16种中草药提取物对芒果炭疽病菌的抑制作用

16种中草药提取物对芒果炭疽病菌的抑制作用

自上世纪末以来，由于大量使用有机农药，导致了严重的“3r”问题，人们越来越关注与环境和谐的植物水源清洁剂的研究。因此,从植物中寻找具有抑菌活性的物质,特别是无污染、安全性高的食药两用的植物源提取物,是农药研发的一条重要途径。中草药植物资源是我国的宝贵遗产,其抑菌作用已广泛应用于医药行业,目前也有一些中草药用于果蔬保鲜的报道。本研究旨在明确几种食药两用的中草药提取物对芒果炭疽病菌的抑制作用,为天然防腐剂和新植物源杀菌剂的进一步研究和开发提供依据。1材料和方法1.1芒果炭疽病菌16种中草药(名称见表1)均购自华南热带农业大学药品超市。芒果炭疽病菌(ColletotrichumgloeosporioidesPenz.)由中国热带农业科学院环境与植物保护研究所提供。马铃薯琼脂培养基(PDA培养基)。1.2方法1.2.1中草药提取原液的制备将各种中草药干品粉碎过40目筛,称取20g,装入500ml的圆底烧瓶中,加入蒸馏水300ml,于80℃左右的水浴中浸泡6h,充分提取其中的有效物质成分,过滤,将所得的提取液定容到300ml,即得中草药提取原液。1.2.2细菌激活将所需要的菌种接种到斜面PDA培养基上,于28℃恒温培养1周左右后,接种到平面培养基上培养至长满平皿,备用。1.2.3pda抗剂的制备吸取20ml药液与100ml培养基趁热用力摇匀,然后倒入培养皿中,每皿约15ml,制得抗性培养基。1.2.4中草药的制备采用生长速率法[2~3]测定各种中草药提取液的抑菌圈直径,以此来评定其抑菌效果。将1.2.2制得的长满平皿的培养基,用灭菌过的直径为10mm的不锈钢打孔器均匀打孔,制成菌饼,备用。每种中草药重复3次实验。空白对照组加20ml无菌水,对照药剂使用稀释1000倍的50%多菌灵。用接种针小心地将供试菌饼移置到抗性培养基上,菌丝一面向下,每皿1块,做3个平行,然后加盖并标记,置28℃培养箱中培养。72h后取出,用十字交叉法测量菌落直径,测量2次,取平均值。1.2.5数据处理方法用SAS9.0进行数据分析。根据菌落直径求抑制生长的百分率,公式如下:2结果与分析2.11中草药提取物和真菌的抑菌效果从表2中可以看出16种中草药提取物对炭疽病菌的生长具有不同的作用。通过显著性比较,金钱草等10种中草药提取物和传统农药多菌灵差异不显著,因此说明这10种中草药提取物和多菌灵的药效相当,其抑制率几乎都在40%以上。瓜蒌、远志和知母与传统农药多菌灵相比,在α=0.05时通过方差分析,差异显著,说明这3种中草药提取物对其抑制效果明显好于多菌灵而大黄等种中草药提取物抑菌的直径明显大于多菌灵作用时的直径,在α=0.05时通过方差分析,差异显著,因此说明大黄等3种中草药提取物对芒果炭疽病菌的抑制作用不如传统的多菌灵效果好,而且对该病原菌还具有促进生长的作用。见表2。2.2从抑菌效率实验结果通过上述差异显著性比较,得知瓜蒌、远志和知母3种中草药提取物对炭疽病菌的抑制作用较好。后对这3种中草药提取物进行浓度对比实验,具体见图1。由图1可以看出,远志和知母提取物的浓度稀释1∶1以后,其抑菌直径逐渐趋向于平缓,在实验范围内当浓度为1∶0时效果最好,即中草药提取物的原药液浓度最好;而瓜蒌提取物在浓度为1∶0和1∶1时抑菌直径没有明显变化,当浓度为1∶2时抑菌直径有逐渐增大的趋势3种中草药提取物对炭疽病菌的抑制作用16种中草药提取物对芒果炭疽病菌的生长具有不同的作用。利用Duncan法进行显著性比较得知,瓜蒌、远志和知母3种中草药的提取物对芒果炭疽病菌具有很好的抑制作用,而且3种中草药提取物的抑菌作用明显优于传统的化学农药多菌灵,而大黄、千里光和吴茱萸3种中草药提取物对炭疽病菌的生长具有促进作用。瓜蒌、远志和知母3种中草药提取物不同浓度对炭疽病菌抑制作用的研究表明