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文档简介
梅毒实验室诊断2018年梅毒报告病例数1.全国报告梅毒病例数494,867(较2017年增长3.99%)居甲乙类法定传染病报告第三位,其中以隐性梅毒为主,占79.45%;2.隐性梅毒报告病例数仍然上升,较2017年上升7.62%3.三期梅毒报告数较2017年增长7.93%(3151例→3401例)4.一期、二期、三期及胎传梅毒报告病例数持续下降,分别较2017年下降11.53%、3.09%、27.41%2018年妇幼机构参加我省梅毒室间质评情况汇报参评数考核优秀考核合格考核不合格备注市州以上妇幼151320不合格:无特异或非特异结果;无半定量结果或半定量结果均与预期值不符区县级妇幼10377206民营妇产医院33002017年全国淋病报告病例数1.全国报告淋病病例133,156例,较2017年下降4.10%;2.男女均出现下降,但男性的下降更加明显(男:4.55%;女:1.67%);3.淋病报告病例数男女比例自2014年以来一直≥5:1;以男性患者为主(84.26%),男女比为5.35:1(明显高于梅毒的0.99:1)梅毒和淋病病例数“剪刀差”现象一二期梅毒报告发病率和淋病报告发病率趋势持续呈现出“剪刀差”的现象:①目前针对危险性行为的干预措施效果是有限的--②“三查一规范”措施的效果在控制梅毒传染源上有所体现--③核酸方法在淋病检测中推广应用--④淋球菌耐药的发生和传播--概述梅毒:苍白螺旋体引起的一种慢性性传播疾病。梅毒螺旋体长5~20μm,直径<0.2μm,有6~12个规则的螺旋,折光性强,较其他螺旋体亮;因其透明一般细菌染料不易染色,故称为苍白螺旋体。梅毒螺旋体运动缓慢而有规律:
梅毒的临床分期
一期梅毒早期梅毒二期梅毒后天梅毒(病期在2年以内)早期潜伏梅毒
晚期梅毒心血管和神经梅毒、(病期在2年以上)晚期潜伏梅毒等梅毒
先天梅毒早期胎传梅毒(出生后2年以内发病)晚期胎传梅毒(出生后2年以后发病)梅毒诊断标准WS273-2018诊断依据
1.流行病学史
2.临床表现
3.实验室检查诊断原则应根据病史、临床症状、体检及实验室检查等进行综合分析,作出诊断。诊断标准
1.疑似病例
2.确诊病例一期梅毒诊断依据
1流行病学史:有多性伴,不安全性行为,或性伴感染史。
2临床表现:
2.1硬下疳或不典型硬下疳2.2腹股沟或近卫淋巴结肿大3实验室检查:
3.1暗视野显微镜或镀银染色检查:
3.2非梅毒螺旋体血清学试验:3.3梅毒螺旋体血清学试验:二期梅毒诊断依据
1流行病学史
2临床表现
2.1皮损呈多形性
2.2全身浅表淋巴结肿大。
2.3可出现梅毒性骨关节损害、眼损害、内脏及神经系统损害等。3实验室检查:
3.1暗视野显微镜检查
3.2非梅毒螺旋体抗原血清学试验
3.3梅毒螺旋体抗原血清学试验
三期梅毒(晚期梅毒)诊断依据
1流行病学史
2临床表现
2.1晚期良性梅毒:
皮肤黏膜损害骨梅毒,眼梅毒,其他内脏梅毒2.2神经梅毒2.3心血管梅毒3实验室检查:
3.1非梅毒螺旋体抗原血清学试验
3.2梅毒螺旋体抗原血清学试验
3.3脑脊液检查
3.4组织病理检查隐性梅毒(潜伏梅毒)诊断依据
1流行病学史
2临床表现:
早期隐性梅毒
晚期隐性梅毒
无论早期隐性梅毒或晚期隐性梅毒,均无任何梅毒性的症状和体征。
3实验室检查:
3.1非梅毒螺旋体抗原血清学试验
3.2梅毒螺旋体抗原血清学试验
3.3脑脊液检查胎传梅毒(先天梅毒)诊断依据
1流行病学史
2临床表现:
2.1早期胎传梅毒
2.2晚期胎传梅毒
2.3胎传隐性梅毒
3实验室检查:
3.1暗视野显微镜检查:
3.2非梅毒螺旋体抗原血清学试验3.2.1血清RPR/TRUST检测随访自身比较:3.2.2与母亲分娩前最近一次滴度比较:
3.2.3双阳+有临床症状
3.3梅毒螺旋体抗原血清学试验3.3.1TP-IgM抗体:3.3.2满18个月龄后TPPA检测:
梅毒的传播途径:性接触是主要的传染途径:母婴传播:血源性传播:间接接触传播我国有关梅毒检测相关的最新国标梅毒的实验室检查结果对诊断有决定性意义!!!梅毒实验室检测方法病原学检查血清学检测组织病理学检测白细胞检测蛋白检测病原学检查-试验方法病原学检查的主要方法有暗视显微镜检查、镀银染色法和核酸检测(血液标本?)。取材:病原学检查-结果
暗视野显微镜下,典型的梅毒螺旋体呈白色发光,其螺旋较密而均匀,运动规律,运动性较强。梅毒螺旋体具有亲银性,镀银染色后显微镜下可见到染成棕色的梅毒螺旋体。病原学检查-临床意义病原学方法直接镜检到梅毒螺旋体,在临床可确诊梅毒,且具有快速、简便、直接的特点。螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最佳方法(一期、二期梅毒皮损或淋巴结节、孕妇羊膜穿刺),对于患者的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都有十分重要的意义。如未见到梅毒螺旋体,并不能排除患梅毒的可能性,取材部位不正确、螺旋体数量不足、患者已接受抗生素治疗、损害接近自然消退和实验室工作人员缺乏经验等均会影响结果的判断。梅毒血清学检测梅毒螺旋体非特异性抗体试验(非梅毒螺旋体抗原血清学试验)梅毒特异性抗体试验(梅毒螺旋体抗原血清学试验)常见的非梅毒螺旋体抗原血清学试验:1、快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)2、甲苯胺红试验(TRUST)3、性病研究实验室试验(VDRL)等基本成分是心磷脂卵磷脂和胆固醇抗原抗体结合形成复合物,凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见上述方法的敏感性和特异性都基本相似RPR(TRUST)原理:活性炭颗粒(甲苯胺红)吸附心磷脂抗原,此抗原与待检血清中的反应素结合,形成肉眼可见的黑(红)色絮状物。RPR(TRUST)试剂盒:含RPR(TRUST)抗原;直径为18mm圆圈的特制白色反应卡片;标准针头(60±1滴/mL);RPR(TRUST)试验结果图片。其他:可调水平旋转器。
RPR(TRUST)试验前期准备水平旋转仪试剂50µl移液器、吸头记号笔、废物缸工作服一次性手套、口罩、帽子生物安全柜梅毒自动旋转仪梅毒自动旋转仪
检测流程操作步骤:将检测试剂盒从冰箱中取出,室温放置30分钟。测水平旋转仪转速。在RPR纸卡上编上相应的待检样本的编号。RPR(TRUST)
定性试验a.吸取50μL血清或血浆加于卡片圈内,并均匀地涂布在整个圈内(每张纸卡有10个或12个反应圈);
b.将抗原轻轻摇匀,用标准针头吸取抗原,每个标本加1滴抗原;
c.将卡片置水平旋转器旋转8min,100±2转/min;
d.立即在明亮光线下观察结果。半定量试验RPR定量试验的指证与VDRL试验相同。
a.在圈内加入50μL等渗盐水(一般作6~8个稀释度),勿将盐水涂开;
b.吸取50μL血清或血浆作系列稀释(1:2~1:64),当稀释到最后的第6孔时,弃去50μLmL稀释液。从第6孔起将血清稀释液涂布整个圈内,再涂布第5孔,依此向前到第1孔。
c.滴加抗原,旋转时间、速度和观察结果同定性试验。滴度:出现凝集反应的血清最高稀释倍数。
结果报告结果报告:定性试验:阳性:出现不同强度的肉眼可见的黑色/红色凝集反应。阴性:不产生凝集反应。定量试验。滴度:出现凝集反应的样本最高稀释倍数。特点在USR试剂成分的基础上加入了黑色碳颗粒(甲苯胺红),作为沉淀的指示物,所不需要显微镜观察结果,可用肉眼直接观察特制的白色纸卡替代了玻片血清不需灭活可作定量试验有现成的试剂盒,携带方便操作简单价格便宜RPR质控卡RPR试验结果TRUST试验结果TRUST试验与RPR试验结果性病研究实验室试验(VDRL)特点抗原需新鲜配制,不能长时间保存血清标本需56℃灭活目前主要用于脑脊液标本检查显微镜观察结果主要用于神经梅毒的脑脊液检查,特异性高,但敏感性低非梅毒螺旋体抗原血清学试验-临床意义早期梅毒经足量规则抗梅毒治疗后滴度变化一期梅毒可转阴二期梅毒可转阴晚期梅毒治疗后可否转阴?非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、敏感性和特异性较好,适合于大量人群的筛查、产前检查及健康体检等早期梅毒硬下疳出现1-2周后,血清可呈现阳性治疗后血清滴度可下降并阴性,故可作为疗效观察、判愈、复发或再感染的指征非梅毒螺旋体抗原血清学试验假阳性技术性假阳性反应由于标本保存不当(如细菌污染或溶血)、试剂质量差或过期、或实验室操作错误所造成生物学假阳性反应是由于患者有其他疾病或生理状态发生变化,使梅毒血清学试验出现阳性梅毒假阳性的处理:两个概念:前带现象:耐血清性(血清固定):影响定量试验稳定性的因素试剂质量移液器、水平旋转仪、试剂滴管等反应孔大小样本处理要规范旋转速度、时间要准确,结果观察要及时。非梅毒螺旋体抗原血清试验方法比较VDRLRPRTRUST抗原成分心磷脂、卵磷脂、胆固醇同前+EDTA+氯化胆碱+活性炭同前+EDTA+氯化胆碱+甲苯胺红抗原稳定性不稳定,1天稳定4℃~8℃保存12个月稳定4℃~8℃保存12个月血清试验前处理需灭活不需灭活不需灭活反应板直径14mm漆圈玻片直径为18mm圆圈的特制白色反应卡片直径为18mm圆圈的特制白色反应卡片针头60±1滴/mL60±1滴/mL60±1滴/mL转速180±5次/min100±5转/min100±5转/min转时4min8min8min显微镜10×10倍显微镜下观察肉眼肉眼梅毒螺旋体抗原血清学试验原理采用梅毒螺旋体特异蛋白作抗原,检测血清中抗梅毒螺旋体IgG或IgM抗体(为特异性抗梅毒螺旋体抗原的抗体),其敏感性和特异性均较高。感染梅毒螺旋体后,一旦梅毒螺旋体抗体试验呈阳性,则患者终身阳性。常见的梅毒螺旋体抗原血清学试验:1梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)2梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)3荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)4梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)5梅毒螺旋体蛋白印迹试验(TP-WB)6梅毒免疫层析法-梅毒快速检测(RT)7测定螺旋体IgM抗体的血清学试验8化学发光免疫分析法(CLIA)TPPA试验-原理原理:超声裂解的梅毒螺旋体抗原,致敏明胶粒子,其致敏粒子与待检血清中的梅毒螺旋体抗体结合,产生肉眼可见的凝集。试验前期准备微量振荡仪试剂25µl移液器、吸头记号笔、废物缸有盖湿盒工作服一次性手套、口罩、帽子生物安全柜TPPA/TPHA试验-检测流程
试验使用前将试剂盒从冰箱中取出,室温放置30分钟恢复到15℃~30℃。在96孔UU型板上编上相应的待检样本的编号。按标签标明量(0.6ml)向每瓶冻干致敏粒子(C液)和未致敏粒子(D液)各加入溶解用液(A液)复溶,置室温不得少于30分钟。
TPPA/TPHA试验-定性试验1.每份标本做4孔,加标本稀释液(B液)至U型反应板,第1孔100µl,第2~4孔各25µl。2.用移液器取血清25µl至第1孔,反复混匀后取25µl至第2孔,连续倍比稀释至第4孔,最后1孔混匀后弃去25µµl。3.第3孔加未致敏粒子D液25µl,第4孔加致敏粒子C液25µl。4.将微量反应板置震荡器震荡30秒。5.置微量反应板于有盖湿盒内,37℃孵箱或室温(15℃-30℃)静置2小时后,观察结果。结果报告:观察加D液的第3孔,不出现凝集为有效试验。阳性:第3孔不出现凝集,第4孔出现1+~4+凝集反应。阴性:第3、4孔均不产生凝集反应。阳性结果正常情况不需要做定量试验TPPA结果TPPA/TPHA试验-注意事项
a.微量反应板要清洁干净,孔内无异物。
b.加入血清后,使用微量板振荡器振荡反应板,而不可使用水平旋转仪。
c.试剂盒不可置于0℃以下,防止冻结。不同批号试剂不可混合使用。
d.有些血清标本在血清低稀释度时可出现前带现象,此时可作定量试验;
e.如未致敏颗粒出现凝集反应,应将血清进行吸收处理后再进行试验,或改用其他试验方法。
TPPA是目前WHO公认的梅毒抗原血清学试验的“金标准”,常用于新方法、新试剂的参照标准。TPPA试验ELISA/CLIAELISA该试验是用经纯化及超声裂解处理的梅毒螺旋体为抗原包被固相板条,加上梅毒血清和辣根过氧化酶标记的抗人IgG抗体,利用酶免疫法检测患者血清中的抗梅毒螺旋体特异性抗体。采用特异的梅毒螺旋体重组蛋白作为抗原,使试验更加敏感、特异。用酶联检测仪判定试验阳性反应。本法可用于大样本血清检测。化学发光法的临床应用意义基本同ELISA
梅毒免疫层析法-梅毒快速检测(RT)
原理
利用免疫色谱原理,采用吸附有显色标记的梅毒螺旋体抗原的滤纸条,快速检测标本中的梅毒螺旋体抗体。梅毒免疫层析快速检测方法梅毒螺旋体蛋白印迹法(WB)-IgG/IgM测定螺旋体IgM抗体的血清学试验梅毒中特异性的IgM抗体是梅毒感染最早其产生的抗体。在潜伏期以及晚期患者可发现IgM水平在自愈的患者中下降的速度比经过治疗痊愈的患者慢。IgM分子量较大不能通过胎盘屏障和血脑屏障。因此在新生儿血中检测到IgM抗体表明有先天感染。如在患者的脑脊液检测到IgM抗体表明有活动性神经梅毒。血液中或脑脊液中出现抗梅毒IgM抗体均表示需要治疗。梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义证实试验:体内持续时间:假阳性情况:梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义如系统性红斑狼疮患者血清可使FTA—ABS试验呈假阳,但大多数病例中螺旋体呈串株状荧光。传染性单核细胞增多症,可能由于嗜异性抗体所致,可使TPHA呈假阳性。麻风患者也可使特异试验呈阳性。作为非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR等)初筛阳性标本的确证试验。梅毒患者经过抗梅治疗后,TPPA等梅毒螺旋体抗体试验试验仍可阳性,故TPPA等试验阳性不能作为疗效观察、判断复发及再感染的指标。TPPA等阳性不能区分既往感染和现症感染,应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。梅毒血清学试验的合理应用非梅毒螺旋体试验阳性可能表示:现症感染、接受或未接受过治疗的近期感染,以及生物学假阳性结果。在一般人群中的假阳性率是1-3%。大部分假阳性血清抗体滴度<1∶4,但低滴度不能排除梅毒,可出现在潜伏或晚期梅毒病人中。梅毒螺旋体试验阳性可表示:现症感染;接受或未接受过治疗的近期感染;既往感染。梅毒血清学试验的结果解释试验结果意义TRUST+,TPPA-TRUST假阳性TRUST+,TPPA+现症梅毒、治愈的晚期梅毒(梅毒孕妇所生的婴儿除外)TRUST-,TPPA+极早期梅毒、早期梅毒治愈后TRUST-,TPPA-排除梅毒感染极早期梅毒(尚无任何抗梅毒抗体产生)极晚期梅毒AIDS患者合并感染梅毒梅毒检测策略
TRUST验证TPHA或TPPA或RPR验证TP-ELISA非梅毒螺旋体血清学试验与梅毒螺旋体血清学试验均可以作为梅毒初筛,但阳性必须用另一种方法进行验证,并结合临床,才能诊断是否患有梅毒。
梅毒实验室诊断程序血清TRUST/RPRTPPA/ELISATPPA/ELISATRUST/RPR定量TRUST/RPR定量淋球菌检测淋球菌检测技术和进展奈瑟菌科奈瑟菌属:28个种细菌形态:菌落形态:生长条件:35-36.5℃,5%CO2,PH6.5-7.5遗传特征:转化和接合被列为法定报告的乙类传染病之一感染部位:男性尿道、咽、直肠、女性宫颈管内膜、眼、盆腔、咽、直肠全球性公共卫生问题高发病率,不断增长发病率低估严重危害健康增加HIV感染几率抗生素耐药我国淋病诊断标准2007年版淋病的实验室检测方法2018版直接显微镜检查金典检
诊断分离培养测技术
标准?核酸检测抗原检测?有待完善药物敏感性检测有待普及标本的采集-取材部位男性异性恋者:采集尿道标本,有口淫史者加取咽部标本;同性恋者:采集尿道、直肠及咽部标本.女性
采集宫颈标本,必要时从尿道、直肠、咽部、前庭大腺和尿道旁腺取材;幼女采集阴道分泌物;新生儿眼炎患者
采集眼结膜分泌物,对其母亲采集宫颈、尿道及直肠标本。标本的运送淋球菌外界环境的抵抗力弱,对热敏感,不耐干燥。为保证培养成功,标本采集后,需立即接种淋球菌分离培养基。取材后标本若不能立即接种于选择性培养基上时,需置于非营养型运送培养基中,标本应在12小时内送到实验室,接种于选择性培养基,分离阳性率可达90%以上。超过24小时则分离阳性率下降。直接显微镜检查染色方法:革兰染液美兰染液姬姆萨染液荧光抗体革兰染色为一传统方法,因简便、快捷及价廉、仍然为最广泛采用的方法。革兰染色操作步骤涂片固定染色镜检报告注意事项轻轻滚动、厚薄适宜待室温自然干燥、经火焰固定脱色适宜、避免过度先低倍、再油镜为“多形核白细胞内见到革兰阴性双球菌”。不能直接写为检出“淋球菌”。革兰染色-临床意义男性急性淋菌性尿道炎的尿道标本敏感性及特异性可高达95%~99%,具诊断价值。宫颈标本、无症状男性尿拭子及取自直肠的涂片时敏感性仅40~70%。不推荐直接显微镜检查诊断直肠和咽部淋菌感染。亦不能用于疗后判愈。如果在多形核细胞外见到形态典型的革兰阴性双球菌,需做培养进行确证。见于病程较长的淋病病人,需做培养并进一步鉴定。淋球菌的分离培养培养法为诊断淋病的金标准.对女性淋病的确诊应做淋球菌培养从选择性培养基上分离出淋球菌即可诊断淋病。培养的敏感性81~100%。培养的优点有:
—
特异性极高(100%);
—
可发现无症状淋球菌感染患者;
—
可确诊儿童性虐待;
—
可用于进一步作药敏试验;
—
可用于治疗后的判愈试验。
评价培养基质量的一个重要指标:男性淋菌性尿道炎标本的革兰染色与培养的符合率应达95%~100%。如果革兰染色阳性/培养阴性的比率较高则表明选择性培养基的质量欠佳淋球菌培养操作步骤接种标本培养鉴定接种标本取材后标本应尽可能及早接种。培养基应先置于室温或孵箱中预温。将取材的拭子转动涂布于平皿的上1/4范围,然后用接种环分区划线,以保证获得较纯的单个菌落。接种标本-四区划分接种培养条件:35℃~36.5℃,含5%~10%CO2,湿润(70%湿度)的环境。
CO2环境可由CO2培养箱、CO2产气袋及烛缸提供。使用烛缸时,应使用白色、无芳香味的无毒性蜡烛。在烛缸底部放些浸水棉球以保持一定的湿度。培养时间:24-48小时观察结果:培养24小时后检查平皿,此时没有菌生长的平皿应继续培养至48小时,仍无菌生长才可丢弃,作出淋球菌培养阴性的报告。对选择性培养基上分离的直径在0.5~1mm,无色、灰白色的半透明菌落应作进一步鉴定。鉴定
淋球菌初步鉴定:菌落形态氧化酶试验革兰染色
淋球菌确证试验:糖发酵试验免疫学试验-荧光抗体染色-协同凝集试验酶底物试验DNA探针试验淋球菌初步鉴定结果观察菌落形态:在巧克力培养基平皿上培养24h时菌落直径大约为0.5~1mm,圆形、细小、光滑、湿润、凸起、半透明或灰白色、有黏性。培养48h后菌落直径可达3mm,边缘平滑或呈锯齿状,表面粗糙。氧化酶试剂(0.5%~1%水溶液):盐酸二甲基对苯二胺,氧化酶阳性菌落变紫红色;盐酸四甲基对苯二胺,氧化酶阳性菌落变紫兰色。革兰染色:菌体形态为G-双球菌,呈红色、肾形排列。
结果报告阳性:经过48小时培养,对疑似的淋球菌菌落作氧化酶试验、革兰染色可初步报告。阴性:培养48小时后仍无淋球菌特征菌落生长。
临床意义用于女性患者及症状轻或无症状的男性患者的诊断。用于特殊需要:如淋球菌药敏试验等。确证试验(糖发酵)
操作步骤:菌落分纯制备菌悬液准备糖管加入平衡盐指示液加入菌悬液孵育或水浴观察结果
注意事项:挑取单个菌落,转种到增菌培养基,培养16-18小时。菌悬液浓度﹥109cfu/ml糖的纯度要高,尤其是麦芽糖结果判读:淋球菌仅发酵葡萄糖,产酸不产气,不发酵其他糖类。因此葡萄糖的颜色由红变黄,其他糖管颜色不变。糖发酵试验糖发酵试验检测奈瑟球菌分解特定糖类(葡萄糖、麦芽糖、乳糖及蔗糖)产酸的能力。根据淋球菌仅分解葡萄糖,脑膜炎球菌分解葡萄糖和麦芽糖,乳屑奈瑟球菌分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖或不分解这些糖类,可将淋球菌与可能在淋球菌选择性培养基上分离出的其他奈瑟球菌加以鉴别。葡萄糖麦芽糖乳糖蔗糖淋球菌+---脑膜炎球菌++--乳酰胺奈瑟菌+++-灰色奈瑟球菌----布兰汉卡他球菌----淋球菌糖发酵结果淋球菌的保存方法保存液:脱脂牛奶或脱脂奶粉甘油脑心浸出液甘油胰酶大豆肉汤甘油小牛血清保存形式:低温液氮冷冻干燥药敏试验琼脂纸片扩散法(定性)琼脂稀释法(定量)E-test(定量)微量稀释法(定量)分子生物学方法(耐药基因检测)(定性)琼脂纸片扩散法-基本原理又称Kirby-Baure纸片扩散法(简称K-B法),将含有一定量的抗生素纸片,贴在已涂抹被测菌株的培养基上,在纸片周围形成透明的抑菌圈。根据琼脂纸片扩散试验得到的抑菌圈大小,可判断淋病奈瑟菌对该药物的敏感、中介或耐药。
琼脂纸片扩散法-操作步骤制备菌悬液1%生长添加剂的GC基础培养基+2%血红蛋白的培养基经16~18h培养后,M-H肉汤,校正菌悬液浓度至1.5x108个/ml(相当于0.5个麦氏管浓度)的菌悬液。接种贴加纸片孵育后观察结果:16~20h;抑菌圈应为圆形,圈内无明显单个菌落,用直尺平置培养皿背面,测量抑菌圈直径,以“mm”为单位记录结果。按照抑菌圈大小的判断敏感、中介和耐药。琼脂纸片扩散法-临床意义K-B法操作简单,适合临床分离单个菌株对多种不同抗生素的敏感性检测,指导临床用药。K-B法试验结果与临床治疗的关系:敏感(S):表示感染者可以使用推荐剂量(常规剂量)的该抗生素进行治疗,失败的可能性小于5%,禁忌症除外。中介(I)药物浓度在生理性浓度部位具有治疗效果,或高于常规剂量也可有临床效果。耐药(R)是指常规剂量抗生素不能抑制被测菌的生长,其临床疗效并不可靠,临床治疗的失败率大于15%。琼脂纸片扩散法-注意事项菌悬液应在15分钟内使用用于淋病奈瑟菌测试的抗生素有五大类,每类药只要选一种为代表试验,其敏感程度即可代表同类其他药物。主要是:青霉素类;四环素类;氨基糖苷类;第二、第三代头孢菌素类;喹诺酮类药物。根据临床的需要选择合适的抗生素。纸片一旦贴上就不可再拿起,每张纸片的间距不少于24mm,纸片中心距平皿的边缘不少于15mm。直径为9.0cm的平板最多贴7张药敏纸片。琼脂纸片扩散法-注意事项应使用符合国际和国家标准的药敏纸片,并且按照各种药敏纸片保存条件低温保存,长期保存的温度应该低于-30℃。在透明抑菌环内有明显单个菌落,应重新鉴定并重复试验。使用标准菌株做对照,只有当标准菌株的药敏结果在受控范围内时,检测结果才有效;若不在受控范围,应认真分析原因后重新检测。EtestEtest原理结合了琼脂稀释法和纸片扩散法。Etest由一个长60mm、宽5mm非活性的塑料薄条构成。试条的一面标有以μg/ml为单位的MIC判读刻度,试条柄端的用双字母代码表示抗生素种类,试条的另一面固定有一个预先制备的干燥而稳定的抗生素指数浓度梯度。Etest简易流程:准备——菌悬液制备——沾取菌液——涂布——干燥平板——贴条——培养Etest结果判读:1.菌落生长;2.抑菌圈;3.MIC读数琼脂稀释法将待检菌接种到含有不同浓度抗菌药物的琼脂平皿上,抗菌药物浓度小时细菌生长,浓度大时细菌生长被抑制,据此可测出该菌株最低抑菌浓度(MIC)判断对抗菌药物的敏感性。此法主要用于耐药监测核酸检测优势高敏感性、特异性不依赖于活的病原体的存在,无需特殊运送条件可采用尿液等非侵入性标本多重检测
沙眼衣原体检测我国生殖道沙眼衣原体感染诊断标准
2016年版1.流行病学史2.临床表现3.实验室检查3.1涂片检查3.2细胞培养3.3抗原检测3.4核酸检测国家行业诊断标准NG/CT实验室诊断技术的共同点病原学检测标本:男性尿道分泌物标本:取材拭子插入尿道2~3cm,稍用力转动,保留数秒钟再取出,以采集到粘膜上皮细胞女性宫颈分
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