血栓与止血检验的基本方法：血小板的检验

2023/11/251第十一章血栓与止血检验的基本方法

第三节血小板的检验（P332-340）

一、血块收缩试验（筛查试验，P324）二、血小板粘附试验三、血小板聚集试验四、血小板膜糖蛋白五、血小板活化分析六、血小板第3因子有效性七、血小板自身抗体八、血小板生存时间（略）2023/11/252一、血块收缩试验

（clotretractiontest，CRT）分为定量法、试管法和血浆法原理：全血或血浆凝固后，由于血小板收缩使血清从纤维蛋白网眼中挤出而使血块缩小，观察血清占原有全血量（如定量法、试管法）或血浆量（如血浆法）的百分比（即血块收缩率）2023/11/253CRT参考值试管法：2h开始收缩，18-24h完全收缩定量法：48%-64%血浆法：＞40%

2023/11/254CRT临床意义下降：见于血小板减少症、血小板增多症、血小板无力症、低或无纤维蛋白原血症、严重凝血功能障碍、异常球蛋白血症（专）、红细胞增多症（定量法及试管法）等增加：纤维蛋白稳定因子缺乏症、严重贫血（定量法及试管法）应用评价：半定量，干扰因素较多2023/11/255二、血小板黏附试验

（plateletadhensiontest，PAdT）原理：用一定量的抗凝血与一定表面积的玻璃表面接触一定时间，血小板可黏附于带负电荷的玻璃表面，根据黏附前后的血小板数量之差，得出血小板黏附百分率。

参考范围：不同方法参考范围各不相同2023/11/256PAdT操作（以玻璃珠柱法为例）5s5s5s5s血小板黏附率（%）=黏附前血小板数-黏附后血小板数黏附前血小板数×100%临床意义：减低:先天性和继发性血小板功能异常（以后者多见），如VWD、巨大血小板综合征、服用抗血小板药物等增加:见于血栓前状态和血栓形成性疾病，如高血压病、糖尿病、妊高征、心脑血管病等应用评价：影响因素较多，难于标准化2023/11/257三、血小板聚集试验

（plateletaggregationtest，PAgT）血小板聚集试验有光学比浊法和全血电阻法比浊法原理：用乏血小板血浆和富含血小板血浆调整透光度，在富含血小板血浆的比浊管中加入诱导剂，仪器自动搅拌，随着血小板聚集的发生其透光度逐渐增高，记录仪自动记录血小板透光度的变化（即血小板聚集曲线）参数判断血小板的聚集功能

ADP

肾上腺素花生四烯酸瑞斯托霉素胶原常用的诱导剂：2023/11/258比浊法血小板聚集试验原理PRP为加诱导剂之前PRP为加诱导剂之后2023/11/259血小板聚集仪2023/11/2510A:血小板无力症患者血小板对ADP无反应

B:正常人血小板对低浓度ADP呈可逆性聚集

C:正常人血小板对中浓度ADP呈双峰、不可逆性聚集

D:正常人血小板对高浓度ADP呈单峰、不可逆性聚集

E：VWD患者血小板对瑞斯托霉素无反应

F:正常人血小板对瑞斯托霉素有反应2023/11/2511PAgT参考值最大聚集率

1分钟聚集率聚集曲线斜率不同仪器、不同诱导剂及浓度参考值有别各实验室应建立自己实验室的参考值2023/11/2512PAgT临床意义减低：血小板无力症、血小板贮存池病（无第二个峰）、

VWD（瑞斯托霉素作为诱导剂时，常减低）、巨大血小板综合征、低或无Fg血症、MDS、MPD、急性白血病、肝硬化、尿毒症、服用抗血小板药物、ITP、细菌性心内膜炎、维生B12缺乏症等。增加：见于血栓前状态和血栓形成性疾病，如糖尿病、肾小球肾炎、肾病综合征、心脏瓣膜置换术后、心绞痛、心肌梗死、脑梗死、深静脉血栓形成、抗原-抗体复合物反应、高脂饮食、口服避孕药、吸烟等。2023/11/2513PAgT应用评价比浊法与电阻法各有优缺点比浊法PRP的血小板浓度对结果影响较大不同激活剂其检测目的不甚相同临床上主要用于抗栓治疗的监测2023/11/2514原理放射免疫法（RIA）或流式细胞术（FCM）检测参考范围：不同试剂参考值有别

临床意义GPⅠb缺乏见于巨大血小板综合征

GPⅡb/Ⅲa缺乏见于血小板无力症增加见于血栓前状态与血栓性疾病评价本试验的特异性和敏感性高，故对诊断巨大血小板综合征和血小板无力症具有诊断价值。

标本采集须注意，避免体外激活，出现假阳性。四、血小板膜糖蛋白2023/11/2515五、血小板活化分析流式细胞仪检测：血小板膜磷脂酰丝氨酸和凝血因子活化血小板膜糖蛋白分子标志物

ELISA或RIA检测：血浆

-TG和PF4TXB2、尿11-DH-TXB2参考范围：不同方法或试剂参考范围有别2023/11/2516血小板活化分析临床意义：1、血栓前状态与血栓性疾病血小板活化程度升高，颗粒释放反应功能亢进。2、抗栓治疗的监测了解抗血小板药物应用前后血小板活化的情况，有助于选择最佳治疗方案和疗效观察。3、血小板功能缺陷病的诊断血小板活化表达减少见于先天性或获得性血小板α颗粒缺乏症等。

2023/11/2517血小板活化分析应用评价：1、血小板活化分析反映了血小板在体内被激活及释放的情况，但在体外检测过程中血小板容易被激活如采血不顺利、所用器材不符合要求等，而使结果偏高。通常：来自体内激活者

-TG/PF4之比约为5∶1，来自体外激活者

-TG/PF4之比约为2∶1。2、TXB2常与6-K-PGF1α同时检测，并报告两者的比值。尿11-DH-TXB2测定不受体外血小板活化的影响，因此更能真实反映血小板在体内被活化情况。3、由于这类试验影响因素较多，临床上应用较少。2023/11/2518六、血小板第3因子有效性检测

（plateletfactor3availabilitytest，PF3aT）

本试验利用白陶土作为血小板的活化剂促进PF3形成，用氯化钙作为凝血反应的启动剂，用正常血浆、患者血浆的PPP和PRP相互组合，测定各自的凝固时间，比较各组时间，可判断PF3有否缺陷。原理：2023/11/2519PF3aT有效性测定分组组别患者血浆（ml）正常血浆（ml）PRPPPPPRPPPP10.1

0.12

0.10.1

30.10.1

4

0.10.12023/11/2520PF3aT参考值

第3组、第4组分别为患者和正常人（作为对照管），患者PF3有缺陷或内源凝血因子有缺陷时第3组凝固时间比第4组长。当第1组较第2组凝固时间延长5s以上，即为PF3有效性减低。组别患者血浆（ml）正常血浆（ml）PRPPPPPRPPPP

10.1

0.12

0.10.1

30.10.1

4

0.10.12023/11/2521PF3aT临床意义

减低：见于先天性血小板PF3a缺乏症、血小板无力症、肝硬化、尿毒症、弥散性血管内凝血、异常蛋白血症、

SLE、ITP、MDS、急性白血病及某些药物影响等。应用评价：由于检测结果的变异较大，临床上很少使用。2023/11/2522七、血小板自身抗体

（plateletassociatedimmunoglobulin，PAIg）

在某些免疫性疾病中，血小板膜表面存在着抗体（IgG、IgA、IgM）或