黄体酮对先兆流产患者血清pibf表达的影响

黄体酮对先兆流产患者血清pibf表达的影响

所谓早生妊娠（ta），是指出生环境、母亲、白术、免疫因素等。孕酮是维持妊娠最基本的激素,能够在整个孕期支持妊娠。一项前瞻性、开放式的大样本临床对照研究显示,孕早期内分泌及免疫学因素导致的先兆流产患者,及时、足量、规律地单独使用黄体酮可以改善围生儿结局,同时不增加围生儿畸形的发生率。目前,有关黄体酮如何发挥胚胎保护作用的免疫学机制研究,国内报道较少。本研究通过检测先兆流产患者(排除黄体功能不足)在黄体酮治疗前后血清孕酮诱导的封闭因子(progesterone-inducedblockingfactor,PIBF)的表达水平,探讨妊娠早期PIBF与先兆流产的关系,以期为黄体酮治疗先兆流产提供新的理论依据。1血清孕酮检测选取2011年7月至12月因先兆流产在我院妇科门诊接受黄体酮保胎治疗的30例患者作为实验组,选择同期健康早孕妇女40例作为对照组。两组均为初产妇,平均年龄(26.80±2.33)岁;既往月经规律、无不良孕产史及其他疾病史;停经6~7周,经B超证实宫内单胎妊娠,孕囊大小符合孕周;实验组孕妇均经血清孕酮检测排除黄体功能不足。(1)先兆流产诊断标准参照《妇产科学》第7版(人民卫生出版社):妊娠12周前有少量阴道出血和(或)伴有下腹隐痛或腰背痛,妇科检查证实出血来自宫腔,宫口未开、胎膜未破、无妊娠物排出。(2)血清孕酮检测排除黄体功能不足。参照《妇产科学》第4版(人民卫生出版社)。(3)治疗2周后随访,腹痛、出血症状消失,B超证实胚胎存活,孕28周随访,B超胎儿系统筛查未见发育异常。(1)停经后无先兆流产症状;(2)孕期未接触孕激素制剂;(3)治疗2周后随访,无先兆流产症状,B超证实胚胎存活,孕28周随访,B超胎儿系统筛查未见发育异常。1.2血清孕酮及pibf的检测两组同时采用休息、口服爱乐维(30片,BayerS.A)等一般治疗。实验组加用黄体酮(1ml:10mg/支,上海通用药业)20mg肌内注射,每日1次,治疗2周后随访。采用酶联免疫吸附生物素双抗体夹心法(ELISA)测定血清孕酮及PIBF的含量,检测试剂购自美国SANTACRUZ公司,所有操作和测定过程均按试剂盒说明书进行。采用SPSS12.0统计软件进行分析,数据比较采用t检验,以表示,两变量之间作相关性分析,P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1两组均房子的基本情况两组孕妇的年龄、妊娠次数、治疗前妊娠时间及治疗后妊娠时间均无显著性差异(P>0.05),见表1。2.2两组孕酮、pibf水平比较治疗前,两组孕妇血清孕酮水平无统计学差异(P>0.05),实验组PIBF水平显著低于对照组(t=3.076,P<0.05)。治疗后,实验组孕酮水平显著高于对照组(t=2.564,P<0.05);两组PIBF水平均较治疗前显著升高(t=4.789,P<0.05;t=15.054,P<0.05);实验组PIBF水平达到对照组同期水平,两组相比差异无统计学意义(P>0.05)。对照组治疗前、后血清孕酮差异无显著性(t=0.898,P>0.05)。见表2。2.3实验组两变量间的相关关系治疗前,对照组血清孕酮与PIBF之间存在正相关(r=0.356,P=0.048),实验组两变量之间不存在相关关系(r=0.107,P=0.575);治疗后,两组的两变量之间均不存在相关关系(r=0.108,P=0.509;r=0.016,P=0.934)。3讨论3.1黄体酮的药养作用孕酮有助于妊娠维持,主要体现在:妊娠早期(1)孕酮主要作用于子宫内膜的孕激素受体,提高子宫内膜的容受性,改善胚泡着床环境使之利于着床;(2)抑制母体对胎儿抗原的免疫应答反应及对滋养细胞的排斥反应,有利于胚胎成功植入;(3)促进合体滋养细胞合成与分泌HCG的同时,参与妊娠免疫调节,维持早期胚胎发育;(4)促进血管内皮细胞一氧化氮(Nitricoxide,NO)及NO合成酶的合成,同时抑制子宫及血管平滑肌产生过多的前列腺素F2(Prostaglandin,PG),抑制血管和子宫收缩;(5)中和雌激素诱导的子宫催产素和血管紧张素受体数量,对抗妊娠过程中逐渐增强的子宫应激性,起到镇静子宫肌细胞的作用,利于妊娠的维持。国内研究发现,黄体酮通过不同途径给药均可有效提高孕早期有先兆流产症状孕妇的保胎成功率。地塞米松可促使胎盘分泌促肾上腺皮质激素释放激素,并诱发宫颈成熟和宫缩作用。妊娠晚期,黄体酮能通过拮抗地塞米松的作用,延长孕周以改善围生儿结局。先兆流产除了由于胚胎染色体异常、畸形等不宜保胎外,黄体酮治疗由于黄体功能不足、内分泌免疫功能异常以及子宫收缩所引起的先兆流产有效。孕激素治疗先兆流产的免疫学机制研究值得关注。现已知,正常妊娠时,母体免疫功能发生变化,形成主要由特异性免疫抑制物如封闭抗体(blockingantibodies,BA)、抑制性T细胞(Th1/Th2)与非特异性因子(雌激素、孕激素、HCG、PGE2等)共同组成的免疫维持系统。各免疫学因素通过有机协调参与维持妊娠。若母体免疫平衡失调,排斥作用增强,则可能引起流产。细胞因子则是将免疫学因素和内分泌因素联系起来的纽带。3.2妊娠合并心脏病理血药浓度对血清pibf表达的影响1985年Szekeres-Bartho等最早提出了与调节妊娠免疫应答密切相关的有效因子PIBF,并发现健康妊娠妇女外周血中PIBF阳性的淋巴细胞在妊娠的任何阶段均明显高于有流产或早产临床症状者。近年发现,妊娠时异基因胚胎抗原刺激胎儿-母体界面vr1/CD56+的蜕膜细胞及源于外周血的T淋巴细胞产生孕激素受体(progesteronereceptor,PR),孕酮通过与PR结合并充分激活PR,产生免疫调节因子PIBF,其分子量为34kD,现已测序并克隆出PIBFmRNA序列,且已可重组人类PIBF蛋白。PIBF的妊娠免疫调节作用涉及细胞免疫和体液免疫系统的多个方面,通过抑制单核细胞释放花生四烯酸,产生抗流产作用。PIBF能诱导产生不对称抗体,发挥非细胞毒性作用;支持以Th2型细胞因子应答为主的保护性免疫调节,降低蜕膜自然杀伤(NK)细胞的活性,抑制Th1型细胞因子的表达,影响Th1/Th2型细胞因子的平衡,介导免疫调节并发挥孕激素的抗流产效应。Hudic等通过ELISA检测发现,先兆流产患者血清及尿液中的PIBF浓度均显著低于正常妊娠妇女,Th2型细胞因子白细胞介素10(IL-10)的水平低于正常妊娠妇女;同时,Th1型细胞因子IL-6、肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactor-alpha,TNF-α)、干扰素γ(interferon-gamma,INF-γ)的水平则明显高于正常妊娠妇女。他们认为,PIBF水平在妊娠早期可以用于预测先兆流产。动物研究发现,在排除黄体功能不足的情况下,外源性的孕激素(黄体酮)可以上调异基因孕鼠着床期子宫内膜中PIBF的表达水平及血清中孕酮的含量。本研究发现,在排除黄体功能不足的情况下,先兆流产组血清PIBF表达水平明显低于正常妊娠组(P<0.05),同时血清孕酮与PIBF水平之间不存在相关性(P>0.05)。推测其与自身孕激素的利用改变有关:未能诱导T淋巴细胞产生有效浓度的PIBF发挥胚胎保护作用,致使介导细胞免疫的Th1型细胞因子表达增强,促胚胎供血的血管系统发生凝血性血管炎,胚胎血供降低;同时,Th1型细胞因子能够增强蜕膜NK细胞活性并使其转化为淋巴因子激活的杀伤细胞(lymphokineactivatedkillercells,LAK),导致母胎界面的免疫排斥反应增强,出现先兆流产的临床症状。经黄体酮治疗后,先兆流产组血清孕酮明显上升并高于对照组,这与外源性的黄体酮可以在血清中被检测出有关;正常妊娠早期血清PIBF水平随孕周增加而上升,先兆流产组经黄体酮治疗后,血清PIBF水平明显升高并达到对照组水平(P>0.05)。推测外源性的黄体酮能够诱导T淋巴细胞产生免疫应答并激活PR,产生有效浓度的PIBF,使Th1/Th2细胞因子网络向Th2型免疫偏移,利于正常妊娠的继续。同时发现,治疗前对照组血清孕酮与PIBF水平之间存在正相关。可能是正常妊娠早期孕酮能以剂量依赖方式诱导淋巴细胞生成PIBF,但是随孕周增加,孕酮处于较平稳的水平,而PIBF则呈明显上升趋势,因而两变量之间不再存在相关关系。由此推测,妊娠早期PIBF表达降低是先兆流产的原因之一,黄体酮通过诱导淋巴细胞产生PIBF,发挥胚胎保护作用。综上,妊娠早期检测血清PIBF水平有助于先兆流产的临床诊断,同时为黄体酮治疗先兆流产提供重要的理论依据。PIBF的表达及免疫调节作用是妊娠早期免疫网络机