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组织学与胚胎学课时安排:理论:24学时组织学与胚胎学

第一章绪论组织学与胚胎学的研究内容组织学发展简史组织学研究方法如何学习?内容提要一、组织学与胚胎学的定义和研究内容组织学(histology):研究机体微细结构及其相关功能的科学。

人体解剖学组织学为什么要学习组织学?1.组织学又叫微观解剖学(Microanatomy),是解剖学知识的进一步完善。2.结构是功能的基础,学好组织学是学好生理学(Physiology)的基础。3.只有了解正常结构,才能学习其异常变化。因此组织学是病理学(Pathology)的基础。一、组织学与胚胎学的定义和研究内容细胞细胞间质(细胞外基质)上皮组织结缔组织肌肉组织神经组织器官和系统人体组织学的研究内容:细胞外基质(extracellularmatrix)是细胞产生的、存在于细胞间的物质,包括纤维、基质和体液,是细胞生存的微环境。细胞(cell)组织(tissue)器官(organ)系统(system)细胞(Cell):机体结构和功能的基本单位,成人约有1015个、200余种组织(Tissue):形态相似、功能相关的细胞和细胞间质组成,4种组织器官(Organ):不同种类组织、数量和组合方式形成相对独立的结构系统(System):若干功能相关的器官构成并完成完整的生理功能1.细胞

细胞膜、细胞质(细胞器)、细胞核是人体结构和功能的最小单位不同细胞形态各异、大小不等

光学显微镜即可观察到。细胞膜细胞核细胞质卵细胞神经细胞-神经元淋巴C(LM)Lymphocyte淋巴C

(EM)Lymphocyte2.组织:

结构相同或相似的细胞群及细胞外基质构成。四大基本组织:上皮组织,结缔组织,肌组织,神经组织3.器官:

不同的组织按一定的比例、数量及方式组合成器官。4.系统:若干功能相关的器官构成系统。神经、内分泌、免疫、循环、感觉、消化、呼吸、泌尿、生殖等细胞组织器官系统}}组织学各论组织学总论(二)胚胎学(embryology):研究人体发生和生长及其发育机理的科学,其内容包括发生过程(生殖细胞形成、受精、卵裂、植入、三胚层形成与分化、胎膜与胎盘等)、发育机制、先天性畸形等。组织学和胚胎学的学习内容

精子穿卵

受精卵

6周胚胎

11周胚胎

12周胚胎

4月胚胎畸形学:在胚胎发育过程中,由于遗传因素或环境有害因素的影响,可导致形成异常胚胎,即先天性畸形。二、组织学发展简史:根据其发展过程,可分为以下几个阶段:

1.细胞的发现(光学显微镜)

2.细胞学说的形成和创立

3.电子显微镜对细胞超微结构研究的兴起4.现代细胞生物学与分子生物学的发展

1.细胞的发现TheDiscoveryofCell英国物理学家RobertHooke(1663一1703)创造了第一台有科学研究价值的显微镜,放大倍数为40一140倍,写成一书名为《显微图谱》发表于1665年,此书中描述了他所见到的木栓是由许多盒状的小室所组成。真正观察活细胞的是同时代的荷兰科学家AntonyvonLeeuwenhoek(1632一1723),发现精子、红细胞、肌细胞、神经细胞等。对组织胚胎学基础的建立作出了重要的贡献。19世纪30年代,显微镜制造技术有了明显的改进,分辨率提高到μm以内,同时还由于切片机的制造成功,使显微解剖学取得许多新进展。2.细胞学说的形成和创立TheEstablishmentofCellTheory

德国的植物学家Schleiden论证了所有植物都是由细胞组合而成。德国的动物学家Schwann认为动物体也是由细胞所组成的。Schleiden和Schwann(1838-1839)总结了前人的工作,提出了细胞学说,宣称:"一切生物从单细胞到高等动、植物都是由细胞组成的;细胞是生物形态结构和功能活动的基本单位。"论证了生物界的统一性和共同起源。

CellBiology3.电子显微镜对细胞超微结构研究的兴起TheRaiseofResearchonUltrastructureofCellbyElectronMicroscope

1933试制成功第一台实用电子显微镜。超薄切片机的问世和电镜生物制样技术快速发展细胞内多种细胞器的发现。1965年扫描电镜问世。组胚的研究进入到一个新的阶段。4.现代细胞生物学与分子生物学的发展TheDevelopmentofModernCellBiology&MolecularBiology1953年Watson和Crick提出DNA双螺旋结构模型。证明DNA复制是半保留复制。Crick创立了中心法则(centraldogma)。1955年,提出了三联体密码假说。1961年确立了每一种氨基酸的密码。免疫组织化学技术组织工程

问题

解决方法

观察对象太小

放大(显微镜)

观察对象无色,无反差

染色(HE染色)

观察对象生化成分不同

细胞化学、免疫组织化学

观察对象是活体

培养三、组织学的研究方法和技术(一)光镜技术

1.石蜡切片:取材、固定脱水、透明包埋、切片染色、封片

2.冰冻切片、涂片、铺片、磨片等分辨率:0.2μm光镜标本制作程序切片机3.组织切片染色法HE染色:苏木精(Hematoxylin)伊红(Eosin)碱性染料将嗜碱性物质(本身酸性)染成蓝色酸性染料将嗜酸性物质(本身碱性)染成红色细胞核中的DNA和RNA、细胞质中的RNA细胞质、膜性结构(线粒体、溶酶体、滑面内质网)嗜碱性:对于碱性染料亲和力强的性质。可被苏木精染成紫蓝色。嗜酸性:对于酸性染料亲和力强的性质。可被伊红染成红色。中性:对于两种染料亲和力都不强的性质,HE染色着色淡。组织结构的嗜色性特殊染色法:硝酸银、地衣红、甲苯胺蓝染色法等活体染色:台盼蓝活体注射地衣红染色示弹性纤维甲苯胺蓝染色示肥大细胞台盼蓝活体染色示巨噬细胞血涂片Wright染色透射电镜(transmissionelectronmicroscope):

观察细胞内部结构扫描电镜(scanningelectronmicroscope):

观察组织或细胞表面的立体结构(二)电子显微镜技术分辨率:电镜(0.2nm)、光镜(0.2μm)透射电镜结构图电子密度高电子密度低透射电镜结构图扫描电镜结构图(三)组织化学技术

1.一般组织化学术原理:化学或物理反应原理

应用:对组织或细胞内某种化学成分进行定性、定位、定量及相关功能的研究。PAS反应:过碘酸-Schiff反应(periodicacidSchiffreaction,PAS反应)是显示组织或细胞内多糖的一种染色方法。多糖醛紫红色沉淀氧化Schiff试剂HIO4糖类—PAS反应肝糖原小肠粘原颗粒2.免疫组织化学(immunohistochemistry)技术:原理:抗原和抗体特异性结合。应用:检测细胞、组织中多肽、蛋白质等。(1)直接法(2)间接法免疫组织化学(辣根过氧化物酶标记)

示胰岛B细胞呈胰岛素阳性

(四)原位杂交技术(insitehybridization)为核酸(DNA和RNA)组织化学术。用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针,与细胞内待测的核酸结合(杂交),从而在原位显示该核酸。(五)细胞培养术(cellculture)

细胞培养术:是把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件下进行培养的技术。原代培养(primaryculture):传代培养(subculture):细胞系(cellline):超净工作台培养箱四、组织胚胎学学习方法要点平面与

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