肠杆菌科鉴定(全)

历

杆

菌

科

鉴

定

流

程主

讲

人

：

王

曦

晖9版伯

杰

鉴

定

细

菌

手

册

分

为24个属，

1

0

8

个

种

现增加到31个属，常见的15个属1.占临床分离菌总数50

%2.

占

G-杆菌总

数80%3.

占败

血

症50%4.

占尿路感

染70一

.分

布●有些菌属对人类有明显的致病作用■1、鼠疫耶耳森菌--引起烈性传染病■2、埃希菌属、

志贺菌属、沙门菌属、耶耳森菌属可导致腹泻、食物中毒.伤寒●多数菌属是肠道正常菌群，也是条件致病菌二

.

临

床

意

义克雷伯菌属爱德华菌属邻单胞菌属变形杆菌属普罗威登斯菌属沙门菌属耶尔森菌属志贺菌属沙

雷

菌

属肠

杆

菌

属埃希菌属哈夫尼亚菌属枸橼酸杆菌属摩根菌属多源菌属与

人

类

感

染

有

关

的

肠

杆

菌

科

细

菌

有

3

1

个

菌

属，

其

中

临

床

标

本

中

常

见

的

菌

属

有

1

5

种■1.G

-杆

菌

,

多

数

有

鞭

毛

、

菌

毛■2.

发

酵

葡

萄

糖，

兼

性

厌

氧3

.

氧化酶阴性4.还

原

硝

酸

盐

为

亚

硝

酸

盐5.

触

酶

(

十

)6.

营

养

条

件

不高

，

.

微

生

物

特

性四

、

鉴

定

流

程

图—

—苯丙，葡盐，枸，硝，束

鸟氨对，山，肌，侧，吲哚肠杆菌科细菌

不动、嗜麦芽肠杆菌科细菌、不动、嗜麦芽菌涂

片

：G-b氧化酶试验十嗜

麦

芽非发酵菌、弧菌硝酸盐还原双糖试验不

动十FO——科的特征属间鉴定特征种间鉴定特征血清学分型种

属

鉴

定硝酸盐还原十

葡萄糖发酵氧化酶一触酶十报告细菌种名报告细菌血清型概

述■

可

用

苯丙

氨

酸

和

葡

萄

糖

酸

盐

试

验

将

肠

杆

菌科

分

为四大

组五

、

肠

杆

菌

科

的

初

步

分

群菌

属

名变形杆菌属普鲁维登斯菌属摩根氏菌属克雷伯菌属肠杆菌属沙雷菌属哈夫尼亚菌埃希菌属志贺菌属沙门菌属枸橼酸杆菌属爱德华菌属耶尔森菌属葡萄糖酸盐

十十十十

苯丙氨酸十十十

试

验变形

杆

菌

属普鲁维登菌属摩根氏菌属塔特姆属■

H₂S

十■枸

橼

酸

盐

+/-

十■

靛

基

质

+/-

十

十

六

.苯

丙

氨

酸

阳

性

组

的

各

属

鉴

别试

验

普通变形杆菌

奇异变形杆菌

潘氏变形杆菌

产粘液变形杆菌淀

基

质

十

鸟基酸

十

木

糖

十

十

十

1.变

形

杆

菌

属

内

各

种

的

鉴

别试

验

产

碱普鲁维登斯菌斯图普鲁维登斯菌雷

极普鲁维登斯菌侧金盏花醇甘

露

醇十LT—十2

.

普

鲁

维

登

菌

属

各

种

的

鉴

别生

化

反

应

雷

氏

斯

氏

产碱

拉

氏

海

氏吲

哚

产

生

十

十

肌

醇

TT

十

V海

藻

糖

T

戊

五

醇

十赖

氨

酸

十动

力

十3

.

摩

根

菌

属

种

的

鉴

定试

验摩根摩根菌

摩

根菌(

生

物1

群

)4

.苯丙氨酸阳性组菌属鉴别索引图)s十靛基质

鸟氨酸十靛基质十摩根菌禾潘

菌奇氏

形异变形杆菌枸橼酸盐十十逼亦

菌木干形侧金盏花醇苯丙氨酸+十甘露醇甘1显昱百住禾碱寸立自寻组盘菌鼻呆原试

验克雷伯菌属沙雷菌属肠杆菌属哈夫尼亚菌属动

力十十十DNA酶十一鸟氨酸一十十十枸缘酸盐十十十七

.

葡

萄

糖

酸

盐

阳

性

组

各

属

鉴

别分

类

原克雷伯菌属(klebsiella)有5个种，2个亚种臭鼻亚种肺

炎

克

雷

伯

菌鼻硬结亚种产

酸

克

雷

伯

菌解

鸟

氨

酸

克

雷

伯

菌克雷伯菌属培

养

特

征血琼脂上菌落较大，呈

黏液状，

以接种环挑取

时易拉成丝在肠道培养基上呈发酵乳

糖

小

菌

落在液体培养基内生长混浊

、

浓

厚

、

可

见

菌

膜

，管

底

有

粘

性

沉

淀

物K.pneumoniae

菌落(血平板)克雷伯菌属>>试验产酸克雷

伯菌肺炎克雷

伯菌臭鼻克雷

伯菌鼻硬结克

雷伯菌定基质十—————

—甲基红——十十丙二酸盐十十十1.克

雷

伯

菌

属

各

种

的

鉴

别沙

雷

菌

属

(

普

通

营

养

平

板

)试

验粘

质

沙

雷

菌液

化

沙

雷

菌红

色

沙

雷

菌鸟氨酸十十阿拉伯糖十十2

.沙

雷

菌

属

各

种

的

鉴

别产气肠杆菌(E.aerogenes

)阴沟肠杆菌(E.cloacae

)

杰高维肠杆菌

坂崎肠杆菌

泰

洛

肠

杆

菌

中

间

肠

杆

菌

聚

团

肠

杆

菌河生肠杆菌生物群1◆

后

增

加

7

个

菌

阿

氏

肠

杆

菌

何

氏

肠

杆

菌

溶

解

肠

杆

菌

超

压

肠

杆

菌

克

沃

尼

肠

杆

菌

考

伯

肠

杆

菌

帕

瑞

勒

肠

杆

菌分

类

：

现

有

1

3

个

种

2

个

生物

型原

有

7

个

种

2

个

生

物

型河

生

肠

杆

菌

生

物

群

2肠杆菌属试验坂崎杆菌阴沟杆菌产气杆菌格高菲杆菌赖氨酸十十山梨醇十十>本菌属的细菌生化反应不典型，

常用的商品化鉴定系统>很难达到90%以上的鉴定正确率3

.

肠

杆

菌

属

各

种

的

鉴

别4.

哈

夫

尼

亚

菌

属

鉴

定■

葡萄

糖

酸

盐

枸

橼

酸

盐棉

子

糖十5.葡

萄

糖

酸

盐

阳

性

菌

属

鉴

别

双

岐

索

引

图赖氨酸鸟氨酸十山梨醇—多

源

肠

杆

菌十

阴沟肠杆菌葡萄糖酸盐+侧金盏花醇臭鼻

伯菌鼻硬结克雷伯菌+靛基质十十山梨醇十十枸橼酸盐十赖氨酸鸟氨酸丙二酸盐十十肺

炎

克

雷

伯

菌十

花沙雷菌十

阴沟肠杆菌阿拉伯糖格高菲肠杆菌哈夫

亚菌斤己粘质沙雷菌贩崎肠杆菌酸

伯菌产

气肠杆菌色沙雷菌梨醇十十试

验沙

门

菌属志贺菌属埃希菌属枸

橼酸

杆菌属耶尔森

菌属爱德华菌属甘露醇十十十十十——ONPG—

——

—十十十动

力十—

—十十十十枸橼酸盐+/—————十———赖氨酸十—

—十——十八.苯

丙

氨

酸

葡

萄

糖

酸

盐

阴

性

组

的

各

属

鉴

另差

异

枸

橼

酸

杆

菌

(C.diversus)

→库

斯

枸

橼

酸

杆

菌无

丙

二

酸

盐

枸

橼

酸

杆

菌

(C.amalonaticus)(C.koseri

)布拉吉枸橼酸杆菌

(C.braakii)雷登枸橼酸杆菌塞拉克枸橼酸杆菌魏克曼枸橼酸杆菌

扬哥枸橼酸杆菌吉乐枸橼酸杆菌穆利枸橼酸杆菌法玛丽枸橼酸杆菌枸

橼

酸

杆

菌

属

(Citrobacter)

包

括

1

1

个

种(C.rodentium)(C.sedlakii)(C.werkmanii)(C.youngae)

(C.gillenii)(C.murliniae)(C.farmeri)弗劳地枸橼酸杆菌

(C.freundii)枸橡酸杆菌属分

类丙二酸盐阴性枸缘酸杆菌试

验费劳地枸

椽酸杆菌异型枸缘

酸杆菌鸟氨酸十十侧

金

盏

花

醇十1.枸

橼

酸

杆

菌

属

各

种

的

鉴

别>

注意：很多鉴定系统的数据库中不包括枸橼酸杆菌属新种名称和分类资料试

验迟缓爱德华菌保科爱德华菌鱼念鱼爱德华菌H₂S十—甲基红十十

2.爱

德

华

菌

属

各

种

的

鉴

别试

验大

肠

埃

希

菌大

肠埃希

菌

(

不活

泼

株

)葡

萄

糖

产

气十动

力十

3.埃

希

菌

属

种

的

鉴

别临

床

意

义(Clinical

Significance)

愿：co疏以肠道外感梁客见，主要有泌尿素统感架E.coli中的致病菌株能引起各种类型的腹泻，根据其不同的血清型别、毒力和临床症状致泻性E.coli分为5类：肠毒素型大肠埃希菌(ETEC)肠致病性大肠埃希菌(EPEC)肠

侵

袭

型

大

肠

埃

希

菌

(EIEC)肠出血型大肠埃希菌

(EHEC)肠凝聚型大肠埃希菌(EAggEC)埃希菌属醋酸钠葡萄糖铵利用粘质酸盐

产酸试验大

肠

埃

希

菌十十志贺菌属————鉴

定

要

点不

活

跃

大

肠

埃

希

菌

与

志

贺

菌

易

混

淆

，

需

相

互

鉴

别在中国兰平板上为蓝色菌落在伊红美蓝平板上为紫黑色菌落

在麦康凯和SS

平板上为红色菌落大肠埃希菌

大肠埃希菌

大肠埃希菌埃希菌属伤寒沙门菌菌落形态

(SS平板)培

养

特

征兼

性

厌

氧

菌营

养

要

求

不

高菌

落

呈

中

等

大

小

、

无色

、

半

透

明

、

光

滑在

SS

平

板

上

，

因

产

生H₂S可形成黑色中心的

菌

落四沙门菌属血

清

学

分

型常用

血

清：O

多价血

清

(

含A～F

群

)O、H、Vi

抗原因

子

血

清方法：从临床标本中分离到菌株经纯培养后，符

合沙门菌属生物学特性，则采

用A-F

多

价

血

清

初

步

确

定是

否

为Salmonella1.如阳性，

即用O因子血清分群；

再用第一相H因子

血

清

定

型，

也

可

用

第

二

相

辅

助

定

型2.如阴性：

应

考

虑是

否

有Vi

抗原?凝集：做O

多价和单价凝集不凝集：

可能为A～F

以外去除Vi抗原沙门菌属加热或传代图

9

-

1

5

伤

寒

沙

门

菌

纯

培

养

的

镜

下

形

态(

革

兰

染

色

)群菌

型O抗原H₁相H₂相A甲型

副

伤

寒1,2,12a

B乙

型

副

伤

寒1,4,12b1.2鼠伤寒1,4,121.2C1丙型

副

伤

寒6,7(Vi)C1.5C1猪霍乱6,7<C>1.5D伤

寒1,9(Vi)d

肠

炎1,9,12g,m

都柏林1,9,12(Vi)g,p

E火

鸡3,10e,h1.W山夫顿3,15e,h1.bF河伯丁1,3,19g,t③如是双相菌，进一步用复合血清1、2

、5检查第2

相

抗

原

。一菌落形态(麦康凯平板)◆兼性厌氧菌◆

营养要求不高◆普通平板：

中等大

小

、

半

透

明

、

光

滑◆鉴别培养基：

乳糖不

发

酵

的

菌

落培

养

特

性志贺菌属发酵葡萄糖产酸不产气赖

氨

酸

(

一

)H₂S

(一)尿

素

(

—

)动力

(

—

)

种

属

鉴

定

菌

属

特

征志贺菌属

5.

志

贺

菌

属

的

鉴

定■先用志贺多价血清与菌种凝集，如多价血清凝集为志

贺菌，多价里不包含鲍氏C₁6-20再进一步用因子血清凝

集

而定

群

。亚群和种血

清

型痢疾A1—10福氏B

1a,1b,2a,2b,3a,3b,4a,4b,5,6鲍氏C₁—C₁

s宋氏D6、

苯

丙

氨

酸

、

葡

萄

糖

酸

盐

阴

性

组

菌属鉴别双

歧

索

引

图枸橼酸盐赖氨酸十葡萄糖产气十侧金盏花醇十异

鸟氨酸十丙二

酸

盐阴性枸缘酸杆菌型枸橡酸杆菌迟缓爱德华菌十志贺菌属苯丙氨酸、葡萄糖酸盐大肠埃希菌十甲基红十大

肠

埃

希

菌(

不

活

泼

株)甘露醇ONPG费劳地枸橡酸杆菌保科爱德华菌耶尔森菌属子2yJ力十態鱼爱德

华

菌沙门菌属H₂S十

十十J

肠杆菌鉴定选用多少生化反应管

为

好苯

丙

氨

酸

、

葡

萄

糖

酸

盐

、

赖

氨

酸

、

鸟氨

酸

、

氨

基

酸

对

照

、

枸

橼

酸

盐

、

硝

酸盐

、

侧

金

盏

花

醇

、

山

梨

醇

、

甘

露

醇

、ONPG

、靛

基

质

、

双

糖

(H₂S)九

.API鉴

定

系

统(20E)菌液制成0.5麦氏浊度，加入20

E板条，十

、

肠杆

菌

科

某

些

菌

株的特殊性质图9-53

普通变形杆菌在血琼脂平板上迁徙生长(18～24h)1.变

形

杆

菌

菌

落

呈

迁

延

性

生

长图9-33

肺炎克雷伯菌丝状粘连(麦康凯琼脂平板)2.克

雷

伯

菌

自

身

菌

落

可

拉出

丝

来图9-45

成团泛菌在营养琼脂平板上的菌落特征(18~24h)3.多

源

聚

团

菌

在M-H

平

板

上

产

生黄

色(18～24h)4

.

沙

雷

菌M-H

平板上产生铁锈红色图9-50粘质沙雷菌在营养琼脂平板上的菌落特征图9-29

宋内志贺菌乳糖不发酵菌株在麦康凯琼脂平板上的菌落特征(18～24h)5.宋内志贺菌无色不透明菌落变

形

杆

菌爱

德

华

菌伤

寒

沙

门

菌费

劳

地

枸

橼

酸

杆

菌大

肠

杆

菌6.

能产生H₂S的菌株大

肠

杆

菌

的

特

点对多种糖产酸产气，吲哚、甲基红、

VP

、

枸

橼

酸

盐(IMVC)++--

五种致病性大肠杆菌要用特异性血

清

凝