况下，中性粒细胞的核象可发生变化，即出现核左移或核右移。

三、白细胞形态检查81编辑课件外周血中杆状核粒细胞增多并出现晚幼粒、中幼粒甚至早幼粒细胞时称为核左移.核左移常伴中毒颗粒、空泡、核变性等毒性变化。最常见于急性化脓性感染，急性中毒、急性溶血。

再生性核左移伴白细胞增高退行性核左移白细胞总数不增高或减低

轻度核左移：仅见杆状核粒细胞＞6%。中度核左移：杆状核粒细胞＞10%并有少数晚幼粒、中幼粒细胞。重度核左移〔类白血病反响〕：杆状核粒细胞＞25%，出现更幼稚的粒细胞〔1〕核左移三、白细胞形态检查82编辑课件〔2〕核右移外周血中5叶核及5叶核以上的中性粒细胞＞3%时称为核右移。核右移常伴有白细胞总数的减少，属造血功能衰退的表现。主要见于营养性巨幼细胞性贫血及恶性贫血、炎症的恢复期。如疾病进展期突然出现核右移那么是预后不良的表现。巨多分叶核中性粒细胞三、白细胞形态检查83编辑课件在病毒或过敏原等因素刺激下，外周血淋巴细胞增生并发生形态上的改变，称异型淋巴细胞。

3．淋巴细胞的形态异常Ⅰ型〔空泡型〕Ⅱ型〔不规那么型〕Ⅲ型〔幼稚型〕〔1〕异型淋巴细胞84编辑课件

异淋正常人血片中可偶见此种细胞。一般病毒感染异型淋巴细胞＜5%，而传染性单核细胞增多症时异型淋巴细胞常＞10%。三、白细胞形态检查85编辑课件即在淋巴细胞的主核旁边另有一个游离的小核。常见于接受较大剂量的电离辐射之后或其他理化因子、抗癌药物等对细胞造成损伤时，常作为致畸、致突变的客观指标之一。〔2〕卫星核淋巴细胞卫星核三、白细胞形态检查86编辑课件4．其他异常白细胞Pelger-Hüet畸形

棒状小体

Chediak-Higashi畸形

三、白细胞形态检查87编辑课件四、嗜酸性粒细胞计数显微镜计数原理用适当的稀释液将血液稀释一定倍数，破坏大局部红细胞和其它白细胞，并使嗜酸性粒细胞染色，混匀后充入计数池内，计数一定体积内嗜酸性粒细胞数，即可算出每升血液中嗜酸性粒细胞的数量。简要操作加稀释液0.38ml采血→取血20µl，混匀稀释→充上、下两个计数池→静置→低倍镜下计数四角和中央共10个大方格内的嗜酸性粒细胞→计算。88编辑课件五、红斑狼疮细胞检查〔一〕方法系统性红斑狼疮〔SLE〕是一种原因不明，累及多个系统和器官的自身免疫性疾病。90％的病例为女性，尤其是育龄期妇女。1．原理系统性红斑狼疮患者的血清中，存在一种红斑狼疮因子〔LE因子〕。它属于一种IgG型自身抗体〔抗核抗体〕，在体外可使白细胞退化，导致细胞核染色质失去正常结构，变成游离肿胀的圆形或椭圆形烟雾状的均匀性物质，称为“游离均匀体〞；均匀体可吸引吞噬细胞〔常为中性粒细胞〕在其周围形成“花形细胞簇〞；最后被其中一个吞噬细胞吞噬形成LE细胞。89编辑课件2．简要操作采集静脉血3ml，待其凝固搅碎血凝块，去除剩余凝块离心，使白细胞聚集在同一层面孵育，去除白细胞层，离心涂片、瑞-吉染色油镜下找LE细胞LE细胞五、红斑狼疮细胞检查90编辑课件〔二〕参考区间阴性。〔三〕临床意义系统性红斑狼疮病人，在疾病的活动期，LE细胞阳性率一般为70%～90%，缓解期或激素治疗后不易找到。除系统性红斑狼疮外，其它的自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎、硬皮病、活动性肝炎等亦可呈阳性反响。发现LE细胞，必须结合临床表现；未找到LE细胞，并不能完全否认红斑性狼疮的诊断，应进一步作其它有关的免疫学指标检查。五、红斑狼疮细胞检查91编辑课件第四节

红细胞检查一红细胞计数二血红蛋白测定三红细胞形态检查四血细胞比容测定五红细胞平均值六网织红细胞计数七嗜碱性点彩红细胞计数八红细胞沉降率测定主要内容92编辑课件概述红细胞的发育过程造血干细胞红系祖细胞原始红细胞早幼红细胞中幼红细胞

晚幼红细胞网织红细胞成熟红细胞网织红细胞成熟48小时，红细胞存活月120天第四节

红细胞检查93编辑课件红细胞计数〔redbloodcellcount，RBC〕即测定单位体积外周血液中红细胞的数量，是诊断贫血等疾病最常用的检查工程之一。临床可通过各项红细胞参数检验和红细胞的形态观察对贫血和某些疾病进行诊断和鉴别诊断。一、红细胞计数94编辑课件〔一〕显微镜计数法〔1〕Hayem稀释液：由NaCl、Na2SO4、HgCl2和蒸馏水组成。其中NaCl和Na2SO4调节渗透压，后者还可提高比重防止细胞粘连，HgCl2为防腐剂。该稀释液的主要缺点是遇高球蛋白血症患者，由于蛋白质沉淀而使红细胞易凝集。〔2〕枸橼酸钠甲醛盐水稀释液：由NaCl、枸橼酸钠、甲醛及蒸馏水组成。其中NaCl和枸橼酸钠调节渗透压，后者还有抗凝作用，甲醛为防腐剂。该稀释液配制简单，可使红细胞在稀释后较长时间形态不发生改变并且不凝集，故应用较广。〔3〕生理盐水或1%甲醛生理盐水：急诊时如无红细胞稀释液可用此液代替。

1、试剂一、红细胞计数95编辑课件一、红细胞计数用红细胞稀释液将血液稀释一定倍数后，充入改进牛鲍计数板中，在显微镜下计数一定容积内的红细胞数，经换算求出每升血液中的红细胞数量。取稀释液2.0ml→参加全血10µl，混匀→充池→静置→高倍镜计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞数→计算。2．原理

3．简要操作

96编辑课件〔二〕质量保证一、红细胞计数1．红细胞在室温和4～8℃可稳定3天，37℃可稳定36小时，以后逐渐减少。2．血液参加稀释液后和充池前需充分混匀；计数时光线不能太强。3．当白细胞＞100×109/L时，可对红细胞计数结果产生影响。处理方法是将计数所得的红细胞数减去计数所得的白细胞数；或者在高倍镜下注意识别，计数时勿将白细胞计入。在高倍镜下，白细胞体积通常比红细胞体积略大，中央无凹陷，细胞核隐约可见，无黄绿色折光。4.技术误差和固有误差见白细胞计数。97编辑课件〔三〕方法学评价一、红细胞计数红细胞计数的方法学评价98编辑课件〔四〕参考区间1．成年：男性〔4.3～5.8〕×1012/L，女性〔3.8～5.1〕×1012/L；新生儿：〔6.0～7.0〕×1012/L。2．红细胞计数医学决定水平高于6.8×1012/L，应采取相应的治疗措施；低于3.5×1012/L，可诊断为贫血；低于1.5×1012/L，可考虑输血。〔五〕临床意义见血红蛋白测定。一、红细胞计数99编辑课件血红蛋白的分子结构二、血红蛋白测定卟啉环包着一个亚铁离子组成一个亚铁血红素，每条多肽链含一个亚铁血红素，每个血红蛋白分子有四个珠蛋白肽链血红蛋白〔hemoglobin，Hb或HGB〕是红细胞的主要成分，由珠蛋白和亚铁血红素组成，每个Hb分子有4条珠蛋白肽链，分子量为64458。100编辑课件二、血红蛋白测定Hb有多种形式及衍生物HbO2HbredHbMHb〔Hi〕HbCOSHb101编辑课件二、血红蛋白测定102编辑课件正常人Hb种类及含量二、血红蛋白测定103编辑课件1.原理〔一〕HiCN测定法RBCHbHiHiCN

OD值Hb〔g/L〕=KAλ=540nm溶血氧化结合计算104编辑课件直接计算结果此处K值为理论值，在实际应用中更多采用标准品参照，测定未知样品血红蛋白浓度〔一〕HiCN测定法105编辑课件HiCN法测定血红蛋白标准曲线制作标准曲线求得样品Hb浓度？A:0.332，Hb=？106编辑课件〔二〕其他测定方法十二烷基硫酸钠法〔sodiumdodecylsulfatehemoglobin，SDS-Hb〕碱羟血红蛋白法〔alkalinehaematindetergent，AHD575〕叠氮高铁血红蛋白法〔HiN3〕溴代十六烷基三甲胺法〔cetyltrimethylammonynmbromide，CTAB〕目前，自动血液分析仪已多使用不含氰化钾的血红蛋白测定方法107编辑课件〔三〕质量保证1．合格的标本2．主要器材

分光光度计的波长、光栅、比色杯3．HiCN转化液

的质量要求4．HiCN参考液定标

5．开展室内质控108编辑课件〔四〕方法学评价血红蛋白测定方法学评价109编辑课件成年男性：130～175g/L

成年女性：115～150g/L

新

生

儿：170～200g/L。〔五〕参考区间110编辑课件〔六〕临床意义306090110120Hb〔g/L〕女性

男性贫血的程度与临床表现并不一定一致111编辑课件RBC+Hb的变化〔六〕临床意义112编辑课件三、红细胞形态检查

大小异常红细胞异常形态

染色异常

结构异常

形态异常正常形态红细胞113编辑课件三、红细胞形态检查〔一〕正常红细胞形态正常的红细胞呈双凹圆盘形，细胞大小均一，平均直径约7.2μm，瑞氏染色后为淡粉红色，血红蛋白充盈良好，呈正常色素性、向心性浅染，中央有生理性淡染区胞质内无异常结构。除健康人外，局部再生障碍性贫血、急性失血性贫血和白血病等患者的红细胞亦呈正常形态。114编辑课件1.大小异常大红细胞大小不等小红细胞巨红细胞〔二〕异常红细胞形态直径小于6μm直径大于10μm直径大于15μm指同一血涂片中红细胞大小悬殊，直径相差在1倍以上115编辑课件小红细胞〔二〕异常红细胞形态116编辑课件大红细胞和巨红细胞〔二〕异常红细胞形态117编辑课件红细胞大小不等〔二〕异常红细胞形态118编辑课件2.形态异常椭圆形红细胞靶形红细胞球形红细胞口形红细胞〔二〕异常红细胞形态棘形红细胞缗钱状排列裂片红细胞红细胞形态不整镰刀形红细胞泪滴形红细胞119编辑课件球形红细胞〔二〕异常红细胞形态120编辑课件口形红细胞〔二〕异常红细胞形态121编辑课件椭圆形红细胞〔二〕异常红细胞形态122编辑课件靶形红细胞〔二〕异常红细胞形态123编辑课件镰刀形红细胞〔二〕异常红细胞形态124编辑课件裂片红细胞〔二〕异常红细胞形态125编辑课件棘形红细胞〔二〕异常红细胞形态126编辑课件红细胞形态不整〔二〕异常红细胞形态127编辑课件泪滴形红细胞〔二〕异常红细胞形态128编辑课件缗钱状红细胞〔二〕异常红细胞形态129编辑课件〔二〕异常红细胞形态130编辑课件高色素性红细胞〔二〕异常红细胞形态131编辑课件低色素性红细胞〔二〕异常红细胞形态132编辑课件嗜多色性红细胞〔二〕异常红细胞形态133编辑课件4．结构异常〔二〕异常红细胞形态134编辑课件染色质小体染色质小体〔Howell-Jollybody〕：又称豪-焦小体，位于成熟或幼稚红细胞胞质内的紫红色小体，直径1～2μm，1至数个不等，为核碎裂或溶解后的剩余物。最常见于巨幼细胞性贫血，也见于溶血性贫血及脾切除术后。〔二〕异常红细胞形态135编辑课件卡波氏环卡-波环〔Cabotring〕：存在于成熟或幼稚红细胞胞质内，呈紫红色线圈状或“8〞字形结构，可能是纺锤体的剩余物或脂蛋白变性所致。常与染色质小体并存，见于溶贫、巨幼贫、白血病及铅中毒等。〔二〕异常红细胞形态136编辑课件嗜碱性点彩红细胞嗜碱性点彩红细胞〔basophilicstipplingcell〕：指在瑞氏染色涂片中，红细胞胞质内出现形态大小不一、数量不等的灰蓝色点状物。在铅、铋、锌、汞等重金属中毒时增多，为铅中毒诊断的筛查指标。重症巨幼细胞性贫血和骨髓纤维化等亦可见增多。〔二〕异常红细胞形态137编辑课件有核红细胞有核红细胞〔nucleatederythrocyte，NRBC〕：即幼稚红细胞。存在于骨髓中，1周内新生儿外周血涂片可见少量，成人外周血中出现有核红细胞属病理现象，常见于各种溶血性贫血、白血病、红白血病等。〔二〕异常红细胞形态138编辑课件都来认一认，分别属于哪一种？139编辑课件血细胞比容的概述〔概念〕血细胞比容测定方法血细胞比容质量控制血细胞比容方法学评价血细胞比容参考区间血细胞比容临床意义四、血细胞比容测定内容140编辑课件血细胞比容概念血细胞比容〔hemotocrit，HCT；packedcellvolume，PCV〕，是指一定体积〔1L〕的全血中〔抗凝血〕红细胞所占容积的相比照例〔小数或百分数〕HCT的上下主要与红细胞数量、大小有关，主要用于贫血和红细胞增多的诊断，反响血液稀释和血液浓缩变化还可根据RBC、Hb、Hct计算红细胞平均值HCT测定可采用直接离心法〔包括温氏法和微量法〕，或间接血液分析仪法四、血细胞比容测定141编辑课件温氏法微量法

折射仪法黏度法比重测定法放射性核素法等

四、血细胞比容测定血细胞比容测定方法其中微量法为推荐方法，放射性核素法为参考方法142编辑课件〔一〕温氏法1．原理温氏〔Wintrobe〕法是利用血液中不同的有形成分比重的差异，将定量的抗凝血以一定的速度和时间离心后，血液中有形成分沉淀，读取压实红细胞层在全血中所占体积的百分比四、血细胞比容测定1.Wintrobe管2.paustrue管143编辑课件〔一〕温氏法2．简要操作抗凝血注入Wintrobe管→以2264g离心力离心30分钟→读数→再离心10分钟→判读结果四、血细胞比容测定144编辑课件〔二〕微量法微量法是采用一次性使用的毛细玻璃管将抗凝静脉血注入其中，或先将毛细玻璃管肝素化并枯燥后直接采集毛细血管血，然后以相对离心力12500g离心5分钟，取出毛细玻璃管，测量其中红细胞柱、全细胞柱和血浆柱的长度，判读结果四、血细胞比容测定145编辑课件〔三〕质量保证1．抗凝剂目前多项选择用肝素或EDTA-K2用于HCT测定，对红细胞影响小2．选用合格的器材温氏管、微量管、高速离心机等3．离心RCF直接影响到HCT，ICSH建议温氏法RCF2264g。RCF与RPM可相互转换4．标准化操作，防止操作误差5．结果判读与分析离心后血浆与血细胞的分界面应为平面，目光平视，读数时读取自复原红细胞层以下的红细胞的高度四、血细胞比容测定146编辑课件〔四〕方法学评价四、血细胞比容测定HCT测定的方法学评价147编辑课件〔五〕参考区间四、血细胞比容测定148编辑课件〔六〕临床意义1．增高：①各种原因引起的血液浓缩；②原发性或继发性红细胞增多症；③新生儿。2．降低：①各种原因引起的血液稀释；②各种原因引起的贫血3．临床补液量的参考各种原因导致脱水时，HCT都会增高4．真性红细胞增多症诊断指标当HCT大于0.7，RBC为〔7～10〕×109/L，Hb大于180g/L，即可诊断5．计算红细胞平均指数，对贫血的形态学分类有帮助。6．血液流变学指标自发性凝血时，HCT可＞0.6四、血细胞比容测定149编辑课件概述计算方法参考区间临床意义五、红细胞平均指数内容150编辑课件〔一〕概述红细胞平均指数包括：红细胞平均体积〔MCV〕红细胞平均血红蛋白含量〔MCH〕红细胞平均血红蛋白浓度〔MCHC〕为贫血的形态学分类和鉴别诊断提供重要线索五、红细胞平均指数151编辑课件〔二〕计算方法仪器法与手工法根本相似，但不完全相同手工法费时费力仪器法自动计算，报告准确而且仪器法还有其他多种参数可以参考，如红细胞直方图五、红细胞平均指数152编辑课件手工法：红细胞平均指数的计算

如果RBC=4.01012/L,Hb=124g/L,Hct=0,42，那么MCV=?MCH=?MCHC=?〔二〕计算方法153编辑课件MCV由血液分析仪直接测定细胞信号获得MCH=Hb/RBCMCHC=Hb/〔RBC×MCV〕HCT=RBC×MCV仪器法：红细胞平均指数的计算

如果MCH=30pg,MCV=120fl，那么MCHC=?〔二〕计算方法154编辑课件〔三〕参考区间五、红细胞平均指数MCV、MCH、MCHC参考区间155编辑课件〔四〕临床意义五、红细胞平均指数贫血形态学分类及临床意义156编辑课件网织红细胞定义网织红细胞形态网织红细胞染色方法网织红细胞计数方法网织红细胞计数参考区间网织红细胞计数的临床意义网织红细胞生成指数六、网织红细胞计数157编辑课件六、网织红细胞计数网织红细胞〔reticulocyte，Ret〕是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞，其胞质中尚残留局部嗜碱性物质〔核糖体和核糖核酸〕，可被某些染料活体染色后呈蓝色或紫色的网状或颗粒状结构，故名为网织红细胞。Ret体积略大于成熟红细胞〔直径8.0～9.5μm〕，仍具有合成血红蛋白的能力，约1～2天后，过渡为成熟红细胞。ICSH将网织红细胞分成I～IV型。定义I型〔丝球型〕Ⅱ型〔网型〕III型〔破网型〕Ⅳ型〔点粒型〕158编辑课件网织红细胞类型及特征六、网织红细胞计数159编辑课件〔一〕试管法1．原理网织红细胞内带负电荷的RNA磷酸基，与新亚甲蓝、灿烂甲酚兰等碱性染料带正电荷的有色反响基团结合，使RNA胶体间的负电荷减少而发生凝缩，形成蓝色的点状、线状或网状结构，显微镜下计数可得网织红细胞的相对值〔%〕和绝对值〔×109/L〕〔Ret#=RBC×Ret%〕。2．试剂10g/L煌焦油蓝或新亚甲蓝染液。3．简要操作染液与待检血液1︰1混合→室温放置10～15分钟→制备血涂片→低倍镜下观察→油镜计数→计算。六、网织红细胞计数160编辑课件〔二〕玻片法1．原理同试管法2．试剂

10g/L煌焦油蓝乙醇溶液。3．简要操作

滴加染液于玻片上→待干→加同体积待检血液→充分混匀，染色→制备血涂片低倍镜下观察→油镜计数→计算。六、网织红细胞计数161编辑课件网织红细胞示意图六、网织红细胞计数162编辑课件黄焦油兰染色的网织红细胞六、网织红细胞计数163编辑课件黄焦油兰染色的网织红细胞六、网织红细胞计数164编辑课件〔三〕Miller窥盘法BAMiller窥盘为圆形玻片，玻片上刻有两个正方形格子，计数时用小方格A计数红细胞，用大方格B〔包含A〕计数网织红细胞，大方格B〔包含A〕面积为小方格A的9倍。ICSH及我国卫计委临床检验中心推荐使用Miller窥盘进行网织红细胞计数。六、网织红细胞计数165编辑课件B格2个Ret，A格5个RBC六、网织红细胞计数166编辑课件5110×9Ret%==0.5%

Ret#=RBC×Ret%六、网织红细胞计数167编辑课件〔四〕仪器法带网织红细胞计数参数的血液分析仪、流式细胞仪〔FCM〕和网织红细胞专用计数仪均可，网织红细胞中RNA经特殊荧光染料染色可进行RNA定量，能精确计数网织红细胞占红细胞的百分数〔Ret%〕。网织红细胞可分为低荧光强度网织红细胞〔LFR〕、中荧光强度网织红细胞〔MFR〕以及高荧光强度网织红细胞〔HFR〕。还可计算未成熟网织红细胞〔IMR〕和网织红细胞成熟指数〔RMI〕。IMR=HFR+MFR六、网织红细胞计数168编辑课件方法分类试管法和玻片法原理、试剂根本相同，均可使用米勒窥盘，方便计数提高效率六、网织红细胞计数169编辑课件〔五〕质量保证1．及时检测陈旧标本检查结果将降低。2．选择适宜的染料3．染色过程染色时间不能过短，室温低时，可放置37℃温箱或适当延长染色时间。染液与血液的比例以1︰1为宜。严重贫血时，可适量增加血液的比例，制片时血膜应厚薄适宜，防止网织红细胞分布不匀。4．计数选择红细胞分布均匀、网织红细胞着色好的部位计数。外周血网织红细胞主要为Ⅳ型，凡含有2个或2个以上颗粒、且颗粒远离细胞边缘的红细胞均应计为网织红细胞。六、网织红细胞计数170编辑课件〔六〕方法学评价六、网织红细胞计数网织红细胞计数的方法学评价171编辑课件〔七〕参考区间六、网织红细胞计数172编辑课件〔八〕临床意义1．反映骨髓的造血功能2．作为贫血治疗效果的观察指标3．作为观察病情的指标六、网织红细胞计数173编辑课件1．反映骨髓的造血功能〔1〕网织红细胞增多：表示骨髓造血功能旺盛，见于各种增生性贫血，溶血性贫血尤为显著。溶血性贫血时由于大量网织红细胞进入血循环，网织红细胞百分数可增至6%～8%或更多。急性溶血时可高达20%，严重者甚至可达40%～50%以上；急性失血性贫血时网织红细胞可明显增高；缺铁性贫血和巨幼红细胞性贫血时，网织红细胞正常或轻度增高。〔2〕网织红细胞减少：表示骨髓造血功能低下，多见于再生障碍性贫血。网织红细胞低于15×109/L为诊断急性再生障碍性贫血的标准之一。急性白血病时，由于骨髓中异常细胞大量浸润，使红细胞生成受到抑制，可造成网织红细胞减少。六、网织红细胞计数174编辑课件〔3〕网织红细胞生成指数

〔reticulocyteproductionindex，RPI〕反映骨髓造血功能指标，代表网织红细胞的生成相当于健康人多少倍。其计算公式为：网织红细胞成熟时间：①健康人RPI为1。②RPI＞3：提示为溶血性贫血或急性失血性贫血。③RPI＜1：提示为骨髓增生低下或红系成熟障碍所致贫血。六、网织红细胞计数175编辑课件2．作为贫血治疗效果的观察指标缺铁性贫血和巨幼红细胞性贫血患者在治疗前，外周血网织红细胞仅轻度增高〔也可正常或轻度减少〕，有效治疗后2～3天网织红细胞便开始上升，7～10天到达顶峰〔可达10%以上〕。治疗2周左右网织红细胞逐渐下降，之后红细胞及血红蛋白才逐渐升高。六、网织红细胞计数176编辑课件贫血治疗有效时网织红细胞的变化Ret#(×109/L)Days六、网织红细胞计数177编辑课件3．作为观察病情的指标

溶血和失血性贫血患者在治疗过程中，连续进行网织红细胞计数，可以作为判断病情变化的参考指标。如治疗后网织红细胞逐渐降低，表示溶血或出血已得到控制；如网织红细胞持续不减低，甚至更见增高者，表示病情未得到控制，甚至还在加重。六、网织红细胞计数178编辑课件七、嗜碱性点彩红细胞计数定义测定方法质量保证参考区间临床意义内容179编辑课件七、嗜碱性点彩红细胞计数嗜碱性点彩红细胞〔basophilicstipplingcell〕是尚未完全成熟的红细胞，胞质中残存的核酸〔RNA〕变性、聚集形成颗粒，经碱性染料〔如美蓝〕染色后，细胞内可见深染的颗粒；假设经瑞氏染色，可见红细胞的粉红色胞质中有粗细不等的蓝黑色颗粒，故称嗜碱性点彩红细胞。定义180编辑课件basophilicstipplingcell181编辑课件〔一〕显微镜计数法常规制备血涂片以甲醇固定和碱性亚甲蓝染色后，按网织红细胞计数方法，计数1000个红细胞中所见到的嗜碱性点彩红细胞数，计算百分比。由于嗜碱性点彩红细胞较少且分布不均匀，必要时可扩大红细胞计数的数量。七、嗜碱性点彩红细胞计数182编辑课件〔二〕质量保证常规制备血涂片以甲醇固定和碱性亚甲蓝染色后，按网织红细胞计数方法，计数1000个红细胞中所见到的嗜碱性点彩红细胞数，计算百分比。由于嗜碱性点彩红细胞较少且分布不均匀，必要时可扩大红细胞计数的数量。1．试剂应定期配制，以免变质沉淀。配制好的碱性亚甲蓝染液在室温下可保存2～3周，如有沉淀那么需重新配制。2．可适当放慢血涂片的枯燥速度，使之形成较大的点彩颗粒。3．计数时需选择红细胞分布均匀、无重叠的区域，必要时采用扩大计数域的方法计数。七、嗜碱性点彩红细胞计数183编辑课件〔三〕参考区间＜0.03%。〔四〕临床意义嗜碱性点彩红细胞增多常见于铅、汞、铋、硝基苯、苯胺等中毒的患者，在职业病防治中常用于判断铅、汞等重金属中毒情况。此外在溶血性贫血、恶性贫血、白血病、恶性肿瘤、疟疾等也可见增多。七、嗜碱性点彩红细胞计数184编辑课件概念测定方法质量保证方法学评价参考区间临床意义八、红细胞沉降率测定内容185编辑课件红细胞沉降率〔ESR〕简称血沉，是指红细胞在一定条件下自然下沉的速率通常是枸橼酸盐抗凝剂，1:4比例，时间是1小时ESR测定的常用方法有魏氏〔Westergrem〕法和自动血沉仪法八、红细胞沉降率测定概念186编辑课件1．原理血沉架放置按要求装血的血沉管1小时，读取上层血浆高度的毫米数值，即为红细胞沉降率2．器材Westergren血沉管、血沉架3．简要操作取抗凝剂0.4ml→加静脉血1.6ml，混匀→抗凝血注入血沉管→血沉管直立于血沉架1小时→判读结果八、红细胞沉降率测定〔一〕魏氏法187编辑课件〔一〕魏氏法4．血沉影响因素八、红细胞沉降率测定188编辑课件1．一次性真空血沉管〔Vacuette移液管〕法2．自动血沉仪法八、红细胞沉降率测定〔二〕其他测定方法■准确■快速

■方便■实用189编辑课件190编辑课件1．魏氏〔Westergrem〕法〔1〕检验前必须控制饮食，防止脂血〔2〕枸橼酸钠〔AR级〕浓度应准确，抗凝剂与血液之比应为1︰4。〔3〕血沉管必须洁净、枯燥，符合ICSH规定。血沉架必须稳固，放置要垂直〔4〕标本不凝血、不溶血；及时测定，测定前要充分混匀。吸血时防止产生气泡〔5〕测定温度18～25℃，防止阳光直接照射。试验台必须稳固，防止振动〔6〕测定温度过高时血沉加快，应对照血沉温度校正表进行温度校正后报告结果〔7〕测定时间应严格控制在〔60±1〕分钟。红细胞沉降率在1小时沉降过程中并不是均衡等速度的沉降，因此绝不可以只观察30分钟沉降率，将结果乘以2作为1小时沉血结果2．血沉仪法与魏氏法的要求一致。检测标本全过程应封闭，防止污染八、红细胞沉降率测定〔三〕质量保证191编辑课件魏氏血沉法的影响因素八、红细胞沉降率测定192编辑课件〔四〕方法学评价八、红细胞沉降率测定血沉测定的方法学评价193编辑课件〔五〕参考区间魏氏法成年男性0～15mm/h成年女性0～20mm/h老年人增高，应单独设定参考区间八、红细胞沉降率测定194编辑课件主要是血沉加快有一定的临床意义，血沉减慢意义不大血沉加快见于：①疾病组织损伤及坏死；②恶性肿瘤省；③炎症疾病；④自身免疫病；⑤高球蛋白血症；⑥高胆固醇血症；⑦贫血；⑧其他〔六〕临床意义八、红细胞沉降率测定195编辑课件第五节血小板检查一概述二血小板计数三血小板形态检查196编辑课件血小板功能纤溶功能黏附功能凝血止血功能释放功能聚集促凝功能一、概述123456197编辑课件198一、概述198编辑课件199血管壁受损，血小板参与止血凝血示意图一、概述199编辑课件一、概述血小板检查内容200编辑课件一、概述

血小板形态

血小板计数201编辑课件血小板计数〔plateletcount，PLT〕是测定单位容积〔通常为1L〕的血液中血小板的数量〔单位109/L〕。二、血小板计数202编辑课件203手工计数自动计数显微镜血细胞仪血小板计数方法203编辑课件血液经稀释液稀释和破坏红细胞后，混匀、充池、在显微镜下计数一定范围内的血小板数量，经过换算求出每升血液中血小板的数量。显微镜法血小板计数原理204编辑课件205血小板计数试剂

草酸铵稀释液：由草酸铵、EDTA-Na２、和H2O组成。其中草酸铵作用是破坏红细胞，EDTA-Na２抗凝复方尿素稀释液〔许汝和液〕：由尿素、EDTA-Na２、甲醛和H2O组成。其中尿素作用是破坏红细胞，EDTA-Na２抗凝，甲醛固定血小板205编辑课件206取稀释液0.38ml参加1小试管中取血20µl，混匀充池静置10-15min镜检高倍镜下计数中央大方格的四角和中央共5个中方格内血小板数量计算Nx5x10x20x106/L=Nx109/L血小板计数操作步骤206编辑课件

血小板计数的方法学评价血小板计数方法学评价

207编辑课件参考区间〔125～350〕×109/L。危急值下限20×109/L〔儿童≤30×109/L〕上限≥1000×109/L。血小板计数参考区间及危急值危险！208编辑课件209血小板数量随时间和生理状态的不同而略有变化，午后略高于早晨；春季较冬季低；平原居民较高原居民低；月经前减低，月经后增高；妊娠中晚期增高，分娩后减低；运动、饱餐后增高，休息后恢复；静脉血血小板计数比毛细血管血高10%。血小板减少是引起出血的常见原因。当血小板数在〔20～50〕×109/L时，可有轻度出血或手术后出血；低于20×109/L，可有较明显的出血倾向；低于5×109/L时，可导致严重出血。血小板计数超过400×109/L为血小板增多。血小板计数临床意义209编辑课件

病理性血小板减少和增多的原因及临床意义血小板计数临床意义血小板增多血小板减少210编辑课件211三、血小板形态检查血小板的数量和功能对于止血、凝血的实现至关重要，血小板的形态检查对于疾病的诊断具有一定的参考价值211编辑课件212操作步骤〔同白细胞红细胞形态检查〕

采集血液

瑞氏染色

显微镜观察

推制血涂片212编辑课件观察要点①血小板的大小是否一致，有无巨大或小型血小板出现②血小板的形态有无改变，胞质的染色、颗粒的有无、多少、粗细、分布情况，有无空泡等，且应估计正常和异常血小板的数量③血小板的分布情况，如过度聚集或过度分散213编辑课件〔一〕正常血小板形态呈两面微凸的圆盘状，直径约1.5～3μm，新生血小板体积大，成熟者体积小。在血涂片上往往散在或成簇分布，其形态多数为圆形、椭圆形或略欠规那么；胞质呈淡蓝或淡红色，中心部位有细小、分布均匀而相聚或分散于胞质中的紫红色颗粒，也称嗜天青颗粒。214编辑课件正常血涂片的血小板形态和分布215编辑课件〔二〕异常血小板形态216编辑课件大血小板〔giantplatelet〕直径4～7μm，巨型血小板直径大于7μm，图中箭头所指的大血小板超过了红细胞大小，同时见数量减少。217编辑课件小血小板〔smallplatelet〕小血小板直径小于1.5μm，图中血小板与正常红细胞比较非常小，且数量较多，过于分散。218编辑课件血小板卫星现象〔plateletsatellitism〕血小板黏附、围绕于中性粒细胞〔或偶尔黏附于单核细胞〕的现象，有时可见血小板吞噬现象219编辑课件血小板片状聚集血小板大片聚集220编辑课件血小板减少全片未见血小板221编辑课件血小板功能异常血小板不聚集血小板过度聚集222编辑课件第六节血栓与止血一般检验内容概述一、出血时间测定二、凝血酶原时间测定三、血浆活化局部凝血活酶时间四、血浆凝血酶时间五、血浆纤维蛋白原测定六、血浆纤维蛋白〔原〕降解产物测定七、血浆D-二聚体测定八、出凝血检查的临床应用223编辑课件概述凝血机制224编辑课件225概述凝血与纤溶的关系225编辑课件概述出凝血障碍的因素226编辑课件定义出血时间〔bleedingtime，BT〕是指在特定条件下，皮肤小血管被刺破后，血液自行流出到自然停止的时间称为出血时间。一、出血时间测定227编辑课件〔一〕TBT法1．TBT〔templatebleedingtime〕原理使用出血时间测定器在受检者前臂皮肤上造成一个标准切口，记录血液自行流出到自然停止所需要的时间，即为出血时间〔BT〕。2．主要器材血压计、出血时间测定器、秒表。3．简要操作加压→消毒皮肤→造成切口→计时。一、出血时间测定228编辑课件〔二〕质量保证1．减少药物的影响检测前1周内不能服用抗血小板药物〔如阿司匹林等〕，以免影响结果。2．选择适宜的测定器不同年龄应该选择不同类型的出血时间测定器。①新生儿型：切口为0.5mm×2.5mm。②儿童型：切口为1.0mm×3.5mm。③成人型：切口为1.0mm×5.0mm。一、出血时间测定229编辑课件〔二〕质量保证3．注意温度的影响应在25℃左右的室内进行，以保证穿刺部位温度恒定。4．选择正确穿刺部位穿刺时应避开浅表静脉、疤痕、水肿和溃疡等处皮肤。5．防止接触和挤压伤口血液应自行流出，采用滤纸吸去流出的血液时，应防止与伤口接触，更不能挤压伤口。一、出血时间测定230编辑课件〔三〕方法学评价一、出血时间测定BT测定的方法学评价231编辑课件232参考区间及临床意义〔四〕参考区间TBT：〔6.9±2.1〕分钟。〔五〕临床意义1．BT延长主要涉及血小板和血管壁的一期止血缺陷。见于：①血小板数量异常，如血小板减少症、原发性血小板增多症。②血小板功能缺陷，如血小板无力症、巨大血小板综合征。③某些凝血因子缺乏，如血管性血友病〔vWD〕、低〔无〕纤维蛋白原血症和DIC。2．BT缩短主要见于某些严重的血栓性疾病。一、出血时间测定232编辑课件定义凝血酶原时间〔prothrombintime，PT〕是在体外模拟体内外源性凝血的全部条件，从参加组织因子开始到血浆凝固所需要的时间测。PT是常用的外源性凝血途径和共同凝血途径的筛检指标之一。二、血浆凝血酶原时间233编辑课件PT原理凝血酶纤维蛋白原纤维蛋白XaX凝血酶原VVaXIIIXIIIa交联的纤维蛋白凝血共同途径XIIXIaXIIXIXaVIIIVIIIaXIIa内源性凝血途径活化部分凝血活酶时间(APTT)234编辑课件〔一〕手工法1．原理采用Quick一步凝固法。37℃条件下，在待检血浆中参加足量的组织凝血活酶〔含组织因子、磷脂〕和适量的钙离子，通过激活因子Ⅶ而启动外源性凝血途径，使乏血小板血浆凝固。从加钙离子到血浆开始凝固所需的时间即为凝血酶原时间。2．简要操作采血并别离血浆→加血浆与凝血活酶试剂〔1︰2〕→混匀并立即计时→倾斜试管，观察结果。二、血浆凝血酶原时间235编辑课件〔二〕质量保证1．病人准备停用影响止凝血功能的药物至少1周。2．采血要求使用真空采血管、硅化玻璃管或塑料管采血，止血带使用时间不超过1分钟，采血要顺利，加血液至抗凝管后，应立即轻轻地颠倒混匀5～8次，防止标本溶血和凝固。创伤性或留置导管的血标本、溶血或凝块形成的标本、输液时同侧采集的标本均不宜做PT等止凝血试验。3．标本运送及时送检，因为血液离体后，凝血因子逐渐消耗，随着标本存放时间延长，消耗加快。4．标本离心按规定离心力与离心时间要求，及时别离标本，获得乏血小板血浆。二、血浆凝血酶原时间236编辑课件〔二〕质量保证5．组织凝血活酶〔thromboplastin〕的质量必须使用标有国际敏感指数〔internationalsensitivityindex，ISI〕的PT试剂。6．ISI和国际标准化比值〔internationalnormalizationratio，INR〕ISI值越接近1.0，表示灵敏度越高。ISI为组织凝血活酶参考品与每批组织凝血活酶PT校正曲线的斜率，即在双对数的坐标纸上，纵坐标为用参考品测定的PT对数值，横坐标为用待标定的组织凝血活酶测定的相同标本PT对数值INR计算公式为：INR＝〔病人PT值/正常人平均PT值〕ISIWHO等国际权威机构要求，每次〔每批〕PT测定的正常对照值，必须用至少来自20名以上男女各半的正常人混合血浆所测定的结果。二、血浆凝血酶原时间237编辑课件〔二〕质量保证7．测定试剂、标本温浴时间应控制在3～10分钟内，测定温度应控制在〔37±1〕℃，准确判断血浆凝固终点〔纤维