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文档简介
电针百会、足三里、太冲穴对下丘脑-内啡肽含量的影响
指针可以调节身体的紊乱状态。本实验观察慢性应激所致疲劳状态下电针百会、足三里、太冲穴所引起的下丘脑神经元结构中β-内啡肽(β-Endorphin,β-EP)含量的改变,说明应激对疲劳模型损伤的影响及电针对其调节作用。1材料和方法1.1动物中心模型Wistar雄性大鼠,体重160~180g,由北京维通利华实验动物中心提供。购入后适应饲养1周,随机分为正常组、模型组、电针治疗组,每组8只。1.2大鼠的一般情况观察从第8天起,每组每笼饲养8只,除正常组外,其它各组动物开始接受21天各种不同的应激,即单日冷水游泳,每次30min,双日束缚应激,束缚大鼠四肢,每次3h。造模期间,每天观察并记录大鼠的饮水量、进食量、体重、大鼠粪便及毛色泽和眯眼等情况。造模的第1天和第21天在动物室中分别进行以下测定以判定模型的成功:Open-Field法测定行为、鼠尾悬挂实验、力竭游泳实验。1.3穴位定位使用电针组在造模同时进行治疗,取“百会”“足三里”和“太冲”穴,定位参照《实验针灸学》(全国协编教材)大鼠穴位定位,“足三里”和“太冲”(左右两侧交替使用,每次取单侧)。以30号,1寸毫针进行针刺,“百会”平刺10~15mm,“足三里”、“太冲”直刺10~15mm。针柄接WQ-6F型电针治疗仪,电压4.5V,疏密波型,频率20Hz,强度以局部皮肤肌肉轻微颤动为度,每次留针30min,每日1次,连续治疗21天。2评估切片的选择2.1取材及染色大鼠断头冰上迅速剖取脑组织,常规制备石蜡切片、HE染色、β-EP免疫组化法测定。2.2图像分析用美国TN-8502图像分析仪进行分析。测量大鼠下丘脑β-EP样阳性纤维的光密度和颗粒面积。为保证所测结果的准确性,所选待测的切片平面基本一致。每组大鼠测3张切片,共测9张切片,每张切片均测第三脑室两侧(包括第三脑室的侧壁)的区域,每侧各测2个视野,4个视野所测光密度或面积之和为一个统计样本。为了使其结果更准确,采用图像分析仪对不同组别下丘脑核团β-EP阳性纤维和终末进行定量分析,结果见表1和表2。2.4统计处理数据用SPSS10.0软件进行分析,以平均值±标准差(X¯¯¯±S)(X¯±S)表示,组间差异采用方差分析(ANOVA),以P<0.05作为显著性差异的标准。3结果各组大鼠下丘脑内β-EP阳性纤维的密度有所不同,脑内β-EP阳性纤维各模型组含量均高于正常组。4大鼠脑内-ep释放和免疫调节的作用β-EP属于内源性阿片肽,是机体的主要应激激素之一。内源性阿片肽的主要功能是使机体在不同应激条件下保持稳态,它主要涉及疼痛、心血管和免疫与应激有密切关系的调节功能。β-EP作为重要的阿片肽之一,似乎是中枢神经系统阿片肽体内平衡的镜子,在脑内分布比较特殊,主要分布在下丘脑、杏仁核等。目前已经有很多实验证明,阿片肽在免疫调节中有重要作用,在多种应激条件下,都可观察到β-EP含量的改变,并且对机体的免疫功能有影响。β-内啡肽能增强NK细胞活性,还能促进人单核细胞和中性粒细胞的趋化作用。采用免疫组织化学的方法检测推测电针可能不仅抑制脑内β-EP的释放,而且主要抑制β-EP的合成,使脑内β-EP样阳性纤维的密度减低。总之,电针可通过抑制大鼠脑内β-EP的合成和释放,使脑内β-EP的含量降低,这样与脑内阿片受体结合产生作用的机会减少,从而减轻β-EP对应激所致疲劳后脑组织的损伤。慢性疲劳综合征(CFS)的典型疲劳和虚弱可能与与心理—神经—免疫学网络的密切联系,与中枢神经系统的β-EP含量有关。慢性应激所致疲劳时,机体生理机能的降低、内环境平衡失调可能出现功能紊乱,β-EP在机体内有广泛生物学效应,主要作用是协调和统一应激时全身各系统的机能,它可以通过影响其他中枢的活动来调节各种生理功能,起到调节心理—神经—免疫学网络的作用,但其作用的机制如何还需更进一步研究。5-ep的临床作用5.1电针可通过抑制大鼠脑内β-EP的合成和释放,使脑内β-EP的含量减少,这样与脑内阿片受体结合产生作用的机会减少,从而减轻β-EP对应激所致疲劳后脑组织的损伤,起到调节心理—神经—免疫学网络的作用。5.2慢性应激所致的疲劳时机体可能出现功能紊乱,β-EP在机体内主要作用是协调和统一应激时全身各
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