四逆汤对供心保护作用的实验研究

四逆汤对供心保护作用的实验研究

根据这项研究，四逆汤（sd）可以增加心肌的能量储备，改善缺氧期间的轴功能和能量代谢，并维持心肌的能量物质。目前SD与供心保存的关系尚少见文献报道。本实验在灌洗液、保存液及再灌液中加入SD,以探讨SD对供心冷缺血和再灌注期间ATP的影响,为今后临床应用,提高临床供心保存质量提供理论依据。1动物和小组1.1动物和小组健康新西兰大白兔16只,雌雄不拘,体重(2.62±0.25)kg。随机分成两组,1组为对照组,2组为实验组,每组各8只。1.2加65%乙醇、乙醇、干酵母粉、无乙醇、干味剂的制备四逆汤按附子∶干姜∶甘草以5∶2∶2配伍(广州中医药大学中药鉴定教研室鉴定),符合药典(1900年版一部)的药用规定。将附子、甘草用水浸泡30min,加入干姜用水煎3次,每次45min,合并滤液,水浴上浓缩成糖浆状,加95%乙醇使含乙醇量达50%,搅拌,静置24h,过滤,回收乙醇,再浓缩成糖浆状,加95%乙醇至含乙醇量达80%,静置24h,过滤,回收乙醇,水浴上浓缩至无乙醇味,保留。用新鲜注射用水将所得之糖浆状物溶解为注射液(浓度:1mL=1g生药),密闭,于100℃煮沸40min消毒,保存备用。1.3主动脉与心肌间通量的检测用氯胺酮(5～7mg/kg)静脉麻醉,气管切开插管接呼吸机辅助呼吸,股动脉和颈外静脉分别穿刺插管测动脉压(BP)和中心静脉压(CVP)。正中劈胸骨切口,测心包腔温度。全身肝素化(3mg/kg)后分别于主动脉和上、下腔静脉根部过带,主动脉根部插灌注针。用活检针取左室心肌测ATP。阻断上、下腔静脉和主动脉,停止呼吸,同时剪开左、右房。1组用4℃UW液(美国Wisconsin大学提供,下同),2组用UW+SD液(浓度为10mL/L,下同)行冠状动脉灌洗(温度:4℃,量:10mL/kg,压力:8kPa)。然后立即常规取下心脏。1组于0～4℃UW液,2组于0～4℃UW+SD液中在4℃冰箱内保存6h。取左室心肌测ATP。然后于恒温37℃的Langendorff模型中用KHB液恒压灌注30min供心(压力:8kPa)。其中2组KHB液中加入SD(浓度:10mL/L),再取左室心肌测ATP。1.4色谱分析测定采用反相高效液相色谱法测定。采用反相SherisorbC18色谱柱,紫外线检测波长为254nm,流动相为0.05M磷酸胺缓冲液(pH=6.0),流量为0.8mL/min。1.5统计学处理所有数据均用SPSS10.0forWindows统计软件包进行统计学处理,实验数据均用x¯±sx¯±s表示。各指标用两组间两样本均数t检验,P<0.05差异有显著性。2结果2.1表1显示了在服用心理学之前的一般情况，两组之间的差异没有明显2.2表2显示了每个时间点的心肌消耗含量测定的结果3sd对供心冷保存和再灌注损伤的影响心脏移植是晚期或进展期心脏病人有效的治疗方法。由于供心的缺乏,许多病人在等待供心过程中死亡。改善供心保存质量,延长供心保存时限是目前供心保存的研究热点,也是增加供心来源的主要途径。延长供心保存时限有赖于供心缺血期良好的心肌保护。许多学者认为:心肌保护与ATP密切相关,心肌ATP含量是衡量细胞完整性及恢复可能性的最好指标。本实验以心肌ATP含量作为检测指标,观察供心冷保存和再灌注过程中,SD对心肌ATP含量的影响,从而了解SD对供心保存和再灌注损伤的保护作用。结果显示:SD能明显提高供心冷保存和再灌注过程中的ATP含量,表明其对供心保存和再灌注损伤具有良好的保护作用。3.1特殊条件:子被了制度突变供心功能恢复与供心能量代谢、ATP储备、合成和消耗密切相关。ATP减少,需能活动受损,Na+进入细胞内,细胞肿胀,细胞器(线粒体、内质网等)也发生肿胀;而ATP的缺乏又使离子转运发生障碍,从而加重了机能代谢的障碍,使供心功能难以恢复,甚至由于溶酶体膜的通透性增加,溶酶释放,致细胞破坏、死亡。冷保存期间,虽然ATP消耗减少,但由于养分和氧的供应障碍,有氧代谢停止,线粒体产能障碍,线粒体只能通过无氧代谢产生能量。必然导致ATP储备下降。许多学者认为:当ATP含量下降到缺血前的50%时,心肌将产生不可逆的病理变化,使再灌后收缩功能难以恢复。因此ATP已成为评价供心质量的最佳指标之一。3.2sd对atp的影响吴伟康等实验证明:SD能增加ATP储备,增强缺血心肌在无氧状态下的能量形成,改善缺血时线粒体功能。SD在心肌缺血时,能保护心肌线粒体,改善线粒体呼吸功能,无氧代谢增强,产生较多ATP维持细胞功能。作者以前实验证实,SD有抗供心冷缺血再灌注损伤的作用。本实验结果表明:再灌注前和再灌注后,实验组ATP含量均明显高于对照组。说明SD能增强缺血心肌在无氧条件下的能量合成,使细胞内维持较高的ATP水平,不仅有利于维持细胞膜内外的离子梯度,减轻钙超载,减少细胞水肿