还原糖的测定

还原糖的测定

还原糖是指含有自由甲基（葡萄糖）或酮基（如果是糖）的单糖和某些二糖（如葡萄糖和酒精）。在碱性溶液中,还原糖能将Cu2+、Hg2+、Fe3+、Ag+等金属离子还原,而糖本身被氧化成糖酸及其他产物。糖类的这种性质常被用于糖的定性和定量测定。1测量1.1直接滴注法gb法1.1.1氧化亚铜的制备将一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合,立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀;这种沉淀很快与酒石酸钾反应,生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。在加热条件下,以次甲基蓝作为指示剂,用样液滴定,样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应,生成红色的氧化亚铜沉淀;这种沉淀与亚铁氰化钾络合成可溶的无色络合物;二价铜全部被还原后,稍过量的还原糖把次甲基蓝还原,溶液由兰色变为无色,即为滴定终点;根据样液消耗量可计算出还原糖含量。1.1.2还原糖检索表的计算(1)用已知浓度的葡萄糖标准溶液标定的方法;(2)利用通过实验编制出的还原糖检索表来计算。在测定过程中要严格遵守标定或制表时所规定的操作条件,如热源强度(电炉功率)、锥形瓶规格、加热时间、滴定速度等。1.1.3还原糖的测定本法又称快速法,它是在蓝-爱农容量法基础上发展起来的,其特点是试剂用量少,操作和计算都比较简便、快速,滴定终点明显。适用于各类食品中还原糖的测定。但测定酱油、深色果汁等样品时,因色素干扰,滴定终点常常模糊不清,影响准确性。本法是国家标准分析方法。1.2磷酸滴注法1.2.1氧化亚铜的计算将一定量的样液与一定量过量的碱性酒石酸铜溶液反应,还原糖将二价铜还原为氧化亚铜,经过滤,得到氧化亚铜沉淀,加入过量的酸性硫酸铁溶液将其氧化溶解,而三价铁盐被定量地还原为亚铁盐,用高锰酸钾标准溶液滴定所生成的亚铁盐,根据高锰酸钾溶液消耗量可计算出氧化亚铜的量,再从检索表中查出与氧化亚铜量相当的还原糖量,即可计算出样品中还原糖含量。由反应式可知,5摩尔氧化亚铜相当于2摩尔高锰酸钾,故根据高锰酸钾标准溶液的消耗量可计算出氧化亚铜量。再由氧化亚铜量检索附表4得出相当的还原糖量。1.2.2色样液的测定,武本法是国家标准分析方法,适用于各类食品中还原糖的测定,有色样液也不受限制。方法的准确度高,重现性好,准确度和重现性都优于直接滴定法。但操作复杂、费时,需使用特制的高锰酸钾法糖类检索表。1.3somogii法1.3.1氧化亚铜的降解将一定量的样液与过量的碱性铜盐溶液共热,样液中的还原糖定量地将二价铜还原为氧化亚铜,生成的氧化亚铜在酸性条件下溶解为一价铜离子,并能定量地消耗游离碘,碘被还原为碘化物,而一价铜被氧化为二价铜。剩余的碘用硫代硫酸钠标准溶液滴定,同时做空白实验,根据硫代硫酸钠标准溶液消耗量可求出与一价铜反应的碘量,从而计算出样品中还原糖含量。1.3.2生物材料的测量方法该法是微量法,检出量为0.015~3mg。灵敏度高,重现性好,结果准确可靠。因样液用量少,故可用于生物材料或经过层析处理的微量样品的测定。终点清晰,有色样液不受限制。1.4甘油铜法1.4.1氧化亚铜和铜的制备将硫酸铜溶液加一定量甘油后与氢氧化钠溶液混合生成可溶性的甘油酮溶液。准确吸取样品溶液加适量甘油酮,在加热条件下,以次甲基蓝作为指示剂,用标准糖溶液滴定,样液中的还原糖与甘油酮反应,生成红色的氧化亚铜和铜沉淀。同时做空白实验。根据两次消耗标准糖的体积可计算出还原糖的含量。1.4.2斐林氏糖还原糖的制备本法是斐林式法的改进,终点明显,易于掌握,重现性好,简便快速,是测定还原糖